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三七皂甙Rb1对急性呼吸衰竭大鼠的影响及作用机制的研究
目的 探讨三七皂甙Rb1对急性呼吸衰竭大鼠肺脏线粒体功能的影响及作用机制.方法 将Wistar大鼠随机分为4组,分别为对照组、呼吸衰竭模型组、Rb1治疗1组(低剂量组5 mg/kg)、Rb1治疗2组(高剂量组10 mg/kg),每组10只.采用舌静脉注射内毒素脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)复制大鼠急性呼吸衰竭模型,于大鼠急性呼吸衰竭3小时后,迅速取出大鼠肺脏,低温差速离心法提取肺脏组织线粒体,用荧光偏振法检测肺脏线粒体膜的流动性和膜的微粘度.用RT-PCR测定细胞色素氧化酶ⅡmRNA表达的变化,用[3H]油酸标记的大肠杆菌作为底物,测定呼吸衰竭大鼠分泌性磷脂酶A2活性的变化.结果 大鼠呼吸衰竭肺脏线粒体膜的流动性下降,呼吸衰竭组线粒体膜细胞色素氧化酶Ⅱ基因表达增强,2小时达高峰.分泌型磷脂酶A2活性1小时增强,5小时达高峰,三七皂甙Rb1低剂量组(5 mg/kg)可使线粒体膜流动性下降,细胞色素氧化酶ⅡmRNA表达增强,三七皂甙Rb1高剂量组(10 mg/kg)与模型组相比有统计学意义(P＜0.01).结论 三七皂甙Rb1对呼吸衰竭有保护作用(P＜0.05),其中高剂量组对呼吸衰竭大鼠有显著的保护作用(P＜0.01).
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酒精对小鼠NIT-1细胞胰岛素分泌及COX Ⅱ基因表达的影响
目的:观察酒精对小鼠NIT-1细胞胰岛素分泌功能的影响并初步探讨其机制.方法:体外培养的小鼠NIT-1细胞,经不同浓度酒精(0、50、100、200、400 mmol/L)作用6、12、24 h后,用放免法测定NIT-1细胞分泌胰岛素情况,半定量RT-PCR方法检测细胞色素氧化酶Ⅱ(cytochrome oxidaseⅡ,COXⅡ)基因mRNA的表达.结果:酒精作用6 h,NIT-1细胞葡萄糖刺激的胰岛素分泌增加;作用12 h、24 h,葡萄糖刺激的胰岛素分泌降低.酒精作用6 h,COXⅡmRNA表达升高,12 h表达开始降低,24 h时高浓度组表达呈显著性降低.结论:酒精可增加或降低NIT-1细胞胰岛素分泌,与酒精作用时间、浓度有关.酒精导致COXⅡmRNA表达水平的改变很可能是酒精影响NIT-1细胞胰岛素分泌的机制之一.
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幽门螺杆菌对食管癌细胞凋亡及表达COXⅡ、Bax、Caspase-3的影响
目的:观察幽门螺杆菌(H.pylori,HP)作用于食管癌细胞(ECa-109)后细胞凋亡的情况以及细胞色素氧化酶Ⅱ(eytochrome oxidaseⅡ,COXⅡ)、Bax、Caspase-3 mRNA及其蛋白表达的变化,探讨H.pylori致癌的分子机制.方法:将H.pylori与ECa-109分别作用4、8、24h,收集各组细胞,流式细胞术(FACS)检测凋亡情况;Real-Time PCR和Western blot法检测各时间点COXⅡ、Bax、Caspase-3 mRNA及其蛋白表达.结果:随着共培养时间的延长,COXⅡmRNA和蛋白的表达逐渐下降,而Bax、Caspase-3 mRNA和蛋白的表达逐渐上升,ECa-109凋亡增加.结论:H.pylori可抑制食管癌细胞线粒体编码基因COXⅡmRNA的表达,从而影响线粒体功能;H.pylori在体外可通过线粒体途径上调Bax、Caspase-3表达,从而诱导ECa-109凋亡.
