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浅谈在实时荧光定量PCR检测过程中操作者应注意的几个问题
实时荧光定量聚合酶反应(FQ-PCR)是一种高度灵敏的核酸检测(NAT)技术,它采用实时检测技术,连续不断的检测PCR过程中反应体系对荧光信号的变化,利用荧光信号达到了某一阈值时的循环次数与起始模板DNA量的对数值之间的严格的线性关系,进行起始模板定量,可真实反应病毒的复制情况,具有特异性强、敏感性高、精确性好的优点.它同时采用完全闭管检测有效地减少实验过程中产生的交叉污染,在疾病的诊断、治疗、疗效的观察中具有十分重要的意义.
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探讨实时荧光定量PCR检测过程应注意的几个问题
实时荧光定量聚合酶反应(FQ-PCR)是一种高度灵敏的核酸检测(NAT)技术,它采用实时检测技术,连续不断的检测PCR过程中反应体系对荧光信号的变化,利用荧光信号达到了某一阈值时的循环次数与起始模板DNA量的对数值之间的严格的线性关系,进行起始模板定量,可真实反应病毒的复制情况,具有特异性强、敏感性高、精确性好的优点.它同时采用完全闭管检测有效地减少实验过程中产生的交叉污染,在疾病的诊断、治疗、疗效的观察中具有十分重要的意义.但由于它高度的敏感性,又导致了PCR技术不可忽视的弱点--结果的准确性.以下就影响此问题的几个注意事项,浅谈一下自己的观点,供同行参考有不足之处请见谅.
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丙型肝炎患者外周血的单核细胞数量和干扰素治疗效果的相关研究
丙型肝炎病毒(HCV)感染是我国肝病的重要致病原因之一,聚乙二醇干扰素是目前治疗丙型肝炎的较为理想的抗病毒药物.我们采用细胞分类计数方法和采用实时荧光定量聚合酶反应(FQ-PCR)方法检测了50例接受干扰素治疗的慢性丙型肝炎患者外周血单核细胞数量和外周血单核细胞的HCV RNA含量并与相关性因素比较.