首页 > 文献资料
-
一起诺沃克病毒引起的急性胃肠炎爆发的分子流行病学研究
目的 查明2005年深圳市一起急性胃肠炎的病原体,为制定控制疾病流行策略及指导临床合理用药提供依据.方法 收集该次腹泻患者及相关人员的粪便标本15份,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和实时荧光PCR方法检测诺沃克病毒核糖核酸(RNA).结果 15份标本中,RT-PCR及实时荧光PCR方法均检测出10例诺沃克病毒阳性,阳性率为56.7%;2种方法的符合率为100%.同时对其中的10份RT-PCR阳性标本进行脱氧核糖核酸(DNA)序列测定,并进行同源性分析和进化分析.结论 该次群体性胃肠炎是由诺沃克病毒G2型感染引起;10份阳性标本中9株的核苷酸同源性为100%,另外1株与其他9株的同源性为99.8%;本次流行的毒株(05-53-61及05-63)与日本东京的SaitamaU201及SaitamaU18亲缘关系较近,核苷酸同源性分别为96%及95%,而与1997年深圳本地株97-11及97-30亲缘关系则较远,核苷酸同源性分别为76.4%及76.7%.
关键词： 诺沃克病毒 胃肠炎 逆转录-聚合酶链反应 荧光逆转录-聚合酶链反应 同源性分析 -
诺沃克病毒流行现状及预防措施
诺沃克病毒是一种分布很广泛的,可导致成人和儿童的急性腹泻的病毒,是除轮状病毒外引起腹泻的主要的病毒病原,与食物、水源等的污染造成的急性胃肠炎爆发密切相关.为此,就诺沃克病毒的病原学、流行病学、临床表现、诊断治疗和预防等方面做一综述.
-
蔬菜及水果中NLVs和HAV检测的研究
目的 建立蔬菜水果中诺沃克样病毒(NLVs)和甲肝病毒(HAV)的RT-PCR检测方法.方法 使用具有较强缓冲力的甘氨酸缓冲液将病毒从试样表面洗脱下来,用PEG6000将病毒沉降后进行RNA提取和RT-PCR检测.结果 蔬菜中NLVs和HAV检测的灵敏度可达1.0×103 RT-PCRU50/30 g试样和30 TCID50/30 g试样.而草莓样品的NLVs和HAV低检出限为1.7×103 RT-PCRU50/100 g试样和48 TCID50/100 g试样.结论 该方法灵敏、可靠.
-
广州市一起群体性诺沃克病毒性胃肠炎调查分析
诺沃克病毒的感染是成人和大龄儿童流行性非细菌性肠炎的主要病因,但由于检验方法尚不普及,临床上确诊的较为少见.2003年10月广州市越秀区某小学学生出现呕吐、腹痛、腹泻、发热等症状,人数达82人(其中1名老师),经广州市、越秀区疾病预防控制中心反复多次详细的现场调查,并在广东省疾病预防控制中心的技术支持下,利用RT-PCR方法在病人粪便标本中检测到诺沃克类病毒.首次在广州市证实该事件的病因是诺沃克类病毒引起的急性胃肠炎.
-
诺沃克类病毒
诺沃克类病毒是引起急性非细菌性胃肠炎暴发的病原之一,常通过污染的食物和水而传播.通过分子生物学技术能够从大便标本中检出该病毒.诺沃克类病毒也称为小圆结构病毒,并归类为杯状病毒成员.可分为两个不同的基因组,基因Ⅰ组(GⅠ)和基因Ⅱ组(GⅡ).诺沃克类病毒多在餐厅、护理中心、医院、学校、旅游等地爆发流行.
-
用RT-PCR和实时荧光RT-PCR检测诺沃克病毒的比较分析
目的:研究用不同方法检测诺沃克病毒核酸的阳性率关系,为进一步完善诺沃克病毒核酸的实验室检测提供依据.方法:采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)及实时荧光逆转录聚合酶链反应(real-time RT-PCR)两种方法,对124例腹泻标本进行诺沃克病毒核酸的检测.结果:124份标本中,RT-PCR检出诺沃克病毒阳性31例,阳性率为25%;实时RT-PCR检出阳性37例,阳性率为29.84%;两种方法均阳性的28例,均阴性的84例,符合率为90%;不同性别阳性率无显著性差异;采用实时RT-PCR检测诺沃克病毒,敏感性较RT-PCR高,但两种方法的阳性率无统计学差异.对于强阳性样本(Ct值在20以内或电泳结果特异性条带很亮),两种方法检出率均为100%;对于弱阳性样本,则大部份标本实时RT-PCR检出阳性而RT-PCR未能检出,少部份标本RT-PCR检出阳性而荧光RT-PCR未能检出.结论:对于诺沃克病毒的实验室检测方法,首选实时RT-PCR;在可能的情况下,应该RT-PCR和实时RT-PCR两种方法联用进行检测,以避免发生弱阳性样本漏诊的情况.
关键词： 诺沃克病毒 急性胃肠炎 逆转录聚合酶链反应 实时荧光逆转录聚合酶链反应 -
2004～2005年深圳市婴幼儿腹泻中轮状病毒及诺沃克病毒的感染分析
目的:了解深圳市婴幼儿腹泻中轮状病毒和诺沃克病毒的感染情况,为腹泻病的防治提供依据.方法:采集2004年10月～2005年2月深圳市腹泻患儿粪便244份,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法分别检测轮状病毒和诺沃克病毒.结果:轮状病毒感染率为34.84%(85/244),其中男性感染率为37.41%,女性感染率为30.93%;诺沃克病毒感染率为12.70%(31/244),其中男性感染率为15.65%,女性感染率为8.24%;轮状病毒和诺沃克病毒的感染率有显著性差异;4例患儿为轮状病毒和诺沃克病毒混合感染,占1.64%;2岁以内儿童HRV及NLV分别占79.38%和80.04%.结论:轮状病毒是深圳市婴幼儿秋冬季腹泻主要的病原体,诺沃克病毒也是引起婴幼儿散发性腹泻的主要病原,仅次于轮状病毒排第二位,且存在着轮状病毒和诺沃克病毒混合感染的病例,2岁以内儿童是HRV及NLV感染的高危人群,应加强对腹泻儿童轮状病毒及诺沃克病毒的监测.
关键词： 婴幼儿 腹泻 轮状病毒 诺沃克病毒 逆转录-聚合酶链反应 -
诺沃克病毒合并金黄色葡萄球菌引发某小学食物中毒的调查
目的查找某小学82名师生出现以呕吐、腹痛、腹泻和发热为主要症状的群发性疾病的原因.方法用流行病学疾病暴发调查方法,结合逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)、DNA序列测定和食物中毒常规致病菌检测方法检测可疑食品、病人呕吐物及粪便.结果82名患者都有在学校食堂食用早餐或午餐的共同进餐史;在12名患者的粪便中检出诺沃克病毒阳性11份,对其中5份进行诺沃克病毒核酸序列测定,结果4份呈阳性;2份患者的呕吐物和1份厨工肛拭子检出金黄色葡萄球菌,肠毒素试验皆呈强阳性.结论本次食物中毒可能由诺沃克病毒和金黄色葡萄球菌共同引起.
-
2013～2014年深圳市腹泻疾病的病原学分析研究
目的分析北京大学深圳医院2013～2014年门急诊腹泻患者肠道病原菌的分布情况，为临床诊断和治疗提供参考依据；同时了解沙门菌检测方法改进的成效。方法2013～2014年间，在北京大学深圳医院门急诊采集了1719名腹泻患者的粪便标本，进行致泻性大肠埃希菌、沙门菌、志贺菌、弧菌的分离培养、鉴定和血清分型；对其中451份水样便标本进行轮状病毒、诺沃克病毒、星状病毒和肠道腺病毒的荧光PCR检测。沙门菌检测由标本直接接种改为用增加亚硒酸盐胱氨酸增菌液（SC）增菌培养，分析两种方法检出率的统计学差异。结果在1719份粪便标本中，共检出肠道病原菌143株[阳性率为8.3％（143／1719）]，其中沙门菌76株，占53.1％（76／143）；致泻性大肠埃希菌46株，占32.2％（46／143），包括肠产毒性大肠埃希菌（ETEC）25株、肠致病性大肠埃希菌（EPEC）12株、肠黏附性大肠埃希菌（EAEC）8株和肠侵袭性大肠埃希菌（EIEC）1株；副溶血弧菌19株，占13.3％（19／143）；志贺菌2株，占1.4％（2／143）。检测到两种病原菌（沙门菌＋EPEC）混合感染病例一例。在451份水样便标本中，有189份检出一种或两种肠道病毒，阳性率为41.9％（189／451），其中诺沃克病毒91份，占48.1％（91／189），轮状病毒79份，占41.8％（79／189），星状病毒10份，占5.3％（10／189）和肠道腺病毒9份，占4.8％（9／189）。有4份标本同时检出轮状病毒和诺沃克病毒，有1份标本同时检出星状病毒和诺沃克病毒；检出致病菌和病毒混合感染10例。沙门菌检测方法改进后阳性率由0.6％（17／2627）提高到4.4％（76／1719），χ2＝67.2，P＜0.01，差异具有统计学意义。结论腹泻病原微生物类型复杂多样，临床应重视和加强腹泻病原微生物的常规检验，改进检测方法，降低漏检率，对完善当前腹泻病的病因诊断和治疗有重要参考意义。
-
贝类产品中诺沃克病毒的实时荧光RT-PCR检测方法研究
诺沃克病毒是一种分布很广泛的肠道腹泻病毒,主要存在于牡蛎、文蛤等贝类中.本研究建立了从贝类中提取诺沃克病毒RNA的方法以及进行实时荧光RT-PCR检测的方法.
-
贝类产品中诺沃克病毒RT-PCR检测方法
本文建立了贝类产品中诺沃克病毒检测的普通RT-PCR方法.用8对引物对诺沃克病毒进行检测研究,发现GII-SKF/GII-SKR引物检测GII型病毒特异性强且灵敏度高.用引物GI-SKF/GI-SKR和GII-SKF/GII-SKR分别对系列稀释度的质粒进行检测,检测灵敏度均能达到102拷贝.将诺沃克病毒添加于牡蛎肠胃组织中并提取RNA,并用引物GI-SKF/GI-SKR 和GII-SKF/GII-SKR对其进行扩增,检出GII型诺沃克病毒.
