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三黄茵赤汤对D-氨基半乳糖诱导人胚胎肝细胞系LO2坏死的影响
目的 探讨三黄茵赤汤治疗急性肝损伤的可能作用机制.方法 将人胚胎肝细胞系LO2分为正常组、模型组、对照组及三黄茵赤汤高、中、低剂量组,通过D-氨基半乳糖(D-GalN)诱导LO2细胞坏死,三黄茵赤汤高、中、低剂量组分别给予三黄茵赤汤3、2、1 mg/ml,对照组给予受体相互作用蛋白1抑制剂(Nec-1)60 mmol/L,采用MTT法测定各组细胞存活率,Hoechst、PI染色分析细胞是否发生凋亡、坏死,流式细胞仪检测细胞凋亡率及细胞内活性氧(ROS)水平,Western blot法检测各组细胞Casepase-3、受体相互作用蛋白1 (RIP1)、受体相互作用蛋白3(RIP3)表达情况.结果 与模型组比较,三黄茵赤汤中、低剂量组均能提高细胞生存率和ROS的清除率,三黄茵赤汤中剂量组能降低Hoechst、PI染色荧光强度,三黄茵赤汤高剂量组亦能提高ROS的清除率(P＜0.05).三黄茵赤汤中剂量组降低细胞晚期凋亡率、提高生存率的效果好.三黄茵赤汤各剂量组均能减少RIP1及RIP3表达(P＜0.05);与三黄茵赤汤各剂量组相比,对照组效果更加明显(P＜0.01). 结论 三黄茵赤汤通过抑制RIP1及RIP3的表达而对D-GalN诱导LO2细胞坏死产生保护作用.
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抗肝衰竭良方——三黄茵赤汤的急毒试验
目的:研究抗肝衰竭良方—三黄茵赤汤的急性毒性,为临床安全使用该方提供实验依据.方法:用大给药量——150g/(kg/d)的三黄茵赤汤给小鼠灌胃7d,观察小鼠的毒性反应,记录小鼠的死亡情况.检测小鼠血清中谷草转氨酶(AST)和谷丙转氨酶(ALT)的含量,病理切片观察肝脏的损伤程度.结果:实验小鼠未出现毒性反应,与对照组比较,体重变化差异不显著(P＞0.05),与对照组比较,AST和ALT的含量无统计学差异(P＞0.05),无肝脏病理损伤情况,大给药量相当于60 kg体重成人临床推荐剂量的82倍.结论:三黄茵赤汤大给药量对实验小鼠肝脏无毒性,三黄茵赤汤临床剂量服用安全.
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三黄茵赤汤的急性毒性实验研究
目的 研究三黄茵赤汤的急性毒性,为临床安全使用该方提供实验依据.方法 用大给药量150g/(kg·d)的三黄茵赤汤给小鼠灌胃7天,观察小鼠的毒性反应,记录小鼠的死亡情况.检测小鼠血清中谷草转氨酶(AST)和谷丙转氨酶(ALT)的水平,病理切片观察肝脏的损伤程度.结果 实验小鼠未出现毒性反应,与对照组比较,体重变化差异不显著(P＞0.05),与对照组比较,AST和ALT的含量无统计学差异(P＞0.05),大给药量相当于60kg体重成人临床推荐剂量的82倍.结论 三黄茵赤汤大给药量对实验小鼠肝脏无毒性,三黄茵赤汤临床剂量服用安全.
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三黄茵赤汤防治大鼠急性肝衰竭的机制
目的：观察三黄茵赤汤防治D-氨基半乳糖（D-GalN）联合内毒素（LPS）诱导的大鼠急性肝衰竭氧化应激及肝细胞凋亡的作用。方法48只SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、三黄茵赤汤高、中、低剂量组、双环醇组，每组8只。各组对应给药5 d，建立急性肝衰竭模型48 h后处死动物，检测血清中丙氨酸转氨酶、天门冬氨酸氨基转移酶、总胆红素，检测全血中凝血酶原时间、国际标准比率、血浆纤维蛋白原；HE染色观察肝脏病理的变化，检测肝脏组织匀浆液SOD、MDA的含量；免疫组化、免疫印迹检测肝组织caspase-3蛋白表达。结果与模型组比较，三黄茵赤汤高、中、低剂量组、双环醇组均能减少血清中丙氨酸转氨酶、天门冬氨酸氨基转移酶、总胆红素的含量、缩短全血中凝血酶原时间、国际标准比率时间，增加血浆纤维蛋白原的含量（P<0.05）；明显改善肝脏组织病理变化，提高肝脏组织匀浆液SOD活性，减少MDA含量（P<0.05）；下调caspase-3蛋白表达（P<0.05）；三黄茵赤汤中剂量组与双环醇组无统计学差异（P>0.05），高剂量组优于双环醇组（P<0.05）。结论三黄茵赤汤防治D-GalN联合LPS诱导的急性肝衰竭大鼠成量效关系，具有抗氧化的作用；三黄茵赤汤可能通过抗氧化应激抑制caspase3表达从而减少肝细胞凋亡，以达到防治大鼠急性肝衰竭的作用。
