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杜仲叶提取物对体外培养的成骨细胞代谢功能调节研究
目的：研究杜仲叶提取物对体外培养成骨细胞(Osteoblast OB)代谢功能的调节作用，从而进一步明确杜仲补肾、强筋健骨的作用机理以及筛选杜仲叶防治骨质疏松药效成分。方法：用杜仲叶三个提取部位(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ)不同浓度对体外培养的成骨细胞作用。由新生SD大鼠头盖骨作原代培养，用传代的第一代细胞做药效试验。测定指标：(1)细胞增殖情况，用MTT计数法［1、2］；(2)碱性磷酸酶(ALP)活性测定，对硝基磷酸盐法。结果：Ⅱ、Ⅲ提取部位对细胞增殖作用与对照组比较P<0.001，ALP的活性与对照组比较，三个部位均为P<0.001。结论：表明Ⅱ、Ⅲ提取部位的10-5mg/L浓度组具有明显的调节骨代谢功能的药效作用。
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含骨松宝的老龄大鼠血清对兔成骨细胞增殖作用的实验研究
目的:观察骨松宝对体外培养成骨细胞增殖和代谢的影响.方法:给18月龄老年大鼠灌胃骨松宝1.5g/kg体重,每日2次,连续3天,末次灌胃后1h取血分离血清,用D8900培养基分别配成含药鼠血清7.5%和15%的培养基,并用于培养成骨细胞24h,同时以加有7.5%和15%未用药老龄大鼠血清的D8900培养基、含20μmol/L氟化钠(NaF)的D8900无血清培养基及D8900无血清培养基作对照,用MTT法检测细胞增殖,并测定培养基上清液中Ca2+浓度及碱性磷酸酶(ALP)的含量变化.结果:与加有相同浓度鼠血清的D8900培养基组、D8900培养基加NaF组和D8900培养基组比较,含药鼠血清组的成骨细胞增殖明显,差异有显著性(P＜0.01),培养基中的Ca2+消耗量明显增加(P＜0.05,P＜0.01),ALP浓度明显升高(P＜0.05,P＜0.01).结论:骨松宝能促进成骨细胞DNA合成和提高对Ca2+的利用,促进成骨细胞的生长增殖.
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生物陶瓷与细胞外基质对成骨细胞生长及代谢影响
本研究采用了体外细胞培养技术,将人胚成骨细胞分别与不同生物陶瓷(HA,TCP,FHA,BGC)及复合生物陶瓷(BMP,TGF-β1)共同培养.通过相差显微镜及扫描电镜观察材料表面及周围细胞形态及附着情况,分子生物学方法测定细胞增殖率,碱性磷酸酶(ALP)、骨钙素(OC)、白细胞介素6(IL-6)及转化生长因子β1(TGF-β1)分泌水平,探讨其作用机理.结果发现复合生物陶瓷细胞增殖率,ALP、OC、IL-6及TGF-β1水平明显高于相应单一材料及空白对照.而不同的复合材料细胞增殖率及细胞基质蛋白分泌有所差异.FHA+BMP,TCP+BMP及HA+BGC+TGF-β1显示了较高水平.不同材料培养不同时间对细胞生长及代谢影响有所不同,反映了成骨细胞培养方法评价人工骨替代材料成骨活性规律是切实可行的.
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实验性氟暴露对成骨细胞成骨功能表达的影响
我国不仅地方性氟病流行区域广,患者多,工业氟暴露对工人健康的影响也较明显.过量的氟摄入可引起全身骨及其他组织损害[1].其异常改变与氟中毒导致骨形成及骨矿化异常有关,但其机制尚不清楚.我们拟通过离体SD大鼠成骨细胞培养,研究过量氟对成骨细胞成骨活性的影响,从而在细胞学水平了解氟骨症的机制.碱性磷酸酶(ALP)和骨钙素(OC)是成熟成骨细胞合成和分泌的两种主要的非胶原蛋白,代表成骨细胞活性状态,是检测骨形成的指标.因此,我们通过成骨细胞ALP活力及细胞培养液中OC水平测定,了解氟过量对骨形成过程的影响.
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硅灰石及二氧化钛涂层材料的生物学性能
目的 对硅灰石涂层(CaSiO3)和二氧化钛涂层(TiO2)的生物学性能进行评价,为临床选择种植体表面改性方法提供实验依据.方法 在纯钛表面采用等离子喷涂的方法分别加涂羟基磷灰石(HA)涂层、CaSiO3涂层和TiO2涂层,制作成1 cm×1 cm×0.2 cm的正方形块状物各78块,HA涂层组为阳性对照组,不加涂层的纯钛组(Ti)作为阴性对照组.通过兔骨髓基质干细胞诱导的成骨细胞体外培养的方法,在生物材料表面接种成骨细胞,用碱性磷酸酶染色和Ⅰ型胶原染色对诱导的成骨细胞进行鉴定,测定细胞增殖曲线、细胞层碱性磷酸酶活性值和细胞总蛋白质含量,用倒置相差显微镜和扫描电子显微镜(SEM)进行细胞形态学观察.结果 成骨细胞在二种新型涂层材料表面均能很好地增殖和分化,CaSiO3涂层和HA涂层的生物活性大于TiO2涂层(P＜0.05).结论 CaSiO3涂层具有良好的生物活性,是一种较有应用前途的种植体涂层材料.TiO2涂层也有较好的生物相容性,但是其生物活性还有待于进一步提高.
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自体成骨细胞培养移植治疗骨折延迟愈合/不愈合11例初步观察报告
骨折延迟愈合、不愈合是创伤骨科的一大棘手并发症.近年有大量关于从骨髓间充质干细胞分化培养成骨细胞的成功研究报道.
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氨基注入钛表面及其微观分析
目的研究氨基基团注入纯钛表面后,材料表面的微观结构和化学组成.方法在室温下将氨基以每平方厘米5×1017,1×1017和5×1016离子的注入剂量注入到纯钛表面,注入能量为100keV,离子束电流密度为10μA/cm2.对改性材料进行X射线光电子能谱分析,以研究注入后材料表面的化学成分,并通过扫描电镜观察材料注入前后表面物理结构的变化.结果得到了XPS全谱、结合能值以及扫描电镜照片,发现注入后,样品表面由氧、钛、碳、氮元素组成,用高斯拟合对材料表面可能存在的元素化学状态进行了分析.扫描电镜结果发现材料表面结构在注入前后未发生明显变化.结论氨基基团注入可成功地将有机氨基基团引入到纯钛材料表面,形成以TiN为主的含钛、氨基化合物的改性层.此方法对材料本体的机械性能及粗糙度等方面影响很小.
关键词： 离子注入 X射线光电子能谱分析 扫描电镜 成骨细胞培养 -
体外成骨细胞分离培养技术在国内实验骨科中的应用
近几年来,越来越多的学者利用体外成骨细胞分离培养技术开展实验研究,取得了很大的成绩.经实验证实,体外培养的成骨细胞具有与体内成骨细胞一样的生物特性,能很好地反映成骨细胞的功能活动特点.
