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邵朝弟运用草果知母汤辨治慢性肾功能衰竭验案举隅
邵朝弟教授从事临床工作60余载,在各类肾脏疾病治疗方面具有独道见解,其中对治疗慢性肾功能衰竭亦有丰富经验邵朝弟教授治疗慢性肾功能衰竭强调在扶助正气、健脾补肾的基础上祛湿泄浊.草果知母汤功可清浊化湿,协调脏腑气机,甚合其旨,临床广泛应用于慢性肾功能衰竭治疗中.
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反复惊厥和大剂量抗痫药对大鼠海马pCREB的影响及草果知母汤的干预作用
目的 探讨反复惊厥发作和大剂量苯妥英钠造成大鼠认知障碍模型中磷酸化cAMP反应元件结合蛋白(pCREB)的变化,并观察草果知母汤的作用.方法 利用戊四唑(PTZ)诱导癫痫模型,再通过每日PTZ点燃癫痫和大剂量苯妥英钠注射造成大鼠认知功能障碍,然后分为每日发作模型组(A)、每日发作草果知母汤治疗组(B)、每日发作尼莫地平治疗组(C)、大剂量苯妥英钠组(D)、苯妥英钠草果知母汤治疗组(E)、苯妥英钠尼莫地平治疗组(F),用免疫组化和Western blotting方法检测大鼠海马组织pCREB的变化.结果 B、C组大鼠pCREB表达均有明显提高,与A组比较,差异有显著性;E、F组大鼠海马部位的pCREB的变化与D组比较差异亦有显著性.结论 草果知母汤改善癫痫每日发作和苯妥英钠所致大鼠的认知障碍可能是通过提高pCREB表达而发挥作用的.
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点燃癫痫模型基因的差异表达及草果知母汤对其影响
目的筛选与点燃癫痫模型发病及草果知母汤发挥疗效相关联的基因.方法使用mRNA基因差异显示技术(DDRT-PCR),筛选差异基因条带,并使用Nofthern印记杂交排除假阳性.结果正常对照组、模型组、中药组存在110条差异条带,其中11条基因表达有明显差异的片段在正常对照组不存在,但出现在模型组,又在治疗组消失,说明这11条基因是与癫痫发病和治疗密切关联的基因.经NCBI美国国家基因库检索,这11条基因中的7条为同源基因,有4条基因片段为功能未知的新基因,其中3条新基因经Northern印记杂交排除了假阳性的可能,已经在GeneBank进行了注册,注册号分别CK325391、CK325392、CK325393、CK325394.结论草果知母汤可能通过影响海马组织部分基因片段的表达而起到治疗癫痫模型的作用.
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草果知母汤在阻断点燃模型形成过程中对NMDA受体及其mRNA的影响
观察抗癫痫中药草果知母汤在阻断戊四唑点燃模型形成过程中，对兴奋性氨 基酸类神经递质Glu的受体NMDA结合力及其NMDAR1 mRNA的影响。以NMDA的竞争性拮抗剂MK- 801为对照，用配基受体法、原位杂交法检测相应指标的变化。结果显示：与模型组相比， 中药组大鼠海马NMDAR1 mRNA的含量明显降低，差别有显著性意义（P<0.05），MK -801 组无明显变化；与模型组相比，中药组NMDA受体结合力明显降低，但差别无显著性意义，MK -801组皮层NMDA结 合力明显降低，差别有极显著性意义（P<0.01）。说明中药草果知母汤主要通过降低 NMDAR1 mRNA的表达来降低NMDA受体的含量。
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草果知母汤加减方及其拆方对PTZ点燃大鼠海马内Glu与GABA含量的影响
目的 观察草果知母汤加减方及其拆方对戊四唑(PTZ)点燃大鼠的影响, 以期精简药味,揭示药物之间的配伍规律.方法 使用PTZ点燃大鼠模型,采用行为学方法,对草果知母汤加减拆方组进行筛选,选取抗痫效优组,检测它们对海马内Glu与GABA含量的影响.结果 草果知母汤加减方及其拆方各组与模型组比较,均存在差异.其中调理脾胃气机组(草果、知母、半夏、厚朴)、清肝敛肝合清心开窍组(白芍、黄芩、石菖蒲)效果显著,但仍以全方效果更佳.结论 草果知母汤加减方及其拆方各组药物,均具有不同程度地影响点燃大鼠惊厥发作级别及海马内Glu与GABA含量的作用.其中全方作用强, 证实全方配伍的科学性及合理性.
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草果知母汤对戊四唑慢性诱导癫痫模型大鼠脑内海马区凋亡调控因子Bcl-2、Bax蛋白表达的影响
目的:动态观察具有调理中焦脾胃气机作用的草果知母汤在阻抗癫痫形成中对大鼠海马区凋亡调控基因Bcl-2、Bax蛋白表达的影响,探讨其抗癫痫作用的分子生物学机制.方法:实验于2005-03/12在广西中医学院基础医学院中医实验中心完成.选择雄性SD大鼠82只,按随机数字表法分为4组:模型组26只,中药治疗组及西药治疗组各25只,正常对照组6只.除正常对照组外,其余各组均以戊四唑亚惊厥剂量35 mg/kg腹腔注射诱导癫痫模型,1次/d,持续4周.正常对照组同法给予相同剂量的生理盐水.中药治疗组予草果知母汤(由草果、知母、厚朴、半夏、黄芩等组成)5 g/(kg·d)灌胃;西药治疗组给予苯巴比妥混悬液60 mg/(kg·d)灌胃;模型组和正常对照组胃饲双蒸水,2 mL(kg·d),1次/d,持续5周.采用免疫组化PV-600二步法标记bcl-2、bax蛋白阳性细胞,动态观察各组大鼠海马区Bcl-2、Bax蛋白表达值在癫痫形成过程中的变化.结果:模型组2只因惊厥大发作抽搐致死,中、西药治疗组各死亡1只,解剖无特殊发现,死亡原因不明,共78只大鼠进入结果分析.①模型组大鼠1周后逐渐出现癫痫发作,并随着点燃次数的增加而不断增强,至第4周出现6级大发作;中、西药治疗组发作次数和级别明显降低,高级别为4级,且两组间发作级别、次数相比差异不显著(P＞0.05)②随着点燃周次的增加,Bcl-2蛋白表达呈不断减少的趋势,模型组与正常对照组比较,在实验第3,4,5周,明显低于正常对照组(P＜0.05～0.01),中、西药治疗组大鼠海马区Bcl-2蛋白表达数量均明显高于模型组(P＜0.05～0.01);在相同时间段(2、3、4、5周),中、西药治疗组间比较,差异不显著(P＞0.05).③bax蛋白表达数随着点燃次数增加呈不断增多的趋势,至实验第3,4,5周,模型组大鼠海马区Bax蛋白表达数量明显高于正常对照组(P＜0.05～0.01),中、西药治疗组大鼠海马区Bax蛋白表达数量均明显高于模型组(P＜0.05～0.01);在相同时间段(2、3、4、5周),中、西药治疗组间比较,差异不显著(P＞0.05)结论:草果知母汤可有效地阻断癫痫发作,其抗痫作用可能与其干预癫痫形成中大鼠脑内凋亡调控因子Bcl-2、Bax蛋白表达有关.
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草果知母汤抗癇性的临床观察及实验研究
目的从临床观察和动物实验两方面研究草果知母汤(CGZMT)的抗疒间性.方法通过对17例癫疒间患儿药效学观察,评价CGZMT的临床疗效.利用小鼠大电休克发作(MES)模型、大鼠听源性发作(AGS)癫疒间模型、小鼠戊四唑阈值发作试验(MST),研究CGZMT的抗疒间性.结果临床观察显示:总有效率64.7%,单服中药与中西药合用的抗疒间性无显著性差异(P>0.05).CGZMT对小鼠MES的拮抗作用及用药2周对大鼠AGS的抗疒间性均与苯巴比妥(PB)相似(P>0.05);对MST疗效弱,但与氯硝西泮(CZP)合用抗惊厥率达85%,疗效优于模型组(P<0.01).结论 CGZMT有肯定的抗疒间性,对强直-阵挛性发作疗效优于失神发作,无明显毒副作用.对于失神发作,CGZMT与CZP有较强的协同作用.
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草果知母汤对PTZ慢性诱导癫痫模型大鼠行为及皮层脑电图的影响
目的:探讨癫痫形成中不同时间段大鼠惊厥行为、皮层脑电图的变化规律及草果知母汤对癫痫大鼠惊厥行为、皮层脑电图的影响.方法:选用SD大鼠,以PTZ慢性诱导癫痫模型,中、西药组分别灌胃草果知母汤和苯巴比妥,综合电生理学、行为学等检测技术,动态观察各组大鼠在癫痫形成中的惊厥行为变化规律及皮层脑电变化规律.结果:行为学观察发现,模型对照组自第2周开始出现惊厥行为表现,并随点燃周次的增加,惊厥行为等级不断增高,与中、西药治疗组比较,至第3周显示出明显差异,并有不断增强的趋势,而中、西药治疗组问比较,各时间段未见明显差异:皮层脑电检测发现,脑电变化与行为变化同步,模型对照组与中、西药治疗组比较,痫波的发生频率较高、持续时间较长,而中、西药治疗组间相同时间段痫波发生频率、持续时间相当.结论:草果知母汤对癫痫形成中不同时间段惊厥行为及痫性放电具有良好的阻断作用.
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草果知母汤对印防己毒点燃癫痫大鼠在水迷宫中学习记忆能力的影响
目的:观察草果知母汤(Tsaoko-Anemarrhenae decoction,TAD)对印防己毒(Picrotoxin,PTX)化学点燃癫痫大鼠在水迷宫中学习记忆能力的影响,为进一步研究癫痫患者学习记忆损害的治疗提供线索.方法:27只雄性SD大鼠随机分为点燃组、点燃+TAD组和对照组,分别用PTX、PTX+TAD和生理盐水腹腔注射,然后行水迷宫行为的测定,评价其学习记忆能力.结果:癫痫大鼠在水迷宫测定中,点燃组和点燃+ TAD组在寻找平台的潜伏期时间与对照组相比没有显著性差异.点燃组对平台空间位置的记忆的能力较对照组要差,差异有显著性.点燃+TAD组对平台空间位置的记忆能力与对照组无显著性差异,但是明显好于点燃组(P＜0.05).结论:PTX化学点燃癫痫大鼠在水迷宫中记忆能力下降,而TAD能明显改善PTX化学点燃癫痫大鼠在水迷宫中的记忆能力.
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草果知母汤加减方及其拆方对戊四唑点燃大鼠脑内NMDAR1 mRNA的影响
目的:探讨草果知母汤加减方及其拆方抗癫痫作用机制.方法:使用戊四唑(pentylenetetrazol, PTZ)点燃大鼠模型,利用原位杂交法定量分析大鼠脑内N-甲基-D-天冬氨酸受体1(N-methyl-D-aspartate receptor 1, NMDAR1) mRNA的表达.结果:草果知母汤加减方及其拆方治疗4周后,与模型组比较,全方组和拆方1组海马CA1、皮质内NMDAR1 mRNA表达水平均显著下降(P<0.01);拆方2组仅皮质内NMDAR1 mRNA表达水平显著下降(P<0.01).结论:草果知母汤加减方及其拆方能降低脑内NMDAR1 mRNA表达,从而起到抗癫痫作用.
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从miRNA调控探讨草果知母汤治疗癫痫的作用机制
目的 探讨草果知母汤治疗癫痫的作用机制.方法 选取SPF级SD雄性大鼠60只,随机分为正常组,模型组,草果知母汤低、中、高剂量组,每组12只.除正常组外,其余4组均制备癫痫模型,造模1 h后给药,正常组、模型组以双蒸水2 m L/kg灌胃,草果知母汤低、中、高剂量组分别以草果知母汤0.375、0.75、1.5 g/m L生药提取液2 m L/kg灌胃,每日1次,持续28 d.观察各组大鼠癫痫行为学变化,取各组大鼠脑海马组织HE染色进行组织病理学观察,以TUNEL法观察神经细胞凋亡情况,RT-PCR检测mi R-21、mi R-29和凋亡相关基因Bax、Bcl-2、P53 m RNA表达,Wester Blot法检测凋亡相关基因Bax、Bcl-2、P53蛋白表达.结果 草果知母汤各剂量组均有改善癫痫大鼠癫痫行为学的作用,可减少海马组织神经细胞凋亡,减少mi R-29、Bax和P53 m RNA的表达(P＜0.05或0.01),增加mi R-21和Bcl-2m RNA的表达(P＜0.05或0.01),降低Bax、P53蛋白表达(P＜0.01)并增加Bcl-2蛋白表达(P＜0.01).结论 通过调控mi R-21、mi R-29进而调节凋亡相关基因Bax、Bcl-2、P53的表达,可能是草果知母汤治疗癫痫的作用机制之一.
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草果知母汤加减方及其拆方对点燃大鼠脑内GABA和GABAAR mRNA的影响
目的 观察草果知母汤加减方及其拆方抗痫作用机制中是否有改变脑内GABA和GABAAR mRNA 表达的作用.方法 采用戊四唑(PTZ)点燃大鼠模型,应用免疫组织化学法观察GABA在脑内的分布,用原位杂交法定量分析脑内GABAAR的表达.结果 草果知母汤加减方及其拆方治疗4周后,点燃大鼠海马CA1区和皮层GABA阳性神经元分布及GABAAR mRNA含量均明显升高.与模型对照组比较有显著差异.结论 草果知母汤加减方及其拆方能加强脑内GABA阳性神经元分布及其受体表达,从而能够抑制癫痫发作.
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草果知母汤及中医情志干预改善癫痫患者认知功能及生活质量效果研究
目的:观察草果知母汤及中医情志干预改善癫痫患者认知功能及生活质量效果.方法:选取我院2015年2月～2017年2月收治的114例癫痫患者作为研究对象,采取随机数字表法将患者分成观察组与对照组,对照组(57例)常规临床干预,观察组(57例)则常规干预基础上给予患者草果知母汤及中医情志干预,对比两组患者干预后癫痫治疗效果、患者认知功能评分、癫痫发作次数、护理质量评分、汉密尔顿焦虑(HAMA)及抑郁(HAMD)量表评分、匹兹堡睡眠指数(PSQI)、患者生活质量评分(SF-36)及干预满意率.结果:观察组癫痫治疗有效率为98.25％,高于对照组87.72％,P＜0.05;观察组干预后癫痫发作次数明显少于对照组,护理质量评分高于对照组,认知功能评分高于对照组,且观察组患者HAMA、HAMD及PSQI、SF-36量表评分均优于对照组,P＜0.01;观察组干预满意率高达96.49％,明显高于对照组84.21％,P＜0.05,差异具有统计学意义.结论:草果知母汤及中医情志干预可提升癫痫患者护理水平,促进临床疗效,改善患者认知功能,降低癫痫发作次数,改善患者心理状态、睡眠质量、生活质量,提升患者满意率,值得推广应用.
