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狼疮平颗粒通过核因子κB信号途径下调BXSB狼疮肾炎小鼠肾组织MCP-1表达
目的 研究狼疮平颗粒是否可以通过下调核因子κB(NF-κB)信号途径抑制单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemoattractant protein l,MCP-1)的表达而发挥对狼疮肾炎(lupus nephritis,LN)小鼠的肾脏保护作用.方法 将18只雄性11周龄BXSB LN小鼠随机分为模型组、激素组和中药组,每组6只,分别给予生理盐水、甲泼尼龙、狼疮平颗粒灌胃；另选6只同周龄的雄性C57 BL/6小鼠作为正常组,给予生理盐水灌胃,均每天1次,连续4周.测定24 h尿蛋白量；分别采用RT-PCR、Western blot检测肾组织中MCP-1 mRNA和蛋白表达；免疫组化法检测肾组织NF-κB p65表达；PAS染色做肾组织病理活动性指数(activity index,AI)计分；ELISA法检测ds-DNA抗体含量；分析上述指标间的关系.结果 模型组24h尿蛋白水平、血清ds-DNA抗体含量、MCP-1蛋白及mRNA表达水平、NF-κB p65表达水平、AI计分均较正常组明显升高(P＜0.01).用药后中药组与激素组上述指标均明显降低(P＜0.05).LN小鼠MCP-1蛋白表达水平与其mRNA表达水平、NF-κB p65表达水平、AI计分、24h尿蛋白定量及ds-DNA抗体含量均呈正相关(r=0.984、0.936、0.887、0.698、0.679,P＜0.01).结论 狼疮平颗粒可能通过抑制NF-κB的核转位降低MCP-1水平而发挥肾脏保护作用.MCP-1在LN的发生和发展过程中起重要作用,是LN理想的治疗靶位之一.
关键词： 单核细胞趋化蛋白-1 核因子κB 狼疮平颗粒 狼疮肾炎 -
狼疮平颗粒对BXSB狼疮性肾炎小鼠B淋巴细胞活化因子表达的影响
目的 研究B淋巴细胞活化因子(B lymphocyte activating factor,BAFF)在BXSB狼疮性肾炎小鼠血清和外周血B淋巴细胞(PBBC)中的表达,并观察中药狼疮平颗粒的治疗作用.方法 将11周龄雄性BXSB狼疮性肾炎小鼠18只随机分为狼疮对照组、激素治疗组、狼疮平治疗组,每组6只；另取11周龄雄性C57BL/6小鼠6只作为正常对照组.分别给予灌胃生理盐水(10 ml/d)、甲泼尼龙[5mg/(kg·d)]、狼疮平颗粒[4 g/(kg·d)]、生理盐水(10 mL/d),治疗4周,测定各组尿蛋白、ds-DNA和体重,分别应用ELISA、RT-PCR方法检测血清中可溶性BAFF(sBAFF)和外周血B细胞中BAFF-mRNA的表达及变化,并观察肾脏病理活动性计分、24h尿蛋白定量、ds-DNA与sBAFF的关系.结果 狼疮性肾炎小鼠血清sBAFF、PBBC中BAFF mRNA水平、24h尿蛋白定量、血清ds-DNA含量均较正常小鼠明显升高.激素和狼疮平治疗组治疗后sBAFF、BAFF mRNA较治疗前明显下降,差异有统计学意义(P＜0.05),两组治疗后sBAFF、BAFF mRNA水平无明显差异(P＞0.05).狼疮性肾炎小鼠血清sBAFF水平与肾病理活动性计分、24h尿蛋白定量、ds-DNA成正相关(r=0.8098、0.8220、0.8535,P＜0.01).结论 BAFF在狼疮性肾炎的发生发展中起着重要的作用,可以监测病情变化并预测复发,是狼疮性肾炎治疗的理想靶点之一.中药狼疮平可以通过降低BAFF水平而改善狼疮性肾炎病情,值得进一步临床推广应用.
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狼疮平颗粒中主要药材的薄层色谱分析
目的 探讨建立狼疮平颗粒的质量控制标准.方法 采用薄层色谱法对狼疮平颗粒中广豆根、两面针、女贞子、功劳木等药材进行了定性鉴别.结果 各色谱斑点清晰,阴性对照无干扰.结论 该鉴别方法简便、可靠、灵敏、专属性强,可作为狼疮平颗粒的质量控制参考.
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狼疮平颗粒剂质量标准初探
目的 测定狼疮平颗粒中君药广豆根主要有效成分苦参碱的含量,初步建立狼疮平颗粒质量控制标准.方法 采用HPLC法,色谱柱Kromsil NH2(4.6mm×200mm,5um);流动相:乙腈-无水乙醇-水(80:16:4),用磷酸调pH值为2.0±0.05;流速1.0mL/min;柱温:25℃;检测波长:210nm.结果 测得3批样品中苦参碱平均含量为3.73mg/g,确定本品每克含苦参碱不得少于3.20mg.结论 以测定广豆根主要成分苦参碱含量为基础,建立狼疮平颗粒质量控制标准具有可行性.
