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刺五加与短梗五加种子的蛋白质电泳分析
目的:建立适用于刺五加和短梗五加种子的十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)鉴别方法,为二者种子的鉴别及质量评价提供参考.方法:采用15%分离胶的SDS-PAGE电泳对15个产地的刺五加种子和2个产地的短梗五加种子中可溶性蛋白进行电泳分析,利用BandScan 5.0软件对蛋白谱带蛋数目、谱带强度和相对分子质量等方面的差异进行比较.结果:17个种子样品共分离出31条清晰的蛋白谱带,其中2种种子的10条共有特征谱带和各自的1条标准特征谱带可作为刺五加和短梗五加种子的标准蛋白图谱.不同产地的刺五加种子蛋白电泳图谱具有一定的种内差异性.结论:该电泳方法和标准蛋白图谱可作为刺五加及短梗五加种子的鉴别依据.
关键词: 刺五加 短梗五加 蛋白质 十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳 电泳图谱 -
黑龙江和河北地区大青叶蛋白SDS-PAGE分析
目的:建立黑龙江和河北地区大青叶蛋白指纹图谱,为不同地区大青叶的鉴别和质量评价提供依据。方法采用十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)技术,对黑龙江和河北地区的大青叶样品进行鉴别。结果河北大青叶蛋白亚基的大分子质量为168.2 kD,小为19.8 kD,亚基1、6含量高;黑龙江大庆大青叶蛋白亚基的大分子质量为175 kD,小为24.4 kD,亚基1、2、4含量高;黑龙江哈尔滨大青叶蛋白亚基的大分子质量为175 kD,小为27.7 kD,亚基1、3含量高。结论 SDS-PAGE技术可以用于鉴别不同地区大青叶。
关键词: 大青叶 鉴别 十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳 -
道地产区不同产地厚朴种子的电泳指纹图谱研究
目的:研究道地产区湖北恩施5个不同产地厚朴种子的十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)电泳图谱,以探索厚朴种子不同产地的鉴别方法,从而为厚朴的良种选育及种子质量评价提供依据.方法:应用SDS-PAGE方法比较不同产地厚朴种子的蛋白电泳图谱在谱带数目、谱带强度和相对分子质量等方面的差异.结果:5个产地的厚朴种子的电泳图谱存在明显产地差异.结论:该电泳方法可为厚朴种子的产地鉴别提供依据.
关键词: 厚朴 地理变异 种子蛋白 产地差异 十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳 -
5种德国小蠊全虫蛋白提取方法的效果比较
目的 寻找一种适合德国小蠊全虫蛋白提取的方法,为德国小蠊蛋白质组研究提供依据.方法 以丙酮为溶剂对德国小蠊雌雄成虫进行脱脂,并利用TCA/丙酮、RIPA裂解液、Tris-HCl、1%SDS和裂解液5种蛋白提取液提取全虫蛋白,通过Bradford法测定蛋白浓度,十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳比较脱脂前及脱脂后各种蛋白提取方法的提取效果.结果 脱脂处理有助于德国小蠊成虫蛋白的提取;5种蛋白提取方法中,RIPA裂解液对2种成虫蛋白提取效果好,电泳后雌雄成虫蛋白条带分别为13条和16条,其次分别为1%SDS、Tris-HCl及裂解液,TCA/丙酮提取法效果差.结论 丙酮脱脂可以明显提高德国小蠊成虫蛋白的提取效果;RIPA裂解液相对更适合于提取德国小蠊雌雄成虫的全虫蛋白质.
关键词: 德国小蠊 提取方法 蛋白浓度 十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳 -
白木香茎、叶蛋白质组研究初探
采用三氯乙酸/丙酮沉淀法分别对白木香茎和叶进行蛋白质提取,利用一、两次水化法分别对所获蛋白进行溶解,并通过研究蛋白得率、比较蛋白浓度及经SDS-PAGE单向电泳所获条带的清晰度,分析白木香茎、叶蛋白制备与 SDS-PAGE 单向电泳条件的优劣。结果表明:白木香茎、叶蛋白得率分别是73mg? g-1与52mg? g-1;一次水化法得到的茎、叶样品蛋白终浓度分别为3.62μg?μL -1,4.17μg?μL -1,两次水化法所获得茎、叶蛋白终浓度为1.53μg?μL-1,2.12μg?μL -1。两种方法所获蛋白样品的 SDS-PAGE 条带均较模糊,但后者的单向电泳条带杂质较少,究其原因可能是蛋白制备、电泳条件的某些方面仍需改进。该研究为进一步从分子生物学的角度研究白木香结香机制提供了技术的基础。
关键词: 白木香 蛋白质 十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳 -
薏苡仁蛋白的聚丙烯酰胺凝胶电泳分析
目的:比较酸沉前后蛋白种类的差异,获取薏苡仁蛋白分子量的信息。方法:采用碱溶酸沉法制备薏苡仁蛋白,SDS-PAGE电泳分离蛋白,标准曲线法计算分子量信息。结果:得到了6种薏苡仁水溶性蛋白条带,确定了其分子量分别是91.598,77.169,39.839,28.977,23.822,16.100 kDa,对比了薏苡仁蛋白酸沉前后的变化,即酸沉后缺失了23.822 kDa和16.1 kDa两个条带。结论:该方法得到的谱图清晰,重现性好,对薏苡仁蛋白分离与分析的研究有着重要的指导意义。
关键词: 薏苡仁蛋白 十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳 分子量 -
鳖甲炮制前后抗肝纤维化活性部位的SDS-PAGE凝胶电泳比较研究
目的:探讨鳖甲炮制前后抗肝纤维化活性部位的差异,为鳖甲药材的临床用药提供依据.方法:运用SDS-PAGE技术,对生鳖甲与醋鳖甲活性部位进行分析比较;采用MTT比色法测定生鳖甲与醋鳖甲对HSC-T6增殖的影响.结果:炮制后的醋鳖甲所含成分增多,一级谱带相对分子质量降低,导致小分子肽类物质产生;生鳖甲和醋鳖甲均具有抗肝纤维化的作用,但醋鳖甲的药效优于生鳖甲.结论:鳖甲炮制前后活性部位明显差异,为临床选择用药及进一步活性成分研究提供依据.
关键词: 鳖甲 十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳 活性部位 -
鳄鱼血SDS - PAGE鉴别方法的研究
目的:建立鳄鱼血SDS - PAGE鉴别方法.方法:利用电泳缓冲液制备鳄鱼血、绵羊血、豚鼠血、鸡血、兔血、鹿血等6种动物全血样品液,采用十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS- PAGE)法,对6种动物全血进行鉴别研究.结果:以7.5% ~11%的梯度分离胶、60μg蛋白量上样,大板(16 cm×20 cm)进行SDS- PAGE鉴别,6种动物全血的电泳谱带有明显差异,鳄鱼血存在特征条带.结论:本方法灵敏度高、专属性强,可作为鳄鱼血与其他动物血的鉴别依据.
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相对分子质量测定作为单抗药物常规放行分析方法的可行性商榷
目的:探讨十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)作为单克隆抗体常规放行分析方法的适用性.方法:对5种国产单克隆抗体药物进行SDS-PAGE法测定相对分子质量,并与质谱法测得的精确相对分子质量进行比较.结果:SDS-PAGE法测定时,采用不同的marker和不同的拟合方程,得出的相对分子质量具有较大的差异,并且与质谱法测得的精确相对分子质量具有一定的差异.结论:运用SDS-PAGE测定相对分子质量作为单抗的常规放行分析方法值得进一步商榷,应用质谱法在前期产品开发和质量控制过程对精确相对分子质量进行跟踪检测具有更准确的特点.
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SDS-PAGE方法分析暹罗鳄鱼肉差异蛋白
目的:分析暹罗鳄鱼肉与鱼肉、鸡肉、猪肉中蛋白的差异,找出鳄鱼肉特异蛋白。方法:采用电泳缓冲液匀浆鳄鱼肉、鱼肉、鸡肉和猪肉,反复冻融5次后,得到4种动物肉匀浆液,采用十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)法,对4种动物肉进行差异蛋白研究。结果:以13%的分离胶、60ug 蛋白量上样,大板(16cm*20cm)进行 SDS-PAGE,4种动物肉的电泳谱带有明显差异,鳄鱼肉存在特征条带。结论:鳄鱼肉中差异蛋白较多,此方法可以用于鉴别鳄鱼肉。
关键词: 暹罗鳄鱼肉 十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳 电泳 特征谱带