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参芪抑瘤方抑制胃癌细胞MKN-45增殖和侵袭转移作用机制
目的:观察参芪抑瘤方(抑瘤方)血清抑制MKN-45增殖和侵袭转移作用,并探讨其作用机制.方法:采用噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞活力;Trans-well和划痕实验观察细胞侵袭与迁移能力;实时荧光定量PCR(Real-time PCR)技术检测环氧合酶-2(COX-2)和人第10号染色体缺失的磷酸酶(PTEN) mRNA表达;免疫组化检测细胞COX-2,PTEN蛋白表达.结果:参芪抑瘤方含药血清(2.8g·mL-1)干预24,48,72 h后,抑制率为31.25％,33.09％,34.50％;参芪抑瘤方含药血清(2.8g·mL-1)干预48 h后,细胞侵袭能力、转移能力和迁移能力分别下降了36.18％,49.46％,36.46％;COX-2 mRNA表达量下降90％,PTEN升高89.72％;与空白血清组比较,参芪抑瘤方组COX-2蛋白表达减弱;PTEN蛋白表达增强(P＜0.05).结论:参芪抑瘤方药物血清通过影响COX-2,PTEN mRNA和蛋白表达,抑制MKN-45细胞的增殖,减弱其侵袭转移能力.
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禾肾丸对阿霉素肾病大鼠肾组织PI3K及PTEN蛋白表达的影响
目的:探讨禾肾丸对阿霉素肾病大鼠肾组织磷酯酰肌醇3激酶(phosphoinositide-3-kinase,PI3K)、人第10号染色体缺失的磷酸酶(PTEN)表达的影响.方法:采用静脉注射6 mg/kg阿霉素以复制大鼠阿霉素肾病模型;大鼠随机分为空白组、模型组、依那普利组和禾肾丸组.予相应药物干预第2周、第4周、第6周及第8周,留取尿液标本,观察尿蛋白定量的动态变化,取肾组织采用免疫组化法及Western Blot 法检测大鼠肾脏PI3K及PTEN蛋白的表达情况.结果:模型组24h尿蛋白定量逐渐增高,均高于同期空白组(P＜0.05);禾肾丸组、依那普利组随灌胃时间延长尿蛋白定量逐渐降低,均明显低于同期模型组(P＜0.05).免疫组化及Western Blot结果显示,PI3K主要表达于肾脏肾小球系膜区,肾小管上皮细胞无明显表达,主要表达部位为脏层上皮细胞的胞浆;PTEN则主要表达在肾小球及肾小管的细胞核中,空白组大鼠肾脏中可见强阳性表达,造模组大鼠肾脏表达较空白组少.PI3K在灌胃2周及4周时均逐渐上升,灌胃6周达到高峰,第8周开始下降;PTEN在灌胃2周及4周时逐渐下降,第6周低,第8周开始升高,其变化趋势与PI3K相反;禾肾丸组和依那普利组大鼠肾组织PI3K及PTEN蛋白表达均明显低于模型组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论:禾肾丸降低慢性肾脏病蛋白尿的机制可能与其降低肾组织PDK及PTEN蛋白表达相关.
关键词： 禾肾丸 阿霉素肾病 足细胞 磷脂酰肌醇3激酶 人第10号染色体缺失的磷酸酶 -
MicroRNA-21调控口腔鳞癌细胞顺铂耐药及其作用机制
目的:探讨microRNA-21 (miRNA-21)在人口腔鳞癌顺铂耐药细胞中的表达及其作用机制.方法:采用实时荧光定量PCR (RT-PCR)法检测miRNA-21在口腔鳞癌细胞株Tca8113及顺铂耐药细胞株Tca8113/DDP的表达;采用体外转染法将miRNA-21模拟物(mimics)或抑制物(inhibitor)分别转染Tca8113和Tca8113/DDP细胞,采用RT-PCR检测转染前后细胞中miRNA-21的表达情况;采用CCK8实验检测转染前后细胞对顺铂敏感性的变化;并用Western blot检测转染前后细胞中PTEN的表达变化.采用双荧光素酶报告基因验证miRNA-21是否作用于PTEN基因的3'-UTR区预测靶位.结果:miRNA-21在Tca8113/DDP细胞中的表达水平是Tca8113细胞的(8.26± 1.37)倍(P＜0.01).Tca8113细胞转染miRNA-21 mimics后,细胞中miRNA-21表达水平是转染前的(10.51±2.18)倍(P＜0.01),顺铂对Tca8113细胞增殖的抑制率较转染前明显下降(P＜0.05),细胞内PTEN表达水平较转染前明显下降(P＜0.05).Tca8113/DDP细胞在转染miRNA-21 inhibitor后,细胞中miRNA-21表达水平是转染前的(0.32± 0.14)倍(P＜0.01),顺铂对Tca8113/DDP细胞增殖的抑制率与转染前比较明显增加(P＜0.05),细胞内PTEN表达水平较转染前明显增高(P＜0.05).经双荧光素酶报告基因验证PTEN是miRNA-21的靶基因.结论:miRNA-21在口腔鳞癌顺铂耐药细胞Tca8113/DDP中异常高表达,下调其表达可部分逆转细胞耐药性,miRNA-21可能通过作用于PTEN参与口腔鳞癌细胞顺铂耐药的发生和发展.
关键词： 口腔鳞癌 微小RNA-21 顺铂 耐药 人第10号染色体缺失的磷酸酶 -
婴幼儿退化期及增生期皮肤血管瘤组织中PTEN、Rb 蛋白表达变化及意义
目的：观察婴幼儿增生期及退化期皮肤血管瘤组织中人第10号染色体缺失的磷酸酶（ PTEN）和成视网膜细胞瘤基因（ Rb）蛋白的表达变化，并探讨其意义。方法皮肤血管瘤患儿49例，血管瘤切除术中留取血管瘤组织标本，根据Mulliken分类标准，增生期组织24例，退化期组织25例；另取正常皮肤组织5例作对照。采用免疫组化SABC法检测各组PTEN、Rb蛋白。结果 Rb蛋白在增生期、退化期血管瘤组织及正常皮肤组织中的表达量分别为0．49±0．88、0．40±0．36、0．38±0．40，三组两两相比，P均＜0．05。 PTEN蛋白在增生期、退化期血管瘤组织及正常皮肤组织中的表达量分别为1．07±0．83、0．66±0．88、0．88±0．76，三组两两相比，P均＜0．05。结论婴幼儿皮肤血管瘤组织中均有PTEN、Rb蛋白表达，且二者在增生期组织中的表达水平高于退化期组织；PTEN、Rb蛋白可能在血管瘤的生长过程中起重要作用。
关键词： 血管瘤 人第10号染色体缺失的磷酸酶 成视网膜细胞瘤基因
