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中药复方、单药及活性成分抗Epstein-Barr病毒感染的研究进展
Epstein-Barr病毒(EBV)可感染95％以上的世界人口,与多种人类疾病尤其是恶性肿瘤密切相关,目前实验和临床还未有彻底清除EBV的方法.数年来,中医药实验和临床研究显示63种中药复方和单药,59种中药活性成分分别具有抑制EBV DNA复制,EA、EBNA1、EBNA2、LMP1等抗原表达;影响抗体和细胞因子产生,抑制EBV转化力和异型淋巴细胞数量;通过EBV靶点抑制EBV阳性肿瘤细胞生长,诱导细胞凋亡等方面的作用.随着中药研究的深入开展,将会有越来越多的中药或其活性成分有效地应用于抗EBV感染及相关疾病的治疗.
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IgA/EBV-VCA阳性人群和鼻咽癌患者的EB病毒潜伏膜蛋白2特异性细胞免疫及EBV DNA载量检测
目的 探讨IgA/VCA抗体滴度与EBV LMP2特异性细胞免疫水平和EBV DNA拷贝数关系.方法 免疫酶法检测普查样本IgA/VCA抗体滴度;选取IgA/VCA抗体阳性人群和治疗前鼻咽癌患者,通过γ-干扰素Elispot和EBV DNA荧光定量试剂盒检测LMP2特异性细胞免疫水平和血浆中的EBV DNA载量.结果 普查广西苍梧县城自然人群共1 233人,其中80人IgA/VCA抗体阳性,阳性率为6.0％.对其中的72例IgA/VCA抗体阳性人群和20未治疗的鼻咽癌患者进行了LMP2特异性细胞免疫和EBV DNA检测,随着抗体滴度的升高,LMP2特异性细胞免疫反应水平降低,而血浆中EBV DNA拷贝数有随IgA/VCA抗体滴度升高而增加的趋势.结论 EBV-LMP2特异性细胞免疫水平和EBV DNA拷贝数可能与IgA/VCA抗体滴度相关.
关键词： IgA/ EBV-VCA 潜伏膜蛋白2 细胞免疫 EBV DNA -
EBV 搞体与 EBV DNA 水平的影响因素及其相关性分析
目的：分析 EB 病毒（EBV）抗体及 EBV DNA 的影响因素及关联性。方法回顾性分析2014年1－9月在北京大学第一医院就诊的143例患者的年龄、性别、血常规、肝功能、EBV 抗体及 DNA 检查结果，用 Spearman 相关性分析对 EBV 抗体及 EBV DNA 的相关影响因素进行分析，多个独立样本间比较使用 Kruskal －Wallis H 检验，独立样本间两两比较使用 Mann －Whitney U 检验。结果血清 EBV DNA（r ＝0．169～0．693，P ＜0．05）、EBV －VCA －IgM（r ＝0．153～0．434，P ＜0．05）均与外周血淋巴细胞 EBV DNA 、ALT、AST、ALP、GGT、白细胞（WBC）及异形淋巴细胞呈正相关，并且两者也呈正相关（r ＝0．434，P ＝0．00）；外周血淋巴细胞 EBV DNA 与血清EBV DNA、EBV －VCA －IgM、AST、ALP、WBC 及异形淋巴细胞呈正相关（r ＝0．207～0．693，P ＜0．05）。外周血淋巴细胞 EBV DNA 阳性率70．6％（101／143），血清 EBV DNA 阳性率32．2％（46／143）。EBV －VCA －IgM阳性率22．4％（32／143），22．5％（25／111）的 EBV－VCA －IgM阴性患者血清 EBV DNA 阳性。血清 EBV DNA 阳性患者 EBV －VCA －IgM阳性率（21／46，45．7％）明显高于外周血淋巴细胞 EBV DNA 阳性者（29／101，28．7％），差异有统计学意义（χ2＝7．95，P ＜0．01）。结论血清 EBV DNA 和 EBV －VCA －IgM有较强的关联性，并且前者的阳性率高于后者，更有助于 EBV 感染的早期诊断，联合检测两项指标可提高 EBV 现症感染的检出率。
关键词： 爱泼斯坦巴尔病毒感染 EBV DNA -
治疗前血浆EBV DNA在调强放疗鼻咽癌患者预后中的意义
[目的]探讨初治鼻咽癌患者治疗前血浆EBV DNA表达水平的预后价值.[方法]回顾分析667例初诊鼻咽癌接受根治性调强放疗患者的临床资料,分析治疗前血浆EBVDNA与临床分期、总生存的关系.以1500拷贝数/ml为临界值,将患者分为EBV DNA高表达者和低表达者.Kaplan-Meier法计算生存率并用Log-rank法检验,多因素分析采用Cox模型分析.[结果]Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期患者中EBV DNA＞0拷贝数/ml的比率分别为18.8％、34.4％、50.5％、66.4％.患者治疗前血浆EBV DNA的表达量与临床分期呈正相关(P＜0.001).临床分期和EBV DNA是患者总生存的独立预后因素.Ⅲ期患者中,EBV高低者两组差别具有统计学意义(x2=4.084,P=0.043),EBV DNA还是Ⅲ期患者总生存的独立预后因素.Ⅰ～Ⅱ期及Ⅳ期患者中,EBV DNA高低两组总生存率差别无统计学意义,但多因素分析发现,EBV DNA的绝对拷贝数是总生存的独立预后因素(P＜0.05).[结论]治疗前血浆EBV DNA对于各期鼻咽癌患者均具有预后作用,对于Ⅲ期患者,以1500拷贝数/ml为临界值,可以较好地判断预后,但对于Ⅰ～Ⅱ期及Ⅳ期患者,还需要更多的研究以确定合适的临界值.
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鼻咽癌患者血浆EBV DNA、VCA-IgA的检测意义
[目的]探讨鼻咽癌患者血浆EBV DNA、VCA-IgA的检测意义.[方法]采用荧光定量PCR技术检测血浆EBV DNA水平,常规免疫酶法检测VCA-IgA抗体滴度,分别检测168例初诊鼻咽癌患者和健康对照者60人的血液标本.[结果]鼻咽癌患者血浆EBV DNA、VCA-IgA阳性率分别为34.52％(58/168)和62.50％ (105/168),均明显高于健康对照者的3.33％(2/60)和6.67％(4/60) (P均＜0.01)；两者联合检测的敏感度显著高于单一指标检测(P＜0.05).治疗后EBV DNA及VCA-IgA阳性率均明显低于治疗前(P＜0.01)；肿瘤残余组患者血浆EBV DNA、VCA-IgA阳性率明显高于肿瘤完全消退组及健康对照组(P＜0.01).[结论]血浆EBV DNA、VCA-IgA联合检测在鼻咽癌诊断、近期疗效判定方面有重要价值.
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鼻咽癌放疗过程中血浆EBV DNA水平的动力学研究
目的 探讨过程中鼻咽癌患者外周血EBV DNA水平的动态变化规律及与临床疗效的关系.方法 运用荧光定量PCR技术动态检测22例鼻咽癌患者放疗期间血浆EBV DNA水平,放疗期间每周第1d检测1次;临床观察放疗过程中鼻咽部肿瘤消退情况与外周血EBV DNA水平变化的关系.结果 放疗完成2周时,血浆EBV DNA阳性率及拷贝数较前显著下降,其余各周之间阳性率及拷贝数均无明显差异.放疗过程中血浆EBV DNA水平变化表现为三种动力学曲线形式.每周临床观察鼻咽肿块消退情况发现:随着放疗剂量增加,鼻咽肿块逐渐缩小,血浆EBV DNA水平逐渐下降.结论 放疗过程中血浆EBV DNA水平变化与鼻咽癌患者临床疗效关系密切,值得进一步研究.
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荧光定量PCR法检测鼻咽癌血浆游离EBV DNA的临床意义
目的通过检测血浆中游离EBV DNA水平,探讨其在鼻咽癌诊断、鉴别诊断、临床分期中的临床意义.方法采用荧光定量PCR方法定量检测111例初治鼻咽癌患者和107例放疗后持续缓解患者血浆游离EBV DNA水平.结果初治组及临床缓解组血浆中游离EBV DNA检出率分别为74.8%(83/111)和4.6%(5/107),初治组检出率显著高于临床缓解组,在统计学上有显著性差异;初治组中晚期(Ⅲ+Ⅳ期)血浆游离EBV DNA拷贝数显著高于早期(Ⅰ+Ⅱ期);N晚期(N2+N3)拷贝数显著高于早期(N0+N1);T晚期(T3+T4)拷贝数显著高于早期(T1+T2);统计学上均有显著性差异.结论荧光定量PCR方法检测血浆中游离EBV DNA是一种敏感可靠的方法,血浆游离EBV DNA定量检测对鼻咽癌诊断、鉴别诊断、分期、治疗后监测有重要的临床意义,有望成为鼻咽癌肿瘤学标记物.
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鼻咽癌病人外周血EBV DNA低检出限与不同核酸抽提试剂关系的分析
目的 探讨两种核酸提取方法与鼻咽癌患者外周血EBV DNA低检出限的关系.方法 收集40例EB病毒感染鼻咽癌患者全血,分别采用核酸释放剂法与柱提法抽提DNA,检测EBV DNA载量,比较两种核酸提取方法检测的检出率,并确认其对应低检出限.结果 40例携带EBV鼻咽癌患者全血,使用核酸释放剂法检测EBV DNA其检出率为90.0％明显高于柱提法的检出率62.6％,差异有统计学意义(x2=8.352,P=0.008).按国家行业标准验证的核酸释放剂法检测低检出限为400copies/ml;采用柱提法低检出限为900copies/ml.结论 选用核酸抽提试剂检测鼻咽癌病人外周血EBV DNA时,所选择试剂应该满足或优于EBV DNA试剂盒低检测限的性能要求.选用合适的核酸抽提试剂与EBV DNA检测试剂能够客观的反映鼻咽癌患者体内EB病毒的变化,为临床的诊断及治疗提供准确可靠的数据.
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血浆EBV DNA水平与EBVCA-IGA抗体滴度对鼻咽癌诊断作用的对比研究
目的 比较研究血浆EBV DNA水平与EBVCA-IGA抗体滴度对鼻咽癌的诊断作用.方法 73例初治鼻咽癌患者经病理确诊,按福州会议"1992鼻咽癌分期"进行TNM分期,检测患者空腹血浆EBV DNA水平和EBVCA-IGA抗体滴度.采用SPSS 13.0统计软件对资料进行比较,结合临床资料对结果 进行分析.结果 血浆EBV DNA水平与EBVCA-IGA抗体滴度对鼻咽癌的诊断作用比较,差异有统计学意义,血浆EBVDNA的诊断特异性明显高于后者;血浆EBV DNA水平在有、无淋巴结转移组间的比较,差异有统计学意义(P<0.05).结论 与EBVCA-IGA抗体滴度相比,血浆EBV DNA对NPC诊断有较高特异性;血浆EBV DNA水平可能预示鼻咽癌淋巴结转移.
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血浆EBV DNA检测对鼻咽癌的诊断作用
目的 探讨血浆EBV DNA检测对鼻咽癌的诊断作用.方法 将2006年12月至2007年3月在我科就诊、病理确诊的65例鼻咽癌作为治疗前组,经我院放疗科治疗后,分别于放疗结束后3、5、8个月来我科系统复查的病人作为治疗后组,将同期行健康体检的29例作为对照组,共3组.采用荧光定量PCR方法对3组的空腹血浆EBV DNA进行检测.结果 3组间血浆EBV DNA阳性率比较有统计学意义(P＜0.05);治疗后组的阳性病例全部有鼻咽癌复发,阴性病例没有复发;有、无淋巴结转移组间阳性率比较差异有统计学意义(P=0.00).结论 血浆EBV DNA是鼻咽癌诊断的重要分子标记,其阳性的病例有较高淋巴结侵袭发生率.
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EB病毒DNA血浆浓度评估NPC患者放疗敏感性的研究
目的:探讨血浆EBV DNA含量对评估初诊鼻咽癌(Nasopharyngeal carcinoma,NPC)患者放疗敏感性的临床意义.方法:采用荧光定量Real-time PCR技术分析230例(早期176例,中晚期54例)初诊NPC患者放疗前及放疗后1周、3个月、6个月、9个月、12个月患者血浆EBV DNA拷贝量,结合影像学检查结果判断患者对放疗的敏感性.结果:放疗前早期患者血浆EBV DNA含量43.8％(77/176)＜4000 copies/mL,16.5％ (29/176)＜500 copies/mL.早期患者血浆EBV DNA中位浓度只有4324 (17403-276) copies/mL,拷贝量随复诊时间推移逐渐降低,治疗后12个月早期患者血浆EBV DNA含量57.4％ (101/176)＜4000 copies/mL,35.2％ (62/176)＜ 500 copies/mL,15.9％(28/176)的早期患者影像学和鼻咽镜检查发现肿瘤体积消失；中晚期患者血浆EBV DNA中位浓度高达28035 (42403-6752) copies/mL,治疗后12个月虽然也降低,但是33.3％ (18/54)中晚期患者出现复发,9个中晚期患者(16.7％,9/54)淋巴结转移.结论:早期患者血浆EBV DNA含量放疗1年后明显降低,能够有效反应NPC患者放疗敏感性.中晚期患者血浆EBV DNA含量减少缓慢,且部分患者出现复发或转移,NPC患者放疗敏感性差.
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EB病毒抗体及其DNA联合检测在鼻咽癌筛查和早期诊断中的价值
目的：探讨EB病毒（EBV）抗体及EBV DNA联合检测在鼻咽癌筛查和早期诊断中的价值。方法收集2011年7月至2014年8月广东省第二人民医院经病理确诊的鼻咽癌患者272例，采用酶联免疫法（ELISA）测定血清RTA‐IgG、VCA‐IgA和EA‐IgA ；荧光定量聚合酶链反应（PCR）测定血浆EBV‐DNA。结果四项指标联合检测时，其敏感度高（99．63％）；早期鼻咽癌的阳性率为97．62％（41／42），晚期鼻咽癌的阳性率为100．00％（230／230）。四项指标中任意两项及两项以上指标为阳性的特异性在93．00％以上。结论四项指标联合检测可用于早期鼻咽癌的筛查，任意两项以上指标阳性时应高度怀疑鼻咽癌。
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EBV感染、p53、Bcl-2、C-myc基因表达与肺癌关系研究
目的研究肺癌组织中EBV感染率以及p53、Bcl-2和C-myc基因的表达,分析EBV和p53、Bcl-2、C-myc基因表达的关系.方法检测48例手术切除肺癌标本,18例癌旁支气管粘膜组织,2例肺转移平滑肌肉瘤,1例结核瘤,14例正常肺组织中EBV DNA及p53、Bcl-2、C-myc基因表达.用PCR法检测新鲜组织的EBV DNA,间接原位PCR法观察EBV阳性信号在细胞中的反应部位,免疫组化(SABC)检测p53、Bcl-2、C-myc在肺癌中的表达.结果 25例(52.08%)癌标本呈EBV DNA阳性,其中鳞癌的阳性率(75%)高.EBV DNA阳性和肺癌组织学分型有关(P＜0.01)癌旁支气管粘膜组织和肺组织EBV DNA阳性率分别为61.11%和28.57%(P＜0.01)免疫组化分析表明p53、Bcl-2和C-myc在肺癌组织中表达率分别为54.17%、37.5%和75%,其中p53和Bcl-2表达与组织学分型有关(P＜0.05)肺癌组织中EBV DNA阳性者的p53、Bcl-2、C-myc表达阳性率较阴性者明显增高(P＜0.05)结论肺癌中有较高的EBV感染率.EBV感染可能在肺癌的发生中起重要作用,这种作用可能是通过激活某些癌基因实现的.
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血浆EBV-DNA在中晚期鼻咽癌诱导化疗前后水平变化
目的 比较鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)患者诱导化疗前后血浆EB病毒DNA(Epstein Barr Virus DNA,EBV-DNA)水平的变化,评价EBV-DNA水平与诱导化疗的关系.方法 采用实时荧光定量聚合酶链反应测定38例鼻咽癌患者诱导化疗前和(2程TP方案:紫杉醇135～ 175mg/m2 d1+ DDP 80mg/m2 d2,4周一程)诱导化疗后2周外周血浆中的EBV-DNA水平.结果 NPC诱导化疗前EBV-DNA阳性率为100％,中位拷贝数为9.35x103copy/mL;治疗后阳性率为38.4％,中位拷贝数为2.08x103 copies/mL; NPC患者治疗前及治疗后组血浆游离EBV-DNA水平及阳性率有明显的差异(P均＜0.05).结论 NPC患者血浆EBV-DNA水平在诱导化疗后有明显的下降.
