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中药单体土荆皮酸治疗妇科肿瘤的研究现状
目前妇科肿瘤的发病率很高,成为严重危害妇女健康的疾病.端粒酶本质上是一种逆转录酶,由RNA和蛋白质组成,它以自身RNA为模板,合成端粒酶重复序列,加至染色体末端,它作为一个肿瘤发生、发展过程中主要的分子生物学标志,其活性检测在肿瘤早期诊断中有重要意义.
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土荆皮酸诱导卵巢癌细胞系SKOV3凋亡的实验研究
目的:研究土荆皮酸(PAB)对体外培养的SKOV3细胞的生物学效应和作用机制.方法:用MTT法、流式细胞术、电镜检测体外培养的SKOV3细胞在PAB作用下的增殖抑制及凋亡程度,用RT-PCR法检测P53/Bcl-2/B8x的表达水平.结果:①PAB对SKOV3细胞的增殖抑制作用随浓度升高而明显增强,其IC50约10μmol/L.②流式细胞术证实PAB呈浓度依赖性改变细胞周期分布,一方面降低G0G1期的细胞比例,另一方面增高G2/M期细胞的比例.③RT-PCR法显示SKOV3细胞在10μmol/LPAB作用12、24、48h均显示Bax上调和Bcl-2的下调,P53则未检测到表达.结论:在体外PAB能抑制SKOV3细胞增殖,诱导其凋亡,其诱导凋亡机制可能与Bax的上调和Bcl-2的下调相关.
关键词： 卵巢癌SKOV3细胞系 土荆皮酸 细胞凋亡 -
土荆皮酸对卵巢癌A2780细胞株增殖的抑制作用及其机制
端粒酶与肿瘤发生、早期诊断、预后密切相关,已成为新的肿瘤标志物及肿瘤治疗的新靶点[1].土荆皮酸(pseudolaric acid B,PAB)是从荆树皮中提取的一种二萜类化合物,可通过caspase-3及p53/Bax/Bcl-2途径诱导细胞凋亡,对多种肿瘤具有良好治疗效果[2].本实验应用不同浓度的PAB处理卵巢癌A2780细胞,观察PAB对其端粒酶活性的影响,现报道如下.
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土荆皮酸对人肺癌A549细胞增殖和凋亡的影响及其机制
目的 探讨土荆皮酸对肺癌细胞系A549细胞增殖和凋亡的影响及其可能的作用机制.方法 体外培养的A549细胞,用不同浓度的土荆皮酸(0、4、8、16、32 μmol/L)处理24、48、72 h,MTT法测定其对A549细胞增殖的影响;土荆皮酸(0、4、8、16 μmol/L)处理A549细胞48 h后,流式细胞仪检测细胞凋亡和周期,分光光度计检测Casepase-3相对活性,Western blot法检测PTEN、Akt、p-Akt的表达.结果 土荆皮酸能有效抑制A549细胞增殖,且呈浓度和时间依赖性(P＜ 0.05);土荆皮酸作用A549细胞48 h后,细胞凋亡率从14.8％上升至37.7％,显著高于对照组(土荆皮酸0 μmol/L) (P＜ 0.05);流式细胞仪检测结果显示,土荆皮酸能抑制细胞的G1期行进和G1/S转换;Casepase-3相对活性显著增加(P＜0.05);土荆皮酸可上调PTEN表达并抑制p-Akt的表达(P＜0.05).结论 土荆皮酸可抑制A549细胞增殖并促进其凋亡,其作用机制可能与上调PTEN并抑制Akt信号通路,继而阻滞细胞周期并激活线粒体凋亡途径相关.
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土荆皮酸对人卵巢癌细胞端粒酶活性及有关基因的影响
目的 探讨土荆皮酸(PAB)对人卵巢癌细胞株A 2780细胞端粒酶活性的影响及其机制,为开发新的治疗及预防卵巢癌的天然化合物提供基础.方法 采用改良的端粒重复扩增(TRAP)-ELISA方法检测土荆皮酸对A 2780细胞端粒酶活性的影响.半定量RT-PCR方法检测PAB作用后A 2780细胞端粒酶逆转录酶(hTERT)及c-myc原癌基因tuRNA的表达水平.结果 (1)PAB对A 2780细胞增殖珠抑制呈剂量依赖效应,IC50为5μmol·L-1;(2)端粒酶活性经过PAB处理后呈现明显的下降趋势,且具有时间一效应关系,培养48h后,端粒酶活性受到显著抑制;(3)hffERT mRNA、c-myc mRNA表达量在5μmol·L-1PAB作用48 h后下降显著,较对照组分别下降了44.3%和53.4%(P＜0.05).结论 土荆皮酸可通过下调hTERT基因转录抑制A 2780 细胞的端粒酶活性,PAB很有可能是一种新的治疗并预防卵巢癌的天然化合物.
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土荆皮酸对HeLa细胞端粒酶活性和细胞周期的影响
目的:研究土荆皮酸对宫颈癌HeLa细胞端粒酶活性及其细胞周期的影响.方法:采用PCR-ELISA方法检测HeLa细胞经PAB作用前后端粒酶活性的变化,应用流式细胞仪检测细胞周期的分布.结果:经PAB作用后,HeLa细胞端粒酶活性下降,随药物浓度增加和作用时间的延长,其抑制作用增强;PAB作用24 h后,HeLa细胞G2/M期细胞增多,S期细胞减少,出现G2/M期阻滞,并呈现剂量依赖性.结论:PAB能抑制HeLa细胞的端粒酶活性,其机制可能与其细胞周期阻滞作用有关.
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Caspase 3在土荆皮酸诱导卵巢癌SKOV3细胞凋亡中的作用
目的:探讨Caspase 3在土荆皮酸(PAB)诱导卵巢癌SKOV3细胞凋亡中的作用.方法:使用不同浓度的PAB处理SKOV3细胞,应用流式细胞仪检测细胞周期的分布,采用Western Blot法检测SKOV3细胞经PAB作用前后Bcl-2和Caspase 3蛋白的表达变化.结果:经PAB作用后,SKOV3细胞出现剂量依赖性G2/M期阻滞伴随细胞凋亡,随药物浓度增加,Bcl-2蛋白表达逐渐下降,Caspase 3蛋白表达上调,Caspase 3活化百分率增高.结论:PAB能通过调节Bcl-2蛋白的表达激活Caspase 3,从而诱导SKOV3细胞发生凋亡.
关键词： 土荆皮酸 Bcl-2 Caspase 3宫颈癌SKOV3细胞
