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白术茯苓汤不同配比对脾虚型克罗恩病大鼠结肠VIP及其受体的影响
目的：观察脾虚型克罗恩病（CD）大鼠结肠粘膜中血管活性肠肽（VIP）及其受体（VIPR1）表达的变化，以及白术茯苓汤不同配比对其的影响。方法：采用破气耗气加饥饱失常之复因脾虚造模法结合Morris方法复制脾虚型CD动物模型，白术茯苓汤不同配比灌胃给药，免疫组化法检测结肠组织VIP及VIPR1的蛋白表达。结果：与空白组相比，模型组大鼠结肠VIP及其受体VIPR1蛋白表达明显增高（P<0.05）；与模型组比较，B5组（白术：茯苓=12：15）、B6组（白术：茯苓=15：12）、B7组（白术：茯苓=18：9）结肠组织VIP及其受体VIPR1蛋白表达明显降低（P<0.05）。结论：白术茯苓汤B5组、B6组、B7组剂量配比能下调脾虚型克罗恩病结肠组织VIP及其受体VIPR1蛋白表达，从而防止致炎因子的分泌，减轻结肠的炎症反应，发挥其治疗作用。
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基于肠“神经-免疫”网络的白术茯苓汤不同配比干预脾气虚型克罗恩病机制研究的探讨
克罗恩病（CD）的发生与环境、遗传、感染和免疫等多种因素相关，因缺乏特异性治疗措施，是现代难治性疾病之一。中医通过辨证论治，可以有效缓解病情、改善生存质量、减轻西药的副作用。白术、茯苓配伍正好契合CD脾虚夹湿的常见病机，是治疗CD的核心配伍结构。前期研究显示白术茯苓汤可降低脾虚模型VIP、下调VIP受体、升高sIgA。为进一步明确神经递质及其与免疫系统的相互关联在CD发病中的作用及该方不同配比的干预机制，本课题观察了该方不同配比对脾气虚型CD的“神经-免疫”网络相关递质及其受体功能、细胞因子分泌及“TLR4-NF-κB”信号转导的影响，为深入探讨中药复方治疗CD提供相关参考与基础。
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白术茯苓汤不同配比对脾虚型克罗恩病大鼠核因子-кB mRNA的表达以及细胞因子的影响
目的:考察白术茯苓汤不同配比对脾虚型克罗恩病(CD)大鼠核因子-кB(NF-кB)mRNA的表达以及血清肿瘤坏死因子(TNF-α)、白介素-1β(1L-1β)水平的影响;初步探讨该方治疗脾虚型CD的免疫学机制.方法:采用破气耗气加饥饱失常之复因脾虚造模法结合Morris方法复制脾虚型CD动物模型,运用“基线等比增减设计法”对白术、茯苓剂量配比进行设计,白术茯苓汤不同配比灌胃给药,实时荧光PCR法(Real-time PCR)检测结肠黏膜NF-кB mRNA的表达,酶联免疫吸附法(ELISA)检测大鼠血清TNF-α和IL-1β含量.结果:与空白组相比,模型组NF-кB mRNA的表达、血清TNF-α、IL-1 β升高(P＜0.05);与模型组比较,B5组(白术∶茯苓=12∶15)、B6组(白术∶茯苓=15∶12)NF-кB mRNA的表达降低(P＜0.05);B5组、B6组、B7组(白术∶茯苓=18∶9)TNF-α显著性降低(P＜0.05);B6组、B7组血清1L-1β显著性降低(P＜0.05).结论:白术茯苓汤不同配比对脾虚型CD的NF-кB传导的影响有异;其中以B6组能明显干预NF-кB mRNA在脾虚型CD结肠黏膜细胞中的表达,进而降低TNF-α、IL-1β的水平,减轻脾虚型CD炎症反应.
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白术茯苓汤及水煎液提取分离组分对脾气虚大鼠血管活性肠肽受体亲和力的影响
目的:观察白术茯苓汤及其水煎液提取分离组分对脾气虚大鼠血管活性肠肽(VIP)受体亲和力的影响.方法:以耗气破气加饥饱失常法复制脾气虚大鼠模型,采用放射性配基结合分析法检测各组VIP受体大结合容量(RT)和受体亲和常数(Kd).结果:各组RT无统计学差异；与空白组比较,模型组Kd值升高(P＜0.01)；与模型组比较,总多糖、络合物组Kd值呈下降趋势,白术内酯Ⅲ组Kd值呈升高趋势,但皆无统计学意义；白术茯苓汤组、组分配伍组Kd值显著降低(P＜0.05).结论:白术茯苓汤及组分配伍组能提高VIP受体亲和力；不同组分对Kd的效应具有一定差异性,配伍则显示可能具有协同增效作用.
关键词： 白术茯苓汤 组分配伍 放射性配基结合分析法 脾气虚证 血管活性肠肽受体亲和力 -
白术茯苓汤提取分离组分对脾气虚大鼠血浆胃肠激素及肠道局部免疫功能的影响
目的:比较白术茯苓汤水煎液及其提取分离组分与组分配伍对脾气虚大鼠血浆胃肠激素及肠道局部免疫的调节作用.方法:以大黄、厚朴、枳实加饥饱失常法复制脾气虚证的动物模型,采用RIA法检测血浆VIP、MTL、SS含量;ELISA法检测肠组织SIgA含量.结果:与空白组比较,脾气虚模型大鼠VIP、SS明显升高(P<0.05),MTL、SIgA明显降低(P<0.05);与模型组比较,各高、中剂量组对上述指标均有不同程度的改善,其中,①白术茯苓汤及多糖、络合物、白术内酯Ⅲ、组分配伍的高剂量组均能下调血浆VIP水平(P<0.05),以白术茯苓汤及组分配伍组作用为显著(P<0.01);白术茯苓汤、组分配伍高剂量组能上调血浆MTL水平(P<0.05);白术内酯Ⅲ中剂量组、组分配伍高、中剂量组能下调血浆SS水平(P<0.05).②白术茯苓汤、各组分及组分配伍的高、中剂量组均能升高SIgA分泌水平(P<0.05),以白术茯苓汤、多糖低剂量组、组分配伍高剂量组作用为显著(P<0.01).结论:白术茯苓汤及提取分离组分对胃肠激素及肠道局部免疫有一定的调节作用,对VIP、SIgA作用明显,对MTL、SS作用不确切;组分配伍有协同增效作用.
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不同配比白术茯苓汤对CD大鼠(脾虚型)血清细胞因子水平的影响
目的 探讨白术茯苓汤不同配比对脾虚型克罗恩病(CD)大鼠血清细胞因子的影响.方法 选择96只SPF级SD大鼠,分为A组(脾虚型CD造模)、B组(空白组).A组按照白术茯苓配比分为模型组、A1、A2、A3、A4、A5、A6、A7、A8、A9、A10.检测血清白介素-10(IL-10)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平.结果 模型组TNF-α高于B组,IL-10低于B组(P<0.05);A5、A6、A7组TNF-α低于模型组(P<0.05);A6组IL-10升高(P<0.05).结论 脾虚CD大鼠血清细胞因子受白术茯苓汤不同配比影响,特别是A6组.
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白术茯苓汤及提取组分对脾气虚大鼠肠道局部免疫功能的影响
目的:比较研究白术茯苓汤及其分离组分与组分配伍对脾虚大鼠肠道局部免疫的调节作用.方法:以灌服大黄厚朴枳实水煎液加饥饱失常法复制脾气虚证的动物模型,再给模型组分别灌服不同成分,用时设模型组和空白组对照.七天后称脾和胸腺湿重并计算脾指数及胸腺指数;用EUSA法检测大鼠肠道分泌性免疫球蛋白A(sIgA)的分泌水平.结果:治疗组各组脾指数除了低剂量组,皆与模型组比较差异有统计学意义(P<0.05);治疗各组胸腺指数除了白术内酯Ⅲ中低剂量组、络合物各剂量组、组分配伍低剂量组,与模型组比较提高明显(P<0.05);sIgA分泌水平治疗各组与模型组比较明显提高(P<0.05).结论:白术茯苓汤及各提取分离组分对脾气虚大鼠模型的肠道局部免疫功能有不同程度的促进作用,其中以白术茯苓汤及多糖组明显;各组分配伍有协同增效作用.
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白术茯苓白术茯苓汤及其不同配比对脾气虚大鼠VIP的实验研究——论配伍及剂量对方剂功效的影响
目的:通过白术、茯苓及白术茯苓汤及不同配比对血管活性肠肤(VIP)的实验研究,探讨配伍及剂量对方剂功效的影响.方法:运用大黄、厚朴、枳实加饥饱失常法复制脾气虚证的动物模型,采用放射免疫观察白术、茯苓、白术茯苓汤及白术茯苓汤1:1、2:1、1:2配比对脾气虚大鼠血浆及结肠组织组VIP的影响.结果:与模型组比较,白术茯苓汤组能下调血浆及结肠组织组VIP含量(P＜0.05),茯苓组呈下调趋势,白术组呈升高趋势,但无统计学意义,而白术茯苓汤1:2、2:1组之结肠组织VIP明显升高(P＜0.01).结论:白术茯苓汤1:1组下调脾气虚大鼠VIP含量优于单味药,表明中药配伍运用的必要性和科学性;白术茯苓汤不同配比对VIP或下调或升高,表明剂量对方剂功效的影响不仅是量变,更有质变.
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白术茯苓汤不同配伍比例对克罗恩病大鼠细胞因子的影响
目的:考察白术茯苓汤1:1、2:1、1:2三种配比对克罗恩病大鼠细胞因子的影响.方法:采用Morris方法复制克罗恩病动物模型,白术茯苓汤不同配比灌胃给药,酶联免疫吸附法( ELISA)检测大鼠血清肿瘤坏死因子(TNF-α)、白介素-1β (IL-1β)、白介素-4(IL-4)、白介素-10(IL-10)含量.结果:与空白组相比,模型组TNF-α、IL-1β明显升高(P＜0.05),IL-4、IL-10无明显变化；与模型组相比,1:1组明显降低TNF-α水平(P＜0.05)；1:2组明显降低IL-1β水平(P＜0.05)；2:1组能同时降低TNF-α、IL-1 β水平(P＜0.05)；3种配比对IL-10无明显调节作用,但均能恢复IL-4至正常水平,其中以2:1组明显.结论:白术茯苓汤2:1组对TNF-α、IL-1β调节作用优于1:1组和1:2组,表明白术茯苓汤不同配比对Th1/Th2免疫失衡影响不同.
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白术茯苓汤各萃取部位对脾虚大鼠血管活性肠肽含量的影响
目的:确定白术茯苓汤下调脾虚大鼠血管活性肠肽(VIP)的有效部住.方法:以大黄、厚朴、枳实加饥饱失常法复制脾气虚证动物模型,将运用不同极性的有机溶剂萃取的白术茯苓汤所得到的正丁醇部位、乙酸乙酯部位、水层,运用水提醇沉法分别提取的白术茯芩多糖、茯苓多糖.以及白术茯苓汤水煎剂分别灌胃给药后观察各组药物对脾虚大鼠肠组织及血浆VIP的影响.结果:与模型组比较,白术茯苓汤组、正丁醇组均能降低脾虚大鼠VIP水平,其中白术茯苓汤对血浆VIP水平的下调更明显.结论:正丁醇部位具有下调脾虚大鼠VIP的作用.
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白术茯苓汤及水煎液提取分离组分对脾气虚大鼠VIP受体的影响
目的 观察白术茯苓汤及其水煎液提取分离组分与组分配伍对脾气虚大鼠VIP受体的调控作用.方法 以大黄厚朴枳实加饥饱失常法复制脾气虚证的动物模型,采用ELISA法检测,观察白术茯苓汤水煎液提取分离组分对脾气虚大鼠肠组织VIP受体的影响.结果 与模型组比较:①白术茯苓汤组、总多糖高剂量组、白术内酯Ⅲ中剂量组、组分配伍中剂量组能降低VIPR1水平(P<0.05);络合物高剂量组能显著降低VIPR1水平(P<0.01).②白术内酯Ⅲ高剂量组、络合物高剂量组、组分配伍中剂量组能降低VIPR2水平(P<0.05);白术茯苓汤组、总多糖高剂量组、络合物中剂量组能显著降低VIPR2水平(P<0.01).结论 白术茯苓汤及各提取分离组分对VIP受体皆有不同程度地下调作用.
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白术茯苓汤不同配比在脾气虚克罗恩病大鼠模型Th1/Th2类细胞因子免疫失衡中的作用
目的 考察白术茯芩汤不同配比对脾气虚克罗恩病大鼠Th1/Th2类细胞因子的影响;初步探讨该方治疗脾气虚CD的免疫机制.方法 采用破气耗气加饥饱失常法结合Morris方法复制脾气虚CD大鼠模型,以白术茯苓汤不同配比灌胃给药,酶联免疫吸附法检测血清TNF-α、IL-1β、IL-4、IL-6、IL-8、IL-10的含量.结果 与空白组相比,模型组TNF-α、IL-1β、IL-6和IL-8水平升高(P＜0.05),而IL-4、IL-10水平降低(P＜0.05);经药物干预后,B5组(白术∶茯苓=12∶15)、B6组(白术∶茯苓=15∶12)和B7组(白术∶茯苓=18∶9)TNF-α、IL-6水平明显降低(P＜0.05),而IL-4水平明显升高(P＜0.05);B6组、B7组IL-1β、IL-8水平明显降低(P＜0.05);B6组IL-10水平明显升高(P＜0.05).结论 白术茯苓汤可调节Th1/Th2类细胞因子失衡而调控肠道炎症,B6组即白术/茯苓5∶4剂量配比组作用佳.
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白术茯苓汤、香连丸及其合方对克罗恩病大鼠细胞因子免疫功能及肠粘膜中谷氨酰胺含量的研究
目的 比较研究白术茯苓汤、香连丸及其合方对克罗恩病(Crohn's Disease,CD)大鼠细胞因子免疫功能及肠粘膜中谷氨酰胺含量的影响.方法 采用2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)/乙醇法建立大鼠CD模型,以白术茯苓汤(1∶1)、香连丸及白术茯苓汤(1∶1)与香连丸合方灌胃给药,酶联免疫吸附法测定CD大鼠血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白介素-1β(IL-1β),白介素-4(IL-4),白介素-10(IL-10)和肠粘膜中谷氨酰胺(Glutamine,Gln)的含量.结果 与空白组相比,模型组血清TNF-α,IL-1β水平明显升高(P＜0.05),IL-4,IL-10水平无明显差异(P＞0.05);Gln水平明显升高(P＜0.05);与模型组相比,白术茯苓汤组与香连丸组明显降低TNF-α水平(P＜0.05);合方组明显增高TNF-α水平(P＜0.05);香连丸组与合方组明显降低IL-1β和IL-4水平(P＜0.05);三组中IL-10均无明显差异(P＞0.05);白术茯苓汤组与合方组明显降低Gln水平(P＜0.05).结论 白术茯苓汤、香连丸与合方组治疗CD的作用机制存在差异性,其合方组改善CD模型大鼠症状的作用机制有待进一步研究.
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白术茯苓汤及其与补气药、除湿药配伍对脾虚大鼠胃肠激素的影响
目的:探讨益气健脾方剂治疗脾胃气虚证的配伍规律.方法:采用苦寒泻下法复制大鼠脾虚模型,运用放射免疫分析法(RIA)检测白术茯苓汤及其与补气药、除湿药的不同配伍对脾虚大鼠胃泌素(GAS)、胃动素(MTL)及血管活性肠肽(VIP)的含量影响.结果:与正常对照组比较,脾虚模型大鼠GAS、MTL明显降低(P＜0.01),VIP显著升高(P＜0.01);与自然恢复组比较,各治疗组以上指标均有不同程度的改善,其中以综合配伍组改善作用为显著.结论:白术茯苓汤对脾虚大鼠胃肠激素的紊乱有改善作用,综合配伍组对以上指标的改善作用优于白术茯苓汤组及其他配伍组,表明中医复方配伍具有一定的科学性.
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白术茯苓汤调控脾虚大鼠血管活性肠肽有效部位的化学成分研究
目的:研究白术茯苓汤调控脾虚大鼠血管活性肠肽有效部位的化学成分.方法:运用多种层析分离手段,通过1H、13C-NMR等波谱技术及理化数据确定化合物的结构.结果:分离并鉴定了5个化合物,分别为Atractylenolide Ⅲ(Ⅰ)、十二烷基磺酸钾(Ⅱ)、齐墩果酸(Ⅲ)、正十八烷(Ⅳ)、丁二酸(Ⅴ).结论:以上化合物均为首次从该复方中分离得到.
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白术茯苓汤中用生白术或熟白术对湿困脾阻模型大鼠的影响
目的:研究白术茯苓汤中用生白术或熟白术对湿困脾阻模型大鼠的影响.方法:复制大鼠湿困脾阻模型.50只SD大鼠分为正常对照(等容生理盐水)组、模型(等容生理盐水)组、白术茯苓汤(生,8 g/kg)组、白术茯苓汤(熟,8gag)组、平胃散(8g/kg)组.测量大鼠体质量、腹围、腿围、平均进食量、饮水量,检测大鼠血清Na+-K+-ATP酶活性,神经降压素(NT)、P物质(SP)、血管活性肠肽(vIa)含量.结果:与正常对照组比较,模型组大鼠体质量减少,腹围、腿围增加,平均进食量、平均饮水量减少,差异有统计学意义(P＜0.05);大鼠血清Na+-K+-ATP酶活性减弱,SP含量减少,NT、VIP含量增加,差异有统计学意义(P＜0.05).与模型组比较,白术茯苓汤(生)组大鼠体质量增加、腹围减少,平均进食量、平均饮水量增加,差异有统计学意义(P＜0.05);大鼠血清Na+-K+-ATP酶活性增强,NT、VIP含量减少,差异有统计学意义(P＜0.05).结论:生白术之白术茯苓汤对湿困脾阻模型大鼠的保护作用较熟白术之白术茯苓汤为好,其作用机制可能是通过同时调节Na+-K+-ATP酶、NT及胃肠激素(SP、VIP)的分泌而达到治疗湿困脾阻的目的,白术茯苓汤中的生白术不可用熟白术替代.
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白术茯苓与白术茯苓汤对脾气虚腹泻大鼠模型胃肠形态及水液代谢的影响
目的:观察及比较白术、茯苓与白术茯苓汤对脾气虚腹泻大鼠模型胃肠形态及水液代谢的影响机理.方法:采用破气苦下饥饱失常法复制脾气虚腹泻模型.以白术、茯苓及白术茯苓汤灌胃给药,以光学显微镜进行组织形态学观察,以炭末推进法测定各组大鼠小肠推进率,以电解质分析仪测定血清电解质水平.结果:①病理观察:模型组动物胃肠胀气,胃肠壁均变薄,胃、小肠、大肠充血水肿.经治疗后不同程度的恢复.②小肠推进率:与空白组比较,模型组的小肠推进率显著降低(P＜0.05);与模型组比较,白术茯苓组和茯苓组的小肠推进率显著升高(P＜0.05).③血清电解质水平:与空白组比较,模型组Na+、K+水平均显著降低(P＜0.05);与模型组比较,白术茯苓组Na+水平和白术组K+水平显著升高(P＜0.05).结论:三组对脾气虚腹泻大鼠模型的胃肠形态及水液代谢皆有改善作用;白术茯苓配伍之白术茯苓汤多数指标优于单味药,与单味药比较呈现出协同增效的“相须相使”效应.
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白术茯苓汤不同配比对脾气虚克罗恩病大鼠结肠P物质及血清白介素-8的影响
目的:考察白术茯苓汤不同配比对脾气虚克罗恩病大鼠结肠黏膜SP和血清IL-8水平的影响;初步探讨该方治疗脾气虚CD的神经—免疫机制.方法:采用破气耗气加饥饱失常法结合Morris方法复制脾气虚CD大鼠模型,以白术茯苓汤不同配比灌胃给药,免疫组化法检测结肠黏膜SP,酶联免疫吸附法检测血清IL-8的含量.结果:与空白组相比,模型组SP、IL-8升高(P＜0.05);与模型组比较,B5组(白术∶茯苓=12∶15)、B6组(白术∶茯苓=15∶12)和B7组(白术∶茯苓=18∶9)SP的表达明显降低(P＜0.05);B6组、B7组血清IL-8的含量显著降低(P＜0.05).结论:白术茯苓汤B6、B7剂量配比组能显著降低脾气虚CD模型SP,下调IL-8水平,减轻结肠炎症反应,发挥治疗CD的作用.
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白术茯苓汤不同配比治疗脾气虚克罗恩病大鼠的疗效差异性浅析
克罗恩病的发生与“神经-免疫”网络密切相关.我们从细胞因子、“神经-免疫”相关递质及“TLR4--NF-κB”信号转导三方面考察了白术茯苓汤不同配比干预脾气虚型克罗恩病的机制.结果表明白术茯苓汤不同配比对上述三方面的调节具有差异性,B5和1B6组较全面,尤以B6组为显著.为探索组方配伍比例的基本规律,课题组对白术茯苓汤的配伍比例进行了回顾性文献研究.资料显示含有白术茯苓汤治疗“下利”的方剂共397首中,配伍比例涉及9类,其中白术、茯苓等比配伍的方剂共218首,占总体的54.9％.依据中医理论,结合文献研究,本文初步探讨了该方不同配比治疗脾气虚CD大鼠疗效的差异性,认为B6组之配比(白术茯苓15:12)接近等比配伍,体现了益气健脾以治本,燥湿渗湿以治标,标本同治,治本为主的治疗原则,故而疗效较著.
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白术茯苓汤分煎、合煎及醇提对脾虚大鼠血管活性肠肽的比较研究
目的:探讨白术茯芩汤不同煎药方法及煎药溶媒对脾虚大鼠血管活性肠肽的影响.方法:采用耗气破气加饥饱失常法复制脾虚大鼠模型,运用放射免疫法(RIA)检测白术茯苓汤分煎、合煎及醇提剂对脾虚大鼠血浆及结肠组织中血管活性肠肽(VIP)含量的影响.结果:脾虚大鼠VIP显著升高,白术茯苓汤合煎及分煎1比1均组能下调VIP,但合煎组更为明显.结论:白术茯苓汤合煎剂能明显下调脾虚大鼠血管活性肠肽含量.
