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年龄相关分子c-kit、HIWI和波形蛋白在不同月龄大鼠睾丸和附睾中的表达
目的:检查c-kit、HIWI和波形蛋白在不同月龄大鼠睾丸和附睾组织中的表达差异,研究睾丸和附睾在成熟和衰老过程中特征性分子表达的规律性改变,为研究男性生殖系统衰老提供实验依据.方法:运用免疫组织化学方法检查6、12、24月龄SD大鼠睾丸和附睾组织中c-kit、HIWI和波形蛋白抗体免疫反应强度,并对其进行比较分析.结果:c-kit特异性免疫反应阳性主要表达于精原细胞,其他细胞表达水平甚弱,不同月龄差异不显著.附睾上皮、附睾管腔内成分亦有c-kit阳性表达.HIWI在大鼠睾丸和附睾组织中表达也很丰富,6月龄和12月龄大鼠中各级生精细胞,尤其是精原细胞和初级精母细胞为免疫反应强阳性细胞;支持细胞、间质细胞、类肌细胞和血管内皮细胞亦为HIWI阳性细胞.附睾上皮有HIWI阳性表达.但是24月龄大鼠睾丸和附睾组织中HIWI表达下调.波形蛋白在睾丸和附睾组织中表达模式为6月龄大鼠睾丸和附睾组织中低表达,24月龄大鼠睾丸和附睾组织表达明显上调(P＜0.01).结论:c-kit、HIWI在24月龄动物睾丸和附睾组织中表达下调,波形蛋白表达随增龄而明显增强.结果提示,睾丸和附睾组织的衰老与细胞和细胞信号转导异常密切相关.
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人脑胶质瘤中HIWI的表达及其意义
目的 探讨HIWI在人脑胶质瘤中的表达及其与病理分级的相关性.方法 收集具有病理明确分级的WHO Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ级胶质瘤组织各10例,另取12例正常脑组织(来源于脑外伤行内减压术患者)作正常对照,用免疫组织化学染色、RT-PCR及Western blot检测HIWI在正常脑组织及各级胶质瘤组织中的表达水平.结果 在胶质瘤组织中HIWI表达增高,与胶质瘤恶性程度呈正相关,且在Ⅲ、Ⅳ级胶质瘤中表达水平显著强于Ⅰ、Ⅱ级胶质瘤.结论 HIWI在胶质瘤组织中高表达,可能与胶质瘤的发生、发展密切相关.
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HIWI在食管癌细胞系Eca-109中的表达及意义
目的 检测干细胞基因HIWI在食管癌细胞系Eca-109中的表达及其对细胞增殖的影响.方法 通过细胞免疫荧光检测食管癌细胞系Eca-109中HIWI蛋白的表达；应用LipofectamineTM 2000将HIWI特异的siRNA转染进细胞中,再通过RT-PCR检测siRNA的沉默效率；通过MTT检测转染后各转染组细胞的生长曲线,观察HIWI对食管癌细胞增殖的影响.结果 HIWI蛋白在食管癌细胞系Eca-109中高表达,且细胞之间存在差异；HIWI特异的siRNA沉默效率可高达80％左右；转染测得HIWI特异siRNA组较各对照组细胞的增殖速度减慢并有统计学意义.结论 HIWI在食管癌细胞系Eca-109中高表达,细胞中存在食管癌干细胞；降低HIWI的表达后能够减慢食管癌细胞的增殖速度.
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靶向Hiwi基因的RNAi对乳腺癌细胞增殖和凋亡的影响
目的:研究靶向Hiwi基因的siRNA对乳腺癌细胞增殖的影响.方法:将靶向Hiwi基因的siRNA导入乳腺癌细胞,培养并转染MCF-7细胞,运用qRT-PCR、Western-Blot进行干扰效果的检测并使用CCK-8法检测干扰后MCF-7细胞的增殖和凋亡情况.结果:干扰后48 h和72 h的MCF-7细胞无明显生长抑制作用(P＞0.05),而干扰后24 h的Hiwi-647组细胞的生长抑制作用明显高于其他组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论:靶向Hiwi基因的siRNA干扰乳腺癌细胞MCF-7后,MCF-7细胞增殖受到抑制,提示Hiwi是乳腺癌基因治疗的潜在靶点.
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Hiwi在乳腺癌组织中的表达及其临床意义
目的：研究Hiwi在乳腺癌组织中的表达及其临床意义。方法：应用免疫组化方法分别检测乳腺癌和癌旁组织中Hiwi蛋白的表达。结果：Hiwi蛋白主要在乳腺癌和癌旁组织细胞胞浆中表达。乳腺癌组织中Hiwi的阳性表达率明显高于癌旁组织（P＜0．01）；乳腺癌组织中Hiwi的表达与临床分期、Ki67相关（P＜0．05），而与患者绝经状态、年龄、ER、PR及Her-2等无关（P＞0．05）。结论：乳腺癌组织中Hiwi的高表达，提示Hiwi可能与乳腺癌的发生、发展有关。而Hiwi的表达与乳腺癌的临床分期和Ki67相关，说明Hiwi可能是影响乳腺癌预后的重要因素。
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Piwi家族与乳腺癌的研究进展
Piwi家族归属于Argonaute(AGO)家族蛋白亚科成员,在干细胞自我更新、基因缄默及各种生物的转录调控中表现出重要作用.近年来,研讨发现Piwi与乳腺癌(Breast cancer,BC)发病机理密切相关,其中乳腺癌中PIWI家族蛋白的异常表达是piRNA的生物合成和功能要求.靶向Piwi基因沉默有可能成为一种治疗BC的潜在有效方法.本文从Piwi家族在BC中的内在发病机制和治疗手段来系统综述,并提供BC防治策略的参考.
