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针刺对创伤性脑损伤大鼠神经损伤的影响
目的:通过观察小胶质细胞表达状态探讨针刺对创伤性颅脑损伤大鼠神经损伤的影响机制.方法:54只SD雄性大鼠按随机数字表分成正常组、模型组和针刺组,每组各18只.参照Feeney自由落体撞击法制备创伤性颅脑损伤大鼠模型.针刺组给予针刺“百会”“水沟”“风府”透“哑门”、双侧“合谷”穴,每天1次.治疗第3、7、14天后,分别进行改良大鼠神经功能缺损评分(mNSS),HE染色和免疫荧光标记法检测脑损伤的程度和小胶质细胞的表达量,采用酶联免疫法(ELISA)检测血清神经元特异性烯醇化酶(NSE)和勿动蛋白A(Nogo-A)含量的变化.结果:与正常组比较,模型组第1、3、7、14天mNSS显著升高(P＜0.01);与模型组比较,针刺组第3、7、14天mNSS显著降低(P＜0.05,P＜0.01).HE染色和免疫荧光标记结果可见,与正常组比较,模型组3个时点的组织结构持续破坏,神经元坏死,小胶质细胞大量活化(P＜0.05);与模型组比较,针刺组3个时点组织结构破坏程度减轻,小胶质细胞活化减少(P＜0.05).与正常组比较,模型组3个时点血清NSE、Nogo-A含量显著升高(P＜0.01);与模型组比较,针刺组3个时点血清NSE含量显著降低(P＜0.01),第7、14天血清Nogo-A含量显著降低(P＜0.01).结论:针刺可能通过抑制小胶质细胞的表达及活化,继而抑制继发神经损害,促进神经功能恢复.
关键词： 创伤性颅脑损伤 针刺干预 小胶质细胞 血清神经元特异性烯醇化酶 勿动蛋白A -
中药对脑梗死大鼠运动功能及神经再生微环境的影响
目的:观察复健片对脑梗死模型大鼠运动功能以及脑组织酪氨酸受体激酶B(trk-B)和勿动蛋白A(Nogo-A)表达的影响,探讨其促进神经再生作用机制.方法:90只Wistar大鼠随机分为药物组、模型组、假手术组,每组30只.用电凝法制备大脑中动脉闭塞大鼠模型,造模成功后6h药物组灌胃给予复健片水溶液9g·kg-1,其余2组分别灌胃给予同等量生理盐水,每天1次,共2周.用前肢放置检测法评定运动功能；分别用免疫组化法和原位杂交法观察脑组织trk-B和Nogo-A的表达,并测定染色平均灰度.结果:药物组大鼠运动功能评分( 86.34±5.48)明显高于模型组(62.26±14.87),P＜0.01；trk-B表达药物组(95.98±3.55)较模型组明显增强(110.10±6.82),P＜0.01;而Nogo-A药物组(131.09±8.99)表达较模型组明显减弱(121.36±11.06),P＜0.01.结论:复健片可显著增强trk-B并抑制Nogo-A的表达,从而改善神经再生微环境,促进脑梗死大鼠运动功能康复.
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夹脊电针对急性脊髓损伤大鼠运动功能及脊髓组织NogoA、RhoA、ROCKⅡ蛋白表达的影响
目的:观察夹脊电针对急性脊髓损伤模型大鼠肢体运动功能和脊髓组织髓鞘相关抑制因子勿动蛋白A(Nogo-A)、Ras同源基因家族成员A(Rho A)和Rho激酶Ⅱ(ROCK Ⅱ)蛋白表达的影响.方法:将18只成年雌性Wistar大鼠随机分为假手术组、模型组和夹脊电针组,每组6只.采用NYU打击器制备急性脊髓损伤模型,夹脊电针组给予损伤节段上下一对夹脊穴电针治疗.治疗1天、3天、7天、14天、28天后采用BBB评分法对大鼠急性脊髓损伤后运动功能进行评估;治疗28天后采用HE染色观察脊髓组织病理形态学变化;采用Westernblot法检测脊髓组织Nogo-A、Rho A和ROCK Ⅱ蛋白表达.结果:与假手术组比较,模型组和夹脊电针组在各时间点BBB评分显著降低(P＜0. 05);与模型组比较,夹脊电针组在治疗3天后BBB评分显著升高(P＜0. 05).与假手术组比较,模型组Nogo-A、Rho A和ROCK Ⅱ蛋白表达均显著升高(P＜0. 05);与模型组比较,夹脊电针组Nogo-A、Rho A和ROCK Ⅱ蛋白表达均显著降低(P＜0. 05).结论:夹脊电针治疗能够显著改善急性脊髓损伤模型大鼠肢体运动功能和脊髓组织病理形态学变化,可能与其下调脊髓损伤微环境中Nogo-A、Rho A、ROCKⅡ蛋白表达有关.
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Nogo-A及NgR在墨西哥钝口螈脑组织中的表达及意义
目的 探讨勿动蛋白A(Nogo-A)及勿动蛋白受体(NgR)在正常墨西哥钝口螈及其中脑胆碱能神经元损伤后脑组织中的表达.方法 以正常墨西哥钝口螈脑组织和中脑胆碱能神经元损伤后第3、7、14、21天脑组织作为研究对象,采用免疫荧光技术观察正常墨西哥钝口螈脑组织中Nogo-A及NgR的表达;分别用荧光定量PCR和蛋白质印迹法(WB法)检测正常墨西哥钝口螈和损伤组脑组织中Nogo-A及NgR的mRNA含量和蛋白含量的变化.结果 正常墨西哥钝口螈脑组织中存在Nogo-A及NgR的表达,在墨西哥钝口螈中脑胆碱能神经元损伤后(注入AF64A)第3天,中脑乙酰胆碱转移酶(ChAT)阳性细胞数明显减少,与正常组比较差异有统计学意义(P＜0.01),损伤后第7、14、21天均有ChAT、5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)双阳性细胞,且随时间的延长而增加.中脑胆碱能神经元损伤后第3、7、14、21天脑组织中,Nogo-A的mRNA和蛋白水平的表达量与正常组比较差异均无统计学意义;而NgR的mRNA和蛋白水平的表达量均下降,与正常组比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论 中枢神经系统损伤后的再生可能与NgR表达量的下降有关.
