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环境内分泌干扰物研究的进展
20世纪90年代以来,环境化学物的内分泌干扰效应引起了学术界和公众的极大关注.大量的流行病学资料表明,许多环境化学物质能模拟或干扰动物体的内分泌机能,与人类生殖障碍、发育异常及某些癌症(如乳腺癌、睾丸癌、卵巢癌等)相关,临床上以生殖障碍、出生缺陷、发育异常、代谢紊乱及某些癌症为特征.从已确认的环境内分泌干扰物的使用情况推测,环境内分泌干扰化学物的污染具有全球性.笔者拟就这类物质的定义、分类、特点、作用机制及甄别方法等加以简单介绍.
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环境内分泌干扰化学物的甄别方法和评价体系
环境内分泌干扰化学物(environmentalendocrine disrupting chemicals,EEDCs)对人类和野生动物健康的危害已是不争的事实.
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内分泌干扰物的毒理学研究进展
90年代以来国内外学者陆续发现,许多环境化学污染物具有类似激素作用,干扰动物体内的内分泌功能.这些物质被称为环境荷尔蒙(environmental hormone)或称为环境内分泌干扰化学物(environmental endocrine disrupting chemicals,EEDCs),简称为内分泌干扰物(endocrine disruptors,EDCs).
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甲状腺激素受体介导的荧光素酶报告基因试验筛查内分泌干扰化学物
目的 采用人源性甲状腺激素受体(TRα/β)的荧光素酶报告基因试验系统筛查内分泌干扰化学物(EDCs),评估双酚A(BPA)、甲萘威和1-萘酚(1-NAP)的拟/抗甲状腺激素活性.方法 以恒河猴肾细胞(LLC-MK2)作为转染细胞,通过瞬时转染的方法分别构建基于pGL3-promega和pGL4.27的TRα/β的报告基因试验.用三碘甲状腺氨酸(T3)、甲状腺氨酸(T4)作为阳性受试物评价两个检测系统的灵敏性,并检测BPA、甲萘威和1-NAP的拟/抗甲状腺激素活性.结果 基于pGL3-promega的TRβ的报告基因试验,T3的低检测限为1.216×10-n mol/L,在7.482×10-6 mol/L时诱导荧光素酶(Luc)的表达倍数是对照组的5.98倍,半数有效浓度(EC50)为3.327×10-8 mol/L;T4低检测限为1.622×10-8 mol/L,大诱导Luc表达的倍数为3.4倍,EC50为2.213×10-7 mol/L.基于pGL4.27的TRβ的报告基因试验中,T3的低检测限为9.863×10-12 mol/L,在1.671×10-6 mol/L时产生大诱导Luc表达的倍数为对照组的8.57倍,EC50为3.327×10-8 mol/L;T4低检测限为1.349×10-9 mol/L,大诱导Luc表达的倍数是4.6倍,EC50为4.074×10-7 mol/L.用TRβ的报告基因试验系统评价BPA、甲萘威和1-NAP都无甲状腺受体激动剂活性,甲萘威和1-NAP有一定受体拮抗性.结论 本研究建立的基于pGL3-promega和pGL4.27的TRβ的报告基因试验都有较高的灵敏性,pGL4.27相对更高,可以用来筛查内分泌干扰化学物,检测化学物质的拟/抗甲状腺激素活性.