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食品中李斯特菌污染状况研究
目的 了解冷藏冷冻食品中李斯特菌污染状况.方法 采用PCR方法对样品中的李斯特菌进行初筛,阳性样品用国标法确证,对6类冷藏冷冻食品共3 586份样品进行了李斯特菌带菌状况调查.结果 珠海地区李斯特菌污染较为普遍,且存在着多重污染现象,生鲜奶、生肉禽类、蔬菜类样品不仅带李斯特菌率高,且带单增李斯特菌率高.结论 应加强冷冻食品的李斯特菌监测与管理.
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上海市市售带壳牡蛎微生物污染状况调查
目的 了解上海市市售带壳牡蛎的微生物污染状况.方法 2005年4月至2006年3月在上海市水产品批发市场每月2次采集牡蛎样品,共抽取了24份.按照GB/T 4789-2003《食品卫生微生物学检验》中检验规程进行微生物检测.结果 所有抽检样品均不合格,污染严重的是大肠菌群,所检样品均超标,高污染量达1.4×106 MPN/g;其次是菌落总数,超标率达41.7%,高污染量达2.6×107 CFU/g;副溶血性弧菌污染也比较严重,检出率达29.2%,污染量在3.0×102～7.4×102 MPN/100 g;单核细胞增生李斯特菌未检出.结论 上海市市售带壳牡蛎的微生物污染状况不容乐观,已对消费者健康构成了潜在威胁.
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单核细胞增生性李斯特菌毒力基因检测及DNA随机扩增多态性分型
为了解在昌平地区分离的单核细胞增生性李斯特菌(Lm)携带毒力基因的状况和DNA随机扩增多态性(RAPD)分型情况,采用聚合酶链反应(PCR)对28株Lm进行了溶血素基因(hly)、与侵袭性有关的iap和prfA基因的测定及RAPD分型.结果3个毒力基因PCR全部呈阳性反应,两株无害Lm为阴性反应.用RAPD分型,28株Lm分为12型,A、B两型共9株菌全部来自某肉联厂;C、D两型共10株来自某肉鸡公司;另外9株Lm有8个RAPD型,分男来自熟肉制品及零售市场.此次实验发现昌平地区在不同时间、不同地点分离的Lm其RAPD型别变化较大,有多种型别的细菌存在.根据RAPD分型看出肉联厂与肉鸡公司可能存在着内部污染问题.
关键词： 利斯特氏菌 单核细胞增生 聚合酶链反应 随机扩增多态DNA技术 毒力 -
食品中单核增生性李斯特菌的PCR快速检测研究
为提高食品中单增李斯特菌的检测水平,针对单增李斯特菌中多个稳定的特异性基因hlyA、plcB、prfA、iap,设计并筛选出7对引物组成多重-巢式PCR联合检测体系,并结合高灵敏性的聚丙烯酰胺凝胶电泳,对单增李斯特菌进行快速检测,多重PCR的灵敏度达到1×102CFU/ml,巢式PCR的灵敏度达到1×10 CFU/ml.结果表明该检测体系具有快速可靠、灵敏准确及特异性好的特点,而且有效缩短了检验周期,从传统的7～14 d缩短到1～2 d.
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六类食品中致病性细菌检测
为了解昌平区细菌对食品污染的特点,2004年采集6类305件食品,按照GB/T 4789-2003食品微生物检验标准进行沙门菌、金黄色葡萄球菌、副溶血性弧菌、单核细胞增生性李斯特菌、O157:H7大肠杆菌5种致病菌检测.菌株鉴定应用API细菌鉴定系统,肠毒素检测用minVIDAS测试系统,单核细胞增生性李斯特菌毒力基因测定采用聚合酶链反应(PCR).金黄色葡萄球菌检出率为16.07%,其中生肉、生牛奶、生食水产品检出率比较高,分别为25%、16.98%、27.27%;散装熟肉制品、乳制品也有检出,分别为4.29%、5%.在检出的49株金黄色葡萄球菌菌株中有31株产生肠毒素,占63.26%,其中生、熟肉类肠毒素阳性25株;从奶类、生食水产品中各检出3株.单核细胞增生性李斯特菌检出34株,检出率为11.15%,其中生肉检出率高达20%,其次为散装熟肉制品(8.57%);另外从淡水鱼中检出4株单核细胞增生性李斯特菌.28株单核细胞增生性李斯特菌毒力基因(hly、iap 、prfA)检测全部阳性.生肉中检出一株肠炎沙门菌.未检出O157:H7大肠杆菌、副溶血性弧菌.昌平地区金黄色葡萄球菌和单核细胞增生李斯特菌对食物的污染比较严重,生食品与加工后食品的检出率差异有显著性.
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湖北省食品中李斯特氏菌污染现状分析
为掌握湖北省李斯特氏菌污染现状,用检验李斯特氏菌的国家标准检测方法和API Listeria快速反应板,对全省具有代表性的武汉、孝感、十堰、鄂州、荆门、襄樊6个地区的6类561份食品进行了李斯特氏菌污染检测.结果表明:李斯特氏菌的检出率为4.1%,集中在生肉和熟肉制品中,分别为11.4%和6.7%,检出菌株中,致病菌单核细胞增生性李斯特氏菌占26.1%.结果表明湖北省的食品存在李斯特氏菌污染,应加强监督监制.
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单核细胞增生李斯特菌的毒力因子
目的 单核细胞增生李斯特菌(Listeria monocytogenes,Lm)属于革兰阳性无芽孢杆菌李斯特菌属,主要通过食物传播.Lm的致病性与毒力因子密切相关,研究其毒力因子对认识致病机理有着重要意义.方法 对Lm重要的毒力因子(溶血素、磷脂酶、内化素、肌动蛋白、P60蛋白等)进行综述.结果 溶血素是一个多功能的毒力因子,对于Lm逃离吞噬细胞囊是必需的.Lm能产生两种磷脂酶C:磷脂酰肌醇磷脂酶C和磷脂酰胆碱磷脂酶C,协助细菌的细胞内复制.肌动蛋白使得Lm在宿主细胞间能够扩散.内化素与Lm的侵袭力有关.P60蛋白是Lm的主要免疫原性抗原.结论 Lm毒力因子研究的深入对李斯特菌病的防治将带来深远的影响.
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山东省7类食品利斯特氏菌污染状况调查
为调查我省利斯特氏菌对食品的污染状况,我们调查了7类食品315份试样,采用GB 4789.30-94检验方法,检出利斯特氏菌9株,检出率2.9%,其中生肉和蔬菜检出率高,为7.1%和6.2%.检出的9株菌经鉴定均为无害利斯特氏菌,虽未检出单核细胞增生利斯特氏菌,但也说明了利斯特氏菌污染食品的程度,为预防该菌引起的食物中毒提供了参考依据.
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熟肉制品和蔬菜沙拉中单核细胞增生李斯特菌的风险分级评估
估模型中对某些风险因素的选择可知,如在加工后采取必要的措施,两种产品组合的风险均可降低10倍.结论 熟肉制品是发生李斯特菌病的高危食品.
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多重聚合酶链反应鉴别单核细胞增生李斯特菌的研究
目的建立一种快速有效地鉴定李斯特菌属和鉴别单核细胞增生李斯特菌(Lm)的方法. 方法以具有李斯特菌种、属特异性的iap基因和Lm特异的溶血素基因(hlyA)为靶目标,分别设计双重聚合酶链反应(PCR)和三重PCR鉴别李斯特菌,并比较2种PCR方法的特异性. 结果双重和三重PCR方法检测李斯特菌属和Lm标准株,均具有良好的特异性:进行三重PCR检测,可出现3个条带,其中2条为Lm的特征性条带(700,420 bp),另1条为其他李斯特菌的iap基因片段(1 200 bp),但是双重PCR不能鉴别部分Lm食品分离株,而三重PCR则可以鉴别. 结论建立的三重PCR法可用于李斯特菌属细菌特异性鉴定和混合培养物中Lm的特异性鉴别.
