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骨碎补总黄酮对成骨细胞体外培养作用的机制研究
目的:研究骨碎补总黄酮不同剂量组对成骨细胞体外培养的作用机理.方法:购买UMA-106-01成骨细胞株进行成骨细胞培养,观察碱性磷酸酶(ALP)活性和3H-TdR掺入的情况.结果:骨碎补总黄酮能提高用UMR-106细胞培养的细胞内ALP活性,并且在不同时间24、48、72h有相应变化,有一定的量效、时效关系,以48h为理想.骨碎补总黄酮对3H-TdR的掺入48h比24h有明显增加,有时效关系.结论:骨碎补总黄酮对成骨细胞分化和增殖均有促进作用.
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薯蓣皂苷元对人胃低分化粘液腺癌细胞作用的研究
目的观察薯蓣皂苷元(Diosgenin,Dio)对人胃低分化粘液腺癌(MGC-803)细胞的作用,并初步探讨其作用机制.方法MTT法测Dio对MGC-803细胞的抑制作用;考察Dio对MGC-803细胞分裂和集落形成能力的影响;采用3H-TdR掺入法检测Dio对MGC-803细胞DNA合成的影响.结果一定浓度范围内Dio对MGC-803细胞的增殖有剂量、时间依赖性抑制作用;Dio明显抑制MGC-803细胞分裂和集落形成,半数抑制浓度(IC50)为13.17 mg/L,Dio能显著抑制MGC-803细胞DNA合成.结论Dio对MGC-803细胞的抑制作用与抑制该细胞DNA合成有关.
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维生素A对淋巴细胞增殖效应的影响
维生素A(VA)是维持机体生命所必需的营养物质.除了正常的生理功能外,一般认为,VA还具有提高机体免疫力及抗感染和抗肿瘤的作用.本研究使用3H-TdR掺入淋巴细胞的方法,探讨VA对免疫功能及淋巴细胞DNA增殖的影响.1 材料与方法1.1 不同浓度VA对增殖分化的观察取健康献血员静脉血,肝素抗凝,将0.1ml血加入到2ml含植物血凝素(Phytoagglutinin,PHA 100μg/ml,广州)的RPMI1640(美国产)培养液中培养,同时在培养液中分别加入0、1.75、6.98、17.5、34.9(10-9mol/L)的VA,培养56h后注入3氢-胸腺嘧啶核苷(3H-TdR)7.4×104Bq/瓶,继续培养16h,培养结束时,用滤膜法收获样品[1],然后用Beckman液体闪烁计数器(USA)测量每分钟计数率(cpm),同时换算成(1×105)细胞的cpm值,再进行统计学处理.
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血管内皮生长因子对血管内皮细胞增殖及DNA合成的影响
目的探讨血管内皮生长因子(VEGF)诱导血管增生性疾病中血管生成的作用机制.方法取体外培养的人脐静脉内皮细胞系ECV 304细胞,用MTT法和3H-TdR掺入法观察VEGF对ECV 304细胞增殖及DNA合成的影响.结果 VEGF对ECV 304细胞增殖及DNA合成均有明显刺激作用,且均呈剂量依赖性关系.结论 VEGF可能通过刺激血管内皮细胞增殖及DNA合成,促进血管生成.在血管增生性疾病中可能起重要促进作用.
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辐射对血管内皮细胞生物学特性的影响
目的研究辐射对人脐静脉内皮细胞系ECV-304生物学特性的影响,探讨放射性皮肤烧伤的愈合机制.方法倒置显微镜观察不同剂量辐射下ECV-304细胞形态学的变化;3H-TdR掺入法和CB法检测辐射对ECV-304增殖抑制及微核发生率的影响;RT-PCR半定量法检测辐射对内皮细胞VEGF的表达.结果辐射可导致ECV-304细胞核体积增大,细胞均质性变差;且对ECV-304增殖的抑制作用呈剂量依赖性,随剂量增加而增大;随剂量增加,微核发生率明显增加;RT-PCR结果表明,VEGF在细胞受到辐射后8 Gy以上表达增高,而且持续表达至72 h.结论γ射线通过损伤DNA和细胞染色体抑制ECV-304增殖,同时VEGF在内皮细胞受辐射后表达升高,可能对细胞具有辐射防护作用,这为放射性烧伤的治疗奠定了理论基础.
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保肾口服液影响IgA肾病小鼠T细胞增殖及分泌IL-2的实验研究
观察保肾口服液对IgA肾病小鼠T细胞3H-TdR掺入及其分泌IL-2水平的影响,结果表明低、中、高3种浓度的保肾口服液均能显著促进IgA肾病小鼠的自发性和ConA刺激的T细胞3H-TdR掺入,促进T细胞合成,分泌IL-2,提前给药作用相同.提示保肾口服液有显著增强IgA肾病小鼠细胞免疫功能的作用.
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二乙酰二脱水卫矛醇对白血病L1210细胞生长的抑制作用
目的观察二乙酰二脱水卫矛醇(diacetyldianhydrogalactitol,DADAG)对小鼠白血病细胞株L1210细胞的作用,并初步探讨其杀伤肿瘤细胞的机制.方法采用MTT法和平板集落形成法检测细胞的生长情况;[3H]-TdR掺入法检测DADAG对L1210细胞DNA合成的影响.结果L1210细胞经不同浓度的DADAG(12.0、17.2、24.5、35.0、50.0 mg·L-1)处理72h后,其存活率与对照组相比,分别降至72%、63%、46%、35%和20%.平板集落形成实验显示DADAG半数集落形成抑制浓度为18.5mg·L-1.DADAG12.0、17.2、24.5、35.0、50.0mg·L-1作用L1210细胞8 h后的[3H]-TdR掺入率分别为93.6%、83.9%、42.6%、10.1%和5.7%.结论DADAG对L1210细胞的抑制作用与抑制该细胞DNA合成有关.
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rhGM-CSF对胎儿口腔粘膜成纤维细胞增殖及DNA合成的影响
目的探讨rhGM-CSF促进口腔溃疡愈合的作用机制.方法取体外培养的胎儿口腔粘膜成纤维细胞,用rhGM-CSF刺激成纤维细胞后第2、4、6天用细胞计数及3H-胸腺嘧啶掺入法(3H-TdR)测定其增殖情况.结果 rhGM-CSF对胎儿口腔粘膜成纤维细胞增殖及DNA合成有刺激作用,在80～100 ng/ml 时,细胞生长达到佳状态,过高浓度rhGM-CSF的刺激作用反而下降.结论 rhGM-CSF可以通过刺激成纤维细胞增殖及DNA合成促进口腔溃疡愈合.
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白头翁抗肿瘤机理研究
本文研究了白头翁抗肿瘤作用的机理,PWAE1g生药/kg.d ip×8能抑制3H-TdR、3H-UR掺入S180瘤细胞形成DNA、RNA,轻度抑制荷瘤小鼠脾组织DNA、RNA生物合成,同时又发现用药后小鼠腹腔巨噬细胞对EAC瘤株的杀伤力较对照组明显增加,而CH50测定未发现PWAE有促进小鼠溶血素形成作用,揭示PWAE抗肿瘤作用的原理是干扰了肿瘤细胞核酸代谢,而PWAE对荷瘤小鼠免疫系统的作用,一方面,能轻度抑制脾脏机能,另一方面又能加强巨噬细胞活性而发挥抗肿瘤作用.
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HSPCO16重组蛋白对毛乳头细胞增殖的影响
目的 观察HSPCO16重组蛋白对培养的低/高传代毛乳头细胞(DPC)的影响.方法 消化对数期生长的第2代和第7代DPC,调整细胞浓度为3×105细胞/mL,接种于24孔细胞培养板;至对数生长期时加入HSPCO16重组蛋白,调整浓度为0.1 mg/mL继续培养,倒置显微镜下定期观察;一组细胞采用流式细胞仪进行检测;另一组细胞内加入3H-TdR继续孵育6 h,消化收集细胞,检测HSPCO16重组蛋白对DPC增殖的影响.结果 HSPCO16重组蛋白处理的DPC增殖活跃,生长状态明显好于对照组;流式细胞仪分析和3H-TdR掺入试验均证实重组HSPCO16蛋白可促进第8代DPC的增殖及其DNA合成,而对第3代DPC则无明显作用.结论 HSPCO16重组蛋白具有促进高传代DPC增殖的作用,可能是一种新的促进毛囊生长蛋白.
关键词： HSPCO16重组蛋白 流式细胞仪 3H-TdR掺入 -
抑癌基因p27对增生性瘢痕成纤维细胞增殖及DNA合成的影响
目的探讨抑癌基因p27对增生性瘢痕的作用. 方法取体外培养的人增生性瘢痕成纤维细胞(HTsFb),将构建的pcDNA3-p27真核表达质粒体外转染HTsFb,经G418筛选获得稳定表达的细胞克隆,用MTT和3H-TdR掺入法观察抑癌基因p27对HTsFb增殖及DNA合成的影响. 结果抑癌基因p27 对HTsFb增殖及DNA合成均有明显抑制作用. 结论抑癌基因p27可能通过抑制成纤维细胞增殖及DNA合成抑制瘢痕增生.
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PDGF-AB对成纤维细胞增殖及DNA合成的影响
目的:探讨PDGF-AB促进伤口愈合及其在瘢痕增生中的作用机理.方法:取体外培养的人正常皮肤及增生性瘢痕成纤维细胞(normal skin fibroblast,NsFb,hypertrophic scaRfibroblast,HTsFb),用MTT和3H-TdR掺入法观察PDGF-AB对两种细胞增殖及DNA合成的影响.结果:PDGF-AB对两种成纤维细胞增殖及DNA合成均有明显刺激作用,且均呈剂量依赖性关系,但作用有差异.结论:PDGF-AB可能通过刺激成纤维细胞增殖及DNA合成促进伤口愈合,但同时在瘢痕增生性疾病中可能起重要促进作用.
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维生素E琥珀酸酯抑制人胃癌细胞生长作用的研究
目的与方法:本实验采用体外细胞培养的方法,研究了维生素E琥珀酸酯(VES)对人胃癌SGC790l细胞生长和DNA合成的影响,并进行了细胞凋亡形态学观察.结果:VES(5μg/ml、10μg/ml和20μg/ml)对SGC-7901细胞生长和DNA合成有明显抑制作用,并呈现剂量一效应关系.同时,VES也诱导SGC-7901细胞凋亡.结论:上述结果提示在离体条件下,VES通过抑制细胞DNA合成及诱导细胞凋亡抑制SGC-7901细胞生长.
