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唾液中尸胺水平与口源性口臭的相关研究
目的:建立高效液相色谱测定唾液尸胺含量的方法,探讨唾液尸胺水平与口臭鼻测法结果的相关性.方法:56例实验对象的唾液经纯化,以Diamonsil C18柱为反相色谱柱,用1,6-己二胺为内标,流动相由A液(甲醇)和B液(水∶磷酸∶三乙胺=360∶9∶6)组成,检测波长为231nm,流速1ml/min.口臭鼻测法使用0～5 级评分标准,由2位嗅辨员独立完成,以鼻测法均值为应变量,唾液尸胺浓度为自变量,使用SPSS11.0软件包进行Pearson相关分析.结果:尸胺在5～80 nmol/ml范围内线性关系良好(r=0.9985),本法回收率为91.5%,精密度为6.93%;唾液尸胺浓度与鼻测法结果呈正相关(P＜0.01).结论:唾液中尸胺的形成和口臭有一定联系,高效液相色谱法测定唾液尸胺浓度在口臭临床诊断方面具有实用价值.
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口源性口臭检测指标的初步研究
目的:探讨寻找鼻测法替代检测手段的可能性.方法:选取56例医学院在校学生作为研究对象,使用Spearman法和Pearson法,分析鼻测法与口腔可挥发性含硫化合物、唾液pH、舌背微生物培养、唾液尸胺等检测结果间的相关关系.结果:口腔可挥发性含硫化合物(rMax=0.537,P＜0.01;r稳定值=0.572,P＜0.01)、唾液pH(r=0.344,P＜0.01)、唾液尸胺浓度(r=0.352,P＜0.01)、口腔卫生指数的检测结果(r=0.323,P＜0.05)、唾液兼性厌氧培养菌落计数(r=0.398,P＜0.01)、舌背兼性厌氧培养菌落计数(r=0.293,P＜0.05)及舌背专性厌氧培养菌落计数结果(r=0.473,P＜0.01)均与鼻测法结果呈正相关,但相关性均较弱.结论:任一单一指标均不能替代鼻测法对口臭进行诊断.
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糖尿病足患者坏死组织与血液及尿液中多胺含量测定与相关分析
目的 研究糖尿病足患者坏死组织、血液及尿液中腐胺、尸胺和组胺的含量并分析其相关性. 方法 将笔者单位2011年1月-2012年1月收治的10例严重湿性坏死性糖尿病足患者作为糖尿病足组,10例无糖尿病史或皮肤溃疡的瘢痕整形患者作为对照组.分别取糖尿病足组患者足部溃疡坏死组织、对照组患者瘢痕整形手术中切取弃用的四肢正常皮肤组织及2组患者血液和24 h尿液,均留取10 mL样本.采用高效液相色谱-质谱法检测样本中腐胺、尸胺及组胺的含量.对组织匀浆检测数据行Wilcoxon秩和检验,血液、尿液检测数据行t检验,对糖尿病足组内坏死组织与血液、血液与尿液间多胺含量进行简单线性相关分析. 结果 (1)糖尿病足组患者坏死组织中腐胺、尸胺及组胺的含量分别为(186.1±26.8)、(78.553±12.441)、(33 ± 10) mg/kg,显著高于对照组的(2.2±1.2)、(1.168±0.014)、0mg/kg(Z值分别为-3.780、-3.781、-4.038,P值均小于0.01).糖尿病足组患者坏死组织中腐胺含量显著高于尸胺与组胺(Z值分别为-3.780、-3.630,P值均小于0.01).(2)糖尿病足组患者血液中腐胺、尸胺及组胺的含量分别为(0.075±0.013)、(0.022±0.003)、(0.052 ±0.014) mg/L,显著高于对照组的(0.014±0.009)、(0.013±0.003)、(0.016±0.008) mg/L(t值分别为6.591、2.207、3.568,P＜0.05或P＜0.01).糖尿病足组患者血液中腐胺含量显著高于尸胺与组胺(t值分别为13.204、3.096,P值均小于0.01).(3)糖尿病足组患者尿液中腐胺、尸胺及组胺的含量分别为(0.735±0.088)、(0.450 ±0.012)、(0.1623±0.0091) mg/L,仅前两者显著高于对照组[(0.050±0.014)、(0.035±0.007) mg/L,t值分别为3.270、4.705,P＜0.05或P ＜0.01].糖尿病足组患者尿液中腐胺含量明显高于组胺(t=6.686,P＜0.01).(4)糖尿病足组患者坏死组织中腐胺、尸胺及组胺含量与血液中3种多胺含量之间分别存在显著正相关(r值分别为0.981、0.994、0.821,P值均小于0.01),血液与尿液中3种多胺含量间无明显相关性(r值分别为0.150、0.239、0.177,P值均大于0.05). 结论 糖尿病足患者的坏死组织中存在高含量的腐胺、尸胺和组胺,其中腐胺占主导地位.这3种多胺可通过创面吸收入血,并能通过尿液排泄.
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外源性腐胺和尸胺对兔外周血炎症因子的影响
目的 探讨外源性腐胺、尸胺对兔外周血炎症因子的影响. 方法 取40只普通级成年新西兰兔,按随机数字表法分成生理盐水组、坏死组织匀浆液(简称匀浆液)组、腐胺组、尸胺组,每组10只.生理盐水组兔腹腔注射生理盐水(1 mL/kg),匀浆液组兔腹腔注射匀浆液(1 mL/kg),腐胺组兔腹腔注射浓度为10 g/L的腐胺(1 mL/kg),尸胺组兔腹腔注射浓度10 g/L的尸胺(1mL/kg).注射前及注射后2、6、12、24、30、36、48、60 h经兔耳中央动脉抽血2 mL,采用ELISA法动态观察血清标本中TNF-α、IL-1、IL-6的含量变化.对数据进行重复测量方差分析,用Cubic模型曲线对各组炎症因子含量变化进行曲线拟合,并进行Spearman相关分析. 结果 (1)各组兔血清炎症因子含量变化:①生理盐水组3种炎症因子含量无明显变化.与注射前比较,匀浆液组、腐胺组及尸胺组注射后大部分时相点3种炎症因子含量呈不同程度升高,与生理盐水组比较差异有统计学意义(F值为3.49～13.58,P值均小于0.05).②腐胺组血清TNF-α、IL-1、IL-6含量分别于注射后2、6、6h明显上升,此趋势与匀浆液组相似,但较尸胺组(均为注射后2h)延迟.③腐胺组血清TNF-α、IL-1、IL-6含量峰值分别为(339±36)、(518±44)、(265.9±33.5) pg/mL,显著低于尸胺组的(476±86)、(539±22)、(309.4±27.1) pg/mL,F值分别为5.11、1.90、5.56,P值均小于0.05.(2)各组兔血清炎症因子含量变化曲线拟合结果:①腐胺组3种炎症因子含量开始上升时间段(注射后3～4h)较尸胺组(注射后2h)延迟,各炎症因子含量达峰值时间段(注射后18～30 h)显著晚于尸胺组(注射后12～30 h),且峰值持续时间段(注射后18～30 h)短于尸胺组(注射后12～30 h).②腐胺组3种炎症因子含量上升时间段和峰值持续时间段均与匀浆液组(分别为注射后3～5、18～ 30 h)较为接近.③相关系数检验分析显示,腐胺组与匀浆液组炎症因子含量变化趋势呈显著相关(rTNF-α=0.933,P＜0.01；rIL-1=0.967,P＜0.01；rIL-6S=0.950,P＜0.01),而尸胺组与匀浆液组仅IL-1、IL-6含量变化趋势有一定相关性(rIL-1 =0.913,P＜0.01；r IL-6 =0.883,P＜0.05). 结论 外源性腐胺和尸胺均可引起机体炎症反应,其中腐胺与匀浆液诱导的机体炎症反应较为相似,提示其在坏死组织分解物诱导的炎症反应中可能起重要作用.
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柱前衍生化RP-HPLC法鉴别及测定9种补气药中的生物胺
目的:建立柱前衍生化RP-HPLC法测定白术、人参、红参、西洋参、党参、炒扁豆、刺五加、绞股蓝、红景天中11个生物胺的方法,并探讨与补气的相关性.方法:药材样品经1 mol·L-1盐酸提取,正丁醇-二氯甲烷(1∶1)萃取富集,以丹磺酰氯为柱前衍生试剂进行衍生化,RP-HPLC法测定.采用C18色谱柱(200 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈(A)-水(B)为流动相,梯度洗脱(0～7 min,45％A→50％A;7～25 min,50％A→90％A;25～35 min,90％A;35～40 min,90％A→45％A),流速为0.8 mL· min-1,检测波长为254 nm,柱温为30℃.结果:甲胺、尸胺、组胺、亚精胺与精胺的线性范围为0.10～10.00 mg·L-1(r ＞0.999),色胺、腐胺的线性范围为0.10～50.00 mg· L-1(r＞0.999),2-苯乙胺、5-羟色胺、酪胺与多巴胺的线性范围为0.25～10.00 mg· L-1(r＞0.999),平均回收率在70.4％～96.3％之间.白术、党参、炒扁豆中均含有甲胺、腐胺、尸胺、亚精胺与精胺,人参、刺五加中均含有腐胺、尸胺、亚精胺与精胺,红参中含有腐胺、亚精胺与精胺,西洋参中含有腐胺、尸胺、组胺、亚精胺与精胺,绞股蓝中含有甲胺、腐胺、尸胺、酪胺、亚精胺与精胺,红景天中含有甲胺、腐胺与亚精胺.结论:在白术、人参、红参、西洋参、党参、炒扁豆、刺五加、绞股蓝、红景天中含有生物胺类成分.亚精胺是这些补气药中的共有成分,考虑到它的生物活性,这可能是中药补气和抗衰老延年益寿作用的关键成分之一.
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柱前衍生化RP-HPLC法鉴别及测定麻黄中的生物胺类成分
目的:从中药麻黄所含阿魏酰组胺和麻黄根碱的结构以及可能的生源关系推测其尚有未被发现的组胺、腐胺、亚精胺和精胺等成分,建立柱前衍生化RP-HPLC法测定麻黄及麻黄根中11种生物胺.方法:药材样品经1 mol·L-盐酸提取,正丁醇-二氯甲烷(1∶1)萃取富集,以丹磺酰氯为柱前衍生试剂进行衍生化,RP-HPLC法测定.采用Shimadzu C18色谱柱(200mm×4.6 mm,5μm),以乙腈(A)-水(B)为流动相,梯度洗脱(0～7 min,45％A→50％A;7～25 min,50％A→90％A;25 ～ 35min,90％ A;35～ 40 min,90％A→45％A),流速为0.8 mL·min-1,检测波长为254 nm,柱温为30℃.结果:甲胺、尸胺、组胺、亚精胺与精胺的线性范围为0.10～ 10.00 nmg ·L-1 (r＞0.999),色胺、腐胺的线性范围为0.10 ～50.00 mg·L-1(r ＞0.999),2-苯乙胺、5-羟色胺、酪胺与多巴胺的线性范围为0.25～10.00mg·L-1(r＞0.999),平均回收率在75.6％～101.1％之间.麻黄中含有甲胺、色胺、腐胺、尸胺、组胺、亚精胺、多巴胺与精胺.麻黄根中含有甲胺、腐胺、尸胺、组胺、亚精胺与精胺.结论:经方法学验证,该方法可用于测定麻黄中甲胺、色胺、2-苯乙胺、腐胺、尸胺、组胺、5-羟色胺、酪胺、亚精胺、多巴胺与精胺11种生物胺类成分.这是首次发现在麻黄中含有生物胺类成分,同时也证实了麻黄中存在组胺、腐胺、精胺和亚精胺的推测,并为其生源关系提供了证据.该研究方法也可用于其他中药或天然药物化学成分的深入研究.
