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兔VX2膀胱癌移植瘤模型实验研究
目的 通过模拟原位膀胱癌发生机制构建兔VX2膀胱癌移植瘤动物模型,研究其生物学特性及影像学表现.方法 采用同轴法穿刺接种VX2细胞株于25只新西兰大白兔膀胱,接种术后14、21、28 d分别作CT平扫及增强扫描,评估肿瘤种植及生长情况.取兔膀胱组织标本作大体解剖学及组织病理学检查,同时观察腹腔淋巴结及肝肺转移情况.结果 22只实验兔建模成功,植瘤成瘤率为88.0％(22/25).植瘤后14、21、28 d瘤体平均长径分别为(1.38±0.20) mm、(2.30±0.08) mm、(3.22±0.24) mm,且瘤体变化差异有显著统计学意义(P＜0.01).VX2移植瘤CT表现为膀胱壁局部不规则增厚或肿块突起,呈均匀强化(14 d)或环型强化(21、28 d),肿瘤腔内呈不同程度充盈缺损.种植瘤大体形态及其影像学特征基本相符,组织病理学表现为血管丰富的低分化鳞状细胞癌,呈浸润性生长,21 d后瘤体中心出现坏死,21、28 d出现肝、肺及腹腔淋巴结转移.结论 本研究成功构建兔VX2膀胱移植瘤模型,基本反映了膀胱癌发生与发展过程,适合CT动态观察及实验研究.
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植入性门静脉主干癌栓兔模型建立及评估
目的：探讨建立稳定的门静脉主干癌栓(MPVTT)动物模型并作客观评估,为进一步临床治疗研究提供基础。方法24只新西兰大白兔随机分成对照组(A组,n=10)和实验组(B组,n=14)。实验组在门静脉主干前壁缝一荷包,将瘤条经荷包中央注入门静脉腔内,并通过预留缝线悬挂固定在门静脉主干内壁；对照组开腹后仅在门静脉主干前壁作荷包缝合。术后观察动物一般情况、体重及生存时间。术后每周行多排螺旋CT检查,观察门静脉癌栓(PVTT)生长及转移。分阶段处死两组部分实验兔作病理检查,观察PVTT体积和转移情况。剩余兔观察生存时间。结果实验组门静脉主干成瘤率达100％。实验组(B9~14号兔)及对照组术后第35天平均体重分别为(1.48±0.19) kg和(2.08±0.17) kg,实验组(B9~14号兔)平均生存时间为(41.7±4.72) d。多排螺旋CT显示PVTT及门静脉阻塞后侧支循环和转移灶,病理学检查证实门静脉管腔内癌栓存在及转移灶。结论成功建立了稳定的可供影像学客观评价的MPVTT动物模型,并证实增强多排螺旋CT对诊断和监测PVTT生长和转移有良好价值,为临床治疗MPVTT研究建立基础。
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肝动脉热灌注对兔肝VX2肿瘤及正常肝组织血管渗透性功能的作用
目的 探讨介入热疗对肝组织及肿瘤组织血管渗透性的影响及意义,为研究介入热疗的生物学效应机制奠定基础.方法 建立可供实验研究的兔VX2移植性肝癌模型30只,随机等分为3组(非灌注组、普通灌注组及热灌注组),在X线监视下,经股动脉插管至肝动脉.进行灌注,灌注液为生理盐水(温度为60℃),液量30 ml,15 min缓慢推注.灌注结束前5 min,经导管推注1%伊文思蓝(EB),2ml/kg,非灌注组直接推注EB,注EB后置10 min,取出肝脏用生理盐水灌注肝动脉冲洗血管中残留的EB.切取靠近肝门部的小块正常肝组织、瘤组织,称重后,放入1 ml甲酰胺液中,置于50℃恒温水浴箱60 h,提取液用722型光栅分光光度计测出A620nm,从标准曲线上测出相应的EB含量,以反映该组织毛细血管的通透性.结果 肿瘤组织与肝组织的EB含量在3组中均有差别,且差异有统计学意义(P＜0.05);正常灌注组与非灌注组肝组织的EB含量、肿瘤组织的EB含量尤明显差别(P＞0.05);热灌注组与非灌注组、正常灌注组肝组织的EB含量、肿瘤组织的EB含量有明显差别(P＜0.05).结论 介入热疗可以增加肝组织及肿瘤组织的血管通透性.
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兔梨状隐窝VX2瘤模型的建立及解剖与影像学观察
目的 建立兔梨状隐窝VX2移植瘤模型.方法 先以VX2细胞在新西兰大白兔制备移植瘤并传代,再将兔移植瘤制备组织悬液(组织块约1mm3大小,约含1～2×106/ml个细胞),直达喉镜下接种于17只兔梨状隐窝,然后行影像学观察及瘤体组织学鉴定,分析成瘤率及生长特性.结果 移植瘤组织悬液2～4周后,影像检查及瘤体解剖证实,16只兔梨状隐窝内形成了移植瘤,成瘤率为94.1％,但90％荷瘤兔在4周内死亡.结论 VX2细胞移植瘤组织制备瘤组织悬液、直达喉镜下接种于梨状隐窝的方法,能够成功制备兔喉咽癌移植瘤模型.
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介入治疗对兔VX2肝癌MMP-2/PCNA/VEGF表达的影响及其意义
目的:模拟不同方法介入治疗对兔VX2肝癌基质金属蛋白酶(MMP-2)、增殖细胞核抗原(PC-NA)、血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响.方法:将VX2瘤细胞接种于40只新西兰大白兔肝左叶,建立VX2肝癌模型,随机分为4组,每组10只.介入治疗前MRI测量并记录肿瘤直径.经股动脉途径行肝固有动脉插管,分别注入生理盐水(对照组)、水化碘油(A组)、Ad-p53(B组)、Ad-p53+水化碘油(C组).术后1周处死动物,取肿瘤组织制作石蜡切片(HE)染色,镜下观察肿瘤组织坏死情况.免疫组化方法测定MMP-2/PCNA/VEGF的表达.结果:经肝动脉插管介入治疗1周后,A、B、C组肿瘤生长受到明显抑制,与对照组比较,P均＜0.05.单纯碘油栓塞后,肿瘤区的MMP-2、PCNA及VEGF的表达略有升高,与对照组相比P＞0.05;8组与C组的MMP-2、PCNA及VEGF的表达阳性率降低,与对照组相比,P均＜0.05;有转移的MMP-2、PCNA及VEGF的表达阳性率均高于无转移者(P＜0.05);MMP-2与VEGF、PCNA之间之间有相关性(P＜0.05).结论:碘油+Ad-p53可抑制肿瘤的生长,抑制肿瘤新生血管形成,减少转移.MMP-2、PCNA、VEGF的增高预示着肿瘤的高转移、高增殖能力,肿瘤血管的高形成能力.
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兔VX2肝癌模型制作及介入治疗的实验研究
目的:介绍应用VX2细胞株制作兔移植性肝癌模型,并对其进行血管造影及化疗栓塞治疗,探讨兔VX2肝癌在肝癌介入治疗实验研究中的应用价值.方法:将VX2细胞株接种于日本大白兔的肝脏内,植入2周后将30只携有肿瘤的实验兔随机分为对照组及TACE治疗组,植入肿瘤后5周,所有动物均处死取肝脏标本行病理学检查.结果:VX2细胞株接种于兔肝成功率高,血管造影显示该肿瘤血供丰富,5周末对照组在未经任何治疗下肝移植瘤体积26.5±6.5cm3,平均坏死率35.5%±9.2%.TACE治疗后肝移植瘤体积约19.9±7.3cm3,平均坏死率52.4%±17.8%.两组之间对比有显著性差异(P＜0.01).结论:移植性兔VX2肝癌血供特点类似人类原发性肝癌,TACE治疗可以抑制其生成,是介入治疗实验研究十分有用的肝癌模型.
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陡脉冲电场对兔VX2乳腺移植瘤毛细淋巴管的影响
背景与目的:以细胞膜电穿孔效应为核心的电化学治疗已开展二十余年,其主要机理为脉冲电场的膜穿孔促进外源药物、抗体或基因向胞内弥散.本课题组的前期研究已证实高能陡脉冲电场能使肿瘤细胞膜发生不可逆性电穿孔,从而导致肿瘤细胞的直接死亡.本实验主要观察陡脉冲电场对兔VX2乳腺移植瘤毛细淋巴管的影响.方法:成功建立VX2兔移植性乳腺瘤模型,采用美蓝灌注、酶组织化学5-核苷酸碱性磷酸酶(5'-AMP-ALPase)双重染色法、电镜技术观察陡脉冲处理后瘤体局部毛细淋巴管的形态学变化.结果:经美蓝灌注显示,陡脉冲处理后的癌组织边缘模糊,无线样或环状的淋巴管;双重染色显示,靶区内未见任何呈阳性染色的淋巴管,瘤体边缘仅见毛细淋巴管碎片样结构;透射电镜下见毛细淋巴管的完整性和连续性均被破坏.结论:陡脉冲电场破坏了靶区癌组织边缘的毛细淋巴管,因此可减少治疗后局部癌细胞淋巴转移的可能性.
