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应用ELISA和IHA检测粤东梅州丘陵山区人群血清弓形虫抗体
为了解粤东丘陵山区健康人群弓形虫病的感染情况.方法:用ELISA和IHA两种血清学检测方法进行互补检测.结果:共检1 010人,血清弓形虫抗体阳性157人,阳性率为15.54%.在157例阳性中,除90例双阳性外(ELISA和IHA),还有67例单项阳性(ELISA或IHA),其中ELISA阳性而IHA阴性23例,IHA阳性而ELISA阴性44例.结论:地处粤东丘陵山区的梅州市人群弓形虫病感染率较高,应引起重视.对弓形虫病的实验诊断以选用两种血清学方法同时检测为佳.
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检测日本血吸虫抗体标准化间接血凝试剂盒的研制
目的 研制检测日本血吸虫抗体(IHA)的标准化间接血凝试剂盒.方法 通过不同筛目尼龙绢和低频超声等方法制备、纯化日本血吸虫可溶性虫卵抗原,致敏人"O"型血红细胞;按医学决定水平确定免疫学质量控制标准及参考,优选原材料质量,规范生产工艺,研究制定反应体系的标准化,生产IHA试剂盒并进行鉴定.结果 用生产的IHA试剂盒检测50例急性血吸虫病人血清全部阳性,检测201份慢性血吸虫病患者血清,193份阳性,敏感性96.0%;200份健康人血清均为阴性,特异性100%;肝吸虫、姜片虫、钩虫及乙肝患者血清均为阴性,肺吸虫病的交叉反应率为19.4%(6/31).IHA试剂盒批内变异和批间变异小,有效诊断率为97.9%.同一批试剂盒在室温、4 ℃条件下保存3年未见效价明显改变.结论 研制的IHA试剂盒具有较高的特异性和敏感性,可标准化生产.该试剂盒具有操作方便、快速、结果判断容易,不需要特殊的仪器设备,价格低廉等优点,可广泛用于现场查病.
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精神分裂症患者弓形虫感染的血清学调查
目的:了解张家口地区精神分裂症患者弓形虫感染状况,探讨弓形虫感染与精神分裂症之间的关系.方法:采用间接红细胞凝集试验对222例住院精神分裂症患者及78例健康体检者进行弓形虫抗体检测.结果:张家口地区精神分裂症患者弓形虫抗体阳性率为7.66%,健康体检者为1.28%,两者之间差异显著(P＜0.05).结论:本地区精神分裂症患者弓形虫抗体阳性率高于健康人群.提示临床医务工作者应加强对弓形虫病的认识,重视精神病患者的弓形虫感染情况,对门诊和住院病人进行常规弓形虫检测.
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微量末梢血浆用于IHA诊断血吸虫病的现场应用研究
目的评价微量末梢血浆用于IHA在现场诊断血吸虫病的应用价值.方法现场选定重、中、轻3个不同感染率的流行村,对6～60岁的居民分别用微量末梢血浆(P-IHA)和常规血清IHA法(S-IHA)进行血吸虫病检查,并同时进行了两种方法的成本费用比较和居民依从性调查.结果在现场同等条件下,P-IHA和S-IHA在不同流行区的检出率均无显著差异,其阳性符合率为96.6%,阴性符合率为98.8%;每检测1人份样本的材料和人工及交通费用,P-IHA(2.24元)比S-IHA(2.95元)低0.71元;居民对P-IHA的依从性(50.4%)显著高于S-IHA(24.6%).结论 P-IHA操作简便,费用低,依从性高,适合于现场大规模血吸虫病检查和流行病学调查.
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135例急性血吸虫病例IHA检测抗体滴度效价分析
目的 分析急性血吸虫病确诊病例间接血凝试验(IHA)检测抗体滴度效价,为诊断与治疗急性血吸虫病提供依据.方法 以2001年以来收治住院的135例急性血吸虫病确诊病例为观察对象.采集病人基本情况,询问疫水接触情况等,并进行IHA抗体滴度效价检测,比较不同年龄、潜伏期与住院天数之间的相关性.结果 135例病例中IHA检测抗体滴度均>1:320,其中滴度1:640、1:1280、1:2560、1:5120、1:10240分别占1.48%、28.15%、35.56%、20.00%、14.81%.急性感染病例的平均年龄47.70±14.58岁,平均潜伏期38.03±4.59 d,平均住院时间15.08±3.79 d.抗体滴度效价与年龄分布无相关性(r=0.109,P>0.05),差异无统计学意义(F=0.64,P>0.05),但与潜伏期呈负相关(r=-0.558,P<0.01)、住院时间呈正相关(r=0.791,P<0.01),各组差异均有统计学意义(F=17.07、64.53,P均<0.01).结论 IHA检测急性血吸虫病例抗体滴度效价均在1:640及以上,抗体滴度效价与年龄大小无相关性,抗体滴度效价高者,血吸虫病潜伏期短、住院时间长.
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日本血吸虫抗体检测试剂盒(间接血凝法)应用效果评价
目的 评价日本血吸虫抗体检测试剂盒(间接血凝法)在实际应用中的效果.方法 采用单盲法,分别检测血吸虫、肺吸虫、肝吸虫、旋毛虫、结核、不明原因发热等病人血清和健康人群血清.结果 检测100份慢性血吸虫病人血清的敏感性为97.0%;检测50份健康人血清的特异性为96.0%;检测20份华支睾吸虫病人血清的交叉反应率为10.0%;检测10份肺吸虫病人血清的交叉反应率为50.0%;检测10份旋毛虫病人血清的交叉反应率为30.0%;检测乙肝、鞭虫、蛔虫、钩虫病人血清均为阴性;检测18份结核病人血清的交叉反应率为16.67%;检测88份不明原因发热病人的交叉反应率为11.36%;检测473份非疫区人群血清的交叉反应率为3.38%;检测1136份传播阻断地区人群血清的交叉反应率为2.29%.结论 日本血吸虫抗体检测试剂盒(间接血凝法)在血吸虫病检测中具有较高的灵敏性和特异性,可用于血吸虫病现场筛查.
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河南省部分地区猪弓形虫感染调查及猪源虫株对小鼠的接种试验
目的 了解河南省部分地区猪弓形虫感染情况和了解猪源弓形虫在小鼠体内产生与致病情况.方法 IHA法、姬姆萨染色法和ELISA方法.结果 在检查的2325份猪血清中,IHA方法查出304份为阳性,阳性率为13.1%;IHA抗体阳性血清抗体样品再以ELISA法检测循环抗原,查出23份为阳性;采集的脏器病料应用姬姆萨染色法检查滋养体,在3个猪群中镜检查到弓形虫滋养体.猪源虫株感染小鼠,第二代感染后第5天检测到IHA抗体,同时可在小鼠腹水内查到滋养体.结论 河南省周口等7个地区猪弓形虫感染颇严重;猪源虫株接种小鼠试验可获成功.
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硫酸铵法提取血吸虫感染兔血清IgG初探
目的：探索硫酸铵法提取血吸虫感染兔血清IgG用于制备阳性参考品的可行性。方法采用饱和硫酸铵溶液对感染兔血清中IgG进行沉淀分离，IHA试剂测定分离前后、冻干前后的抗体滴度以及冻干IgG复溶后的稳定性。结果滴度为1：320的血吸虫感染兔血清经硫酸铵沉淀法提取IgG，经透析、浓缩至原体积后抗体滴度为1：320，粗提IgG以阴性兔血清和蔗糖为冻干保护剂，冻干前、后滴度均为1：160；冻干IgG复溶0d、3d、6d和8d抗体滴度分别为1：160、1：80、1：40和1：40。结论硫酸铵沉淀法提取、冻干IgG不引起滴度改变，冻干保护剂的加入会使抗体滴度下降，冻干IgG复溶3d后滴度出现下降。因此，硫酸铵沉淀法可用于提取血吸虫感染兔血清IgG。
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干滤纸血片用于日本血吸虫病患者抗体检测的现场应用研究
目的评价干滤纸血片用于现场检测日本血吸虫病患者抗体的应用价值.方法现场选取湖北省2个血吸虫病流行区,对6～60岁居民同时采集静脉血分离血清和微量末梢血滤纸血片,均进行IHA与ELISA检测;对两种采样方法成本费用进行比较和居民依从性进行调查.结果在现场同等条件下,两种样本IHA与ELISA阳性检出率均无显著性差异(P＞0.05);采集滤纸血片样本比静脉血清成本低1.2元/人份;受检者对滤纸血片采样法的依从性(52.1%)显著高于静脉抽血(21.3%).结论干滤纸血片法操作简便、快速、费用低,受检者依从性高,适合于现场大规模血吸虫病普查和流行病学调查.
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两种日本血吸虫病检测试剂盒在临床应用中的评价
目的 对胶体染料试纸条试剂盒和间接血凝试剂盒在临床应用中的效果进行评价.方法 用胶体染料试纸条法(DDIA)和间接血凝法(IHA)分别检测来自血吸虫病疫区的门诊疑似病人血清500份,疑似病人同时进行病原学检查,并对结果进行比较分析.结果 500例门诊疑似病人中,41例粪便孵化法检测阳性,阳性率为8.20%.DDIA法灵敏度为97.56%,特异度为81.26%,假阴性率为2.44%,假阳性率为18.74%,一致性符合率为82.60%;IHA法灵敏度为95.12%,特异度为82.35%,假阴性率为4.88%,假阳性率为17.65%,一致性符合率为83.40%.结论 DDIA和IHA法在临床应用中均为血清免疫学检测敏感性、特异性较好的方法,前者更简便、快速.
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2005-2011年石首市马船村血吸虫病疫情监测
目的 掌握石首市血吸虫病疫情动态,为今后制定一村一策防治策略和考核防治效果提供科学依据.方法 根据《全国血吸虫病监测方案》要求,选择东升镇马船村作为国家监测点,2005-2011年连续7年开展血吸虫病疫情监测.结果 人群血吸虫感染率由2005年的1.61％降至2011年的1.03％,下降了36.02％,无急性血吸虫病例发生.耕牛血吸虫感染率由2005年的10.00％降至1.47％,下降85.30％.钉螺面积无变化,活螺平均密度由2005年的0.23只/0.1m2降至0.04只/0.1m2,下降了80.30％,感染性钉螺面积和平均密度由2005年的11万m2和0.00025只/0.1m2降至0.结论 现阶段的防治措施取得了明显的防治效果,但仍应加强综合防治力度.
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血吸虫病门诊患者IHA与ELISA法抗体检测结果
目的 了解临床血吸虫病患者血清抗体检测结果及特点.方法 收集2005-2011年的门诊患者登记资料及IHA、ELISA方法血检结果等进行统计分析.结果 共检测患者5 979人,IHA血清抗体阳性率为7.96％,ELISA血清抗体阳性率为19.95％,双检血清抗体阳性率为7.18％.2008年后患者血清抗体阳性率逐年下降,2011年IHA法血清抗体阳性率为3.98％,ELISA法血清抗体阳性率为16.93％,双检血清抗体阳性率为3.70％,与2008年比较差异均有统计学意义(IHA:x2=51.76,P=0.000; ELISA:x2=36.17,P=0.000；双阳:x2=46.10,P=0.000).10～岁年龄组患者IHA、ELISA法血清抗体阳性率与双检阳性率均高于其他年龄组,差异有统计学意义(P＜0.05).就诊与血检阳性患者以男性为主.结论 血吸虫病门诊患者的血阳率处于近年低水平,但男性与10～岁年龄组患病情况较突出,应引起有关方面的重视及采取针对性的防治措施.
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IHA和DIGFA诊断血吸虫病可靠性分析
目的 分析间接红细胞凝集试验(IHA)和金标免疫法(DIGFA)诊断血吸虫病的可靠性.方法 采集经粪便孵化法确诊且未经治疗的血吸虫病患者血清标本46份和健康人血清42份,分别用IHA和DIGFA进行检测,观察2种方法的敏感度和特异度.IHA法每份血清做1∶5、1∶10、1∶20、1∶40共4个滴度.结果 46份血吸虫病患者血清检测结果:IHA法1∶5、1∶10、1∶20、1∶40滴度检出率分别为91.30％ (42/46)、76.09％(35/46)、65.22％ (30/46)、45.65％ (21/46),DIGFA法检出率为69.57％ (32/46);42份健康人血清检测结果:IHA法1∶5、1∶10、1∶20、1∶40滴度阳性率分别为7.14％ (3/42)、4.76％ (2/42)、0％ (0/42)、0％ (0/42),IHA(1∶5)和IHA (1∶10)特异度分别为92.85％、95.24％,DIGFA的特异度为97.62％ (41/42).结论 IHA和DIGFA检测血吸虫病患者血清阳性率(敏感度)偏低;用IHA和DIGFA诊断血吸虫病可信度较差;IHA的阳性阈值滴度为1∶5阳性检出率较高.
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免疫学方法联合检测血吸虫病的初步研究
目的 了解血吸虫病血清学检测方法的联合应用的效果,为制定防治对策提供科学依据.方法 选择46例慢性血吸虫病患者及42例健康人作为研究对象,采用间接血凝法(IHA)、金标渗滤法(DIGFA)、酶联免疫吸附试验(ELISA)分别检测其抗原和抗体,了解3种方法的敏感性与特异性,以及3种方法不同组合的检出阳性差别.结果 IHA抗体检测敏感性为76.09％,特异性为95.24％;DIGFA抗体检测敏感性为69.57％,特异性为97.62％;ELISA循环抗原检测敏感性为32.61％,特异性为92.86％;任意2种方法阳性联合判定总的敏感性为65.22％,特异性为97.62％;3种方法同时阳性联合判定的敏感性为23.91％,特异性为100％.结论 血吸虫病血清学检测循环抗原敏感性和特异性较差;任意2种方法联合阳性判定总的敏感性与特异性与单独IHA、DIGFA相似,无实际意义;检测抗体的IHA、DIGFA和检测循环抗原的ELISA 3种方法联合阳性判定的敏感性与循环抗原ELISA相似,但特异性高,似与病原学诊断有相仿的意义,可在流行病学调查研究中结合运用.
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新流行区血吸虫病人吡喹酮治后10年抗体水平变化
观察新流行区血吸虫病人治疗后抗体水平动态变化.用COPT、IHA和ELISA检测44例慢性日本血吸虫病人治疗前后抗体水平.吡喹酮治后第6个月,3法检测的抗体水平均有不同程度的下降,但以COPT下降的幅度大;第12个月3法的下降幅度均增大,第18个月未见明显再下降.其中EPG≥16.0的23例患者治后第6个月仅有COPT的阳性率和环沉率(COPR)较治前有显著性差异(P＜0.01).治后第12、18、120个月3法检测的抗体阳性率与COPR或GMRT较治前均有显著性差异(P＜0.01).COPT近期和远期考核疗效的效果均优于IHA和ELISA.
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胶体染料免疫渗滤法与IHA检测血吸虫抗体效果比较
目的探讨一种经济、简便、快速诊断血吸虫病的免疫学检测方法,为基层血防查病服务.方法用CDIFA和IHA两种方法进行个体对比观察,检验CDIFA法检测人血清中抗日本血吸虫抗体特异性.结果 150例中,CDIFA法和IHA法均阳性者25例,均阴性者120例(P＞0.05),差异无显著性.结论 CDIFA法和IHA法检测人血清中抗日本血吸虫抗体具有高度的符合性,并且CDIFA法检测速度快、经济、方便,适合基层大规模查病.
关键词： 胶体染料免疫渗滤法(CDIFA) IHA 血吸虫抗体 特异性 -
LEE阴性STEC分离株IHA基因的筛选、克隆及序列分析
尽管类志贺毒素对于STEC感染的临床及病理表现的产生非常重要,但细菌的一些毒性因子,特别是与肠道定居和粘附相关的因子也是病变产生的关键性决定因子.我们通过Southern杂交、克隆、打点杂交和序列测定等方法,获得了LEE阴性STEC O113:H7分离株98NK2染色体上大小为5.2kb的Hind III酶切片段的完全DNA序列,其中包含的一个大小为2088bp的开放阅读框架IhaO113(IrgA homologue adhesin)与LEE阳性STEC O157:H21分离株染色体上的一个假定粘附素IhaO157的核酸序列具有93%的一致性,两者的推导氨基酸序列具有91%的一致性.本研究首次报道了LEE阴性STEC O113:H7分离株染色体上预期与细菌粘附相关的编码基因Iha的完全DNA序列,为进一步研究其致病的分子机制提供了重要的理论依据.
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人破伤风类毒素免疫血浆筛选试验中两种抗体检测方法的比较
应用酶联免疫法(ELISA)和间接血凝法(IHA)对1014份破伤风类毒素全程免疫后人血浆进行抗体水平检测,比较两者的收浆率、收浆符合率以及与动物实验的相关性.结果表明两者收浆率均达80%.ELISA法与IHA法的合格浆符合率达92%,与动物实验的相关性更好.ELISA法操作简便快速,结果判读客观明确,优于传统的IHA法,可作为人破伤风类毒素免疫血浆筛选的常规方法.
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2003年云南省盈江县猫血清鼠疫F1抗体检测结果分析
目的探讨猫在云南家鼠鼠疫自然疫源地的宿主地位.方法应用改进的微量法鼠疫间接血凝试验(IHA),对2003年采自云南省盈江县的216份猫血清进行检测.结果从4份被检猫血清中检出鼠疫F1抗体,阳性率为1.87%.阳性血清抗体滴度分布1∶ 203份,1∶ 1601份,有2份血清呈现出低滴度抗原抗体反应(1∶ 10).结论首次证实猫在云南家鼠鼠疫自然疫源地的偶然宿主作用,并且认为猫可作为该疫源地鼠疫监测的指示动物,其流行病学意义有待进一步探讨研究.
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甘肃省张掖地区鼠疫动物病监测中有关问题的讨论
在鼠疫动物病监测过程中,特别是旱獭鼠疫监测中,在基层鼠疫监测时,应该以流动鼠疫监测为目的,尽可能的扩大监测范围,大量探取旱獭洞干蚤,寻找以旱獭为主的自毙动物,为鼠疫细菌学检验提供材料.在鼠疫血清学方面应该加大犬血清的采集范围,以求完成血清IHA的检验指标,这些才能使旱獭鼠疫监测更加趋于完善.
