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  • 肾消康对糖尿病大鼠肾组织基因CcL5mRNA表达的影响

    作者:姜德友;白玉宾;柳成刚;王兵;陈永坤;姚丽;刘征;李秀源;鲁美君;Fetherston R

    目的:比较糖尿病肾病(DN)大鼠和中药复方肾消康治疗组大鼠肾脏组织中基因表达的差异,并用Eve green实时荧光RT-PCR技术定量检测CcL5mRNA在各组大鼠肾脏组织的表达水平.方法:(1)差异表达基因的筛选:实验大鼠分为空白组、模型组、治疗组.从肾脏组织中抽提mRNA,由纯化的总RNA合成双链cDNA,并将其纯化,以生物素标记cRNA合成,纯化和质控体外转录(IVT)产物,片断化cRNA,然后进行杂交、洗脱、染色、芯片扫描并用软件进行统计分析,筛选出差异表达数据.不同肾脏组织样本用灰度扫描图和杂交信号强度散点图表示.(2)荧光定量RT-PCR的检测:RNA样品反转录,荧光定量PCR反应.结果:仅对筛选出差异表达基因谱中的CcL5mRNA进行报告.糖尿病肾病模型组肾脏组织基因CcL5mRNA表达上调,中药复方肾消康治疗组肾脏组织基因CcL5mRNA表达下调.结论:CcL5mRNA在糖尿病状态下肾脏也有表达,并且表达上调,而中药复方肾消康可使其下调,这也是中药复方对糖尿病性肾组织损伤具有保护作用的机制之一.

  • 肾消康对糖尿病大鼠肾组织基因Gna12表达的影响

    作者:乔羽;解颖;白玉宾;王兵;陈飞;刘春红;柳成刚;常佳怡;高恩宇;韩洁茹;姜德友

    [目的]观察中药复方肾消康对糖尿病肾病大鼠的防治作用及对肾脏基因表达的影响,探讨糖尿病肾病(DN)的发病机制,揭示中药复方肾消康防治DN的作用机制,筛选药效作用靶点,为临床推广应用提供科学依据.[方法]本实验采用链脲佐菌素(STZ)加高热量饮食建立糖尿病大鼠肾脏损伤模型.运用放免、生化、光镜、电镜及美国Affymetrix公司的基因表达谱芯片、逆转录聚合酶链反应法(RT-PCR)等先进检测手段和方法,观察了多项指标,尤其是通过聚类分析寻找和DN有重要相关性的基因,并进一步采用实时荧光定量RT-PCR法做验证实验研究.[结果]鸟嘌呤核苷酸结合蛋白α12(Gna12),在糖尿病大鼠肾脏表达下调,肾消康中剂量组表达上调.[结论]应用Affymetrix Rat2302.0基因表达谱芯片检测糖尿病大鼠肾脏基因的表达,Gna12是筛选出的肾脏差异表达基因和药效靶点之一,并对该基因做荧光定量RT-PCR测序分析.基因功能分析表明,在糖尿病状态下,Gna12表达下调,与糖尿病肾脏损伤有重要相关性,而经肾消康治疗后大鼠肾脏组织中Gna12表达上调,可见肾消康对Gna12基因表达具有良性调节作用,其作用机制还有待于进一步研究.

  • 肾消康对糖尿病大鼠肾组织基因Cxcl12表达的影响

    作者:姜德友;王俊霞;王兵;郭加利;太鑫;刘春红;柳成刚;刘征;周雪明

    目的:比较糖尿病肾病大鼠和中药复方肾消康治疗组大鼠肾脏组织中基因表达的差异.方法:实验大鼠分为正常组、模型组、治疗组.从肾脏组织中抽提mRNA,由纯化的总RNA合成双链cDNA,并将其纯化,以生物素标记cRNA合成.纯化和质控体外转录(IVT)产物,片断化cRNA,然后进行杂交、洗脱、染色、芯片扫描并用软件进行统计分析.筛选出差异表达数据.不同肾脏组织样本用灰度扫描图和杂交信号强度散点图表示.结果:仅对筛选出差异表达基因谱中的Cxel12进行报告.糖尿病肾病模型组肾脏组织基因Cxcl12表达上调,中药复方肾消康治疗组肾脏组织基因Cxcl12表达下调.结论:Cxcl12在糖尿病状态下肾脏也有表达,并且表达上调,而中药复方肾消康可使其下调,这也是中药复方对糖尿病性肾组织损伤具有保护作用的机制之一.

  • 肾消康对糖尿病大鼠肾组织基因myosin Va表达的影响

    作者:白玉宾;王兵;刘春红;柳成刚;郭加利;宁式颖;韩洁茹;解颖;陈飞;姜德友

    目的:观察中药复方肾消康对糖尿病肾病大鼠的防治作用及对肾脏基因表达的影响,探讨糖尿病肾病(DN)的发病机制,揭示中药复方肾消康防治DN的作用机理,筛选药效作用靶点,为临床推广应用提供科学依据.方法:本实验采用链脲佐菌素(STZ)加高热量饮食建立糖尿病大鼠肾脏损伤模型.运用放免、生化、光镜、电镜及美国Affymetrix公司的基因表达谱芯片、RT-PCR等先进检测手段和方法,观察了多项指标,尤其是通过聚类分析寻找和DN有重要相关性的基因,并进一步采用实时荧光定量RT-PCR法做验证实验研究.结果:肌球蛋白Va(myosin Va),在糖尿病大鼠肾脏表达下调,肾消康治疗组表达上调.结论:应用Affymetrix Rat2302.0基因表达谱芯片检测糖尿病大鼠肾脏基因的表达,myosin Va是筛选出的肾脏差异表达基因和药效靶点之一,并对该基因做荧光定量RT-PCR测序分析,这在国内外尚属首次.基因功能分析表明,在糖尿病状态下,myosin Va表达下调,与糖尿病肾脏损伤有重要相关性,而经肾消康治疗后大鼠肾脏组织中myosin Va表达上调,可见肾消康对myosin Va基因表达具有良性调节作用,其作用机制还有待于进一步研究.

  • 肾消康对糖尿病大鼠肾组织基因Aloxl2表达的影响

    作者:白玉宾;王兵;刘春红;柳成刚;郭加利;宁式颖;韩洁茹;解颖;陈飞;姜德友

    目的:观察中药复方肾消康对糖尿病肾病大鼠肾脏Aloxl2基因表达的影响,探讨糖尿病肾痛(DN)的发生与Alox 12基因变化的相关性,筛选中药复方肾消康防治DN的药效作用靶点.方法:采用链脲佐菌素加高脂饮食的方法建立糖尿病大鼠肾脏损伤的模型.运用美国Affymetrix公司的基因表达谱芯片,尤其是通过聚类分析寻找和糖尿病肾病有重要相关性的基因——Alox 12基因是其中之一,并进一步采用实时荧光定量RT - PCR法,观察Aloxl2基因表达的变化.结果:花生四烯酸12-脂加氧酶( Aloxl2),在糖尿病大鼠肾脏表达上调,肾消康治疗组表达下调.结论:在糖尿痛肾损伤状态下,Aloxl2表达上调,与糖尿痛肾脏损伤有重要相关性,而经肾消康治疗后大鼠肾脏组织中Aloxl2表达下调,可见肾消康对Aloxl2基因表达具有良性调节作用,其作用机制还有待于进一步研究.

  • 肾消康对糖尿病肾病大鼠肾损伤的保护作用及对tensin表达的影响

    作者:黄立娟;杜波;姜德友

    目的:探讨肾消康对糖尿病肾病(DN)的保护作用及机理.方法:建立糖尿病肾病大鼠模型,以肾消康治疗.观察各组大鼠的血糖、尿素氮、肌酐、24h尿微量白蛋白的数值及tensin的表达.结果:正常大鼠肾脏tensin表达很弱,DN大鼠肾脏tensin表达明显增强(与正常对照组相比P<0.01,有统计学意义),肾消康对DN大鼠肾脏组织tensin的表达有下调作用(与模型组相比P<0.01,有统计学意义).同时肾消康能有效降低血糖、尿素氮、肌酐、尿微量白蛋白.结论:肾消康能够调节血糖水平,下调ten-sin的表达,降低尿素氮、肌酐、尿微量白蛋白,从而防止肾纤维化及延缓肾衰.

  • 自拟肾消康治疗糖尿病肾病35例

    作者:陈谦

    糖尿病肾病(DN),亦称糖尿病性肾小球硬化症,是糖尿病严重并发的微血管病变,也是糖尿病致死的主要原因之一.目前尚缺乏有效的治疗方法,笔者针对DN脾肾两虚、湿瘀内阻的病机特点,自拟中药方肾消康加减治疗DN 35例,取得了较为满意的疗效,现总结如下.

  • 肾消康对糖尿病骨质疏松大鼠骨胶原重塑的影响

    作者:王兵;李富震;白玉宾;王非;姜德友

    目的:观察肾消康对糖尿病性骨质疏松模型大鼠骨胶原重塑的影响。方法:雄性Wistar大鼠73只,随机选15只为空白组,以普通饲料喂养,经左下腹注射柠檬酸缓冲液25 mg·kg-1。其余58只称取质量,以25 mg·kg-1链脲佐菌素左下腹腔注射,造模成功后再随机分为模型组、治疗组,两组均喂以高热量饲料13周,治疗组以中药复方肾消康灌胃;空白组、模型组以生理盐水灌胃,均1次·d-1。第26周末处死大鼠,取胫骨、腰椎骨制备扫描电镜标本,并对其进行形态学观察。结果:模型组胫骨骨胶原大面积流失,排列紧密度降低、走行散乱、排列不规整,甚至个别视野下骨胶原组织出现断裂、塌陷现象;腰椎骨骨胶原完全消失、骨基质完全暴露。肾消康治疗组大鼠骨胶原组织恢复明显,尤其是在腰椎骨体现更为显著,骨的力学结构得到改善,骨胶原丢失降低,排列更紧密、有规律,促进了骨胶原组织的再生与重塑。结论:肾消康可有效促进骨胶原组织的再生与重塑,从而为有效防治糖尿病骨质疏松症提供了可行的思路与方法。

  • 肾消康对糖尿病肾病大鼠肾组织基因S100A9表达的影响

    作者:刘春红;王兵;乔羽;白玉宾;解颖;陈飞;柳成刚;常佳怡;高恩宇;韩洁茹;姜德友

    目的 观察中药复方肾消康对糖尿病肾病(DN)大鼠的防治作用及对肾脏基因表达的影响,探讨糖尿病肾病的发病机制,揭示中药复方肾消康防治DN的作用机理,筛选药效作用靶点,为临床推广应用提供科学依据.方法 实验采用链脲佐菌素(STZ)加高热量饮食建立糖尿病大鼠肾脏损伤模型.运用放免、生化、光镜、电镜及美国Affymetrix公司的基因表达谱芯片、RT-PCR等先进检测手段和方法,观察了多项指标,尤其是通过聚类分析寻找和DN有重要相关性的基因,并进一步采用实时荧光定量RT-PCR法做验证实验研究.结果 S100钙结合蛋白A9(S100A9),在糖尿病大鼠肾脏表达上调,肾消康治疗组表达下调.结论 应用Affymetrix Rat2302.0基因表达谱芯片检测糖尿病大鼠肾脏基因的表达,S100A9是筛选出的肾脏差异表达基因和药效靶点之一,并对该基因做荧光定量RT-PCR测序分析,这在国内外尚属首次.基因功能分析袁明,在糖尿病状态下,S100A9表达上调,与糖尿病肾脏损伤有重要相关性,而经肾消康治疗后大鼠肾脏组织中S100A9表达下调,可见肾消康对S100A9基因表达具有良性调节作用,其作用机制还有待于进一步研究.

  • 肾消康对糖尿病大鼠肾组织基因eIF3s8表达的影响

    作者:王兵;乔羽;白玉宾;解颖;陈飞;刘春红;柳成刚;常佳怡;高恩宇;韩洁茹;姜德友

    目的 观察中药复方肾消康对糖尿病肾病大鼠的防治作用及对肾脏基因表达的影响,探讨糖尿病肾病(DN)的发病机制,揭示中药复方肾消康防治DN的作用机理,筛选药效作用靶点,为临床推广应用提供科学依据.方法 采用链脲佐菌素(STZ)加高热量饮食建立糖尿病大鼠肾脏损伤模型.运用放免、生化、光镜、电镜及美国Affymetrix公司的基因表达谱芯片、RT - PCR等先进检测手段和方法,观察了多项指标,尤其是通过聚类分析寻找和DN有重要相关性的基因,并进一步采用实时荧光定量RT - PCR法做验证实验研究.结果 真核生物翻译起始因子3,8亚基(eIF3 s8),在糖尿病大鼠肾脏表达下调,肾消康治疗组表达上调.结论应用Affymetrix Rat2302.0基因表达谱芯片检测糖尿病大鼠肾脏基因的表达,eIF3s8是筛选出的肾脏差异表达基因和药效靶点之一,并对该基因做荧光定量RT - PCR测序分析.这在国内外尚属首次.基因功能分析表明,在糖尿病状态下,eIF3s8表达下调,与糖尿病肾脏损伤有重要相关性,而经肾消康治疗后大鼠肾脏组织中eIF3s8表达上调,可见肾消康对eIF3s8基因表达具有良性调节作用,其作用机制还有待于进一步研究.

  • 肾消康对糖尿病大鼠肾组织基因ubiquitinmRNA表达的影响

    作者:陈飞;姜德友;白玉宾;解颖;刘春红;柳成刚;乔羽;王兵;常佳怡;高恩宇;周雪明;刘征

    目的 观察中药复方肾消康对糖尿病肾病大鼠的防治作用及对肾脏基因表达的影响,探讨DN的发病机制,揭示中药复方肾消康防治DN的作用机理,筛选药效作用靶点,为临床推广应用提供科学依据.方法 采用链脲佐菌素(STZ)加高热量饮食建立糖尿病大鼠肾脏损伤模型.运用放免、生化、光镜、电镜及美国Affymetrix公司的基因表达谱芯片、RT-PCR等先进检测手段和方法,观察多项指标,通过聚类分析寻找和DN有重要相关性的基因,并进一步采用实时荧光定量RT- PCR法做验证实验研究.结果 泛素mRNA( ubiquitin mRNA)在糖尿病大鼠肾脏表达上调,肾消康治疗组表达下调.结论 应用Affymetrix Rat2302.0基因表达谱芯片检测糖尿病大鼠肾脏基因的表达,ubiquitin mRNA基因是筛选出的肾脏差异表达基因和药效靶点之一.糖尿病状态下,ubiquitin mRNA基因表达上调,与糖尿病肾脏损伤有重要相关性,而经肾消康治疗后大鼠肾脏组织中ubiquitinm RNA表达下调.肾消康对ubiquitin mRNA基因表达具有良性调节作用.

  • 肾消康对糖尿病大鼠肾损伤的保护作用及对血管紧张素Ⅱ影响的实验研究

    作者:姜德友;李秀源;柳成刚;白玉宾;陈永坤;孙洋;王兵

    目的:探讨肾消康对糖尿病肾病的保护作用及机理.方法:采用STZ加高脂饮食造模.设空白组、模型组、治疗组.结果:肾消康能够调解血糖、胰岛素水平,降低肌酐、尿素氮、糖化血红蛋白、尿微量白蛋白、β2-微球蛋白、血管紧张素Ⅱ,疗效优于模型组(P<0.01).结论:肾消康能够调解血糖及胰岛素水平,降低糖化血红蛋白、尿微量白蛋白、β2-微球蛋白、血管紧张素Ⅱ,从而防止肾纤维化及延缓肾衰.

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