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依托咪酯激活大鼠骶髓后连合核神经元GABAA门控氯通道电流
目的研究依托咪酯(etomidate,ET)在急性分离的大鼠骶髓后连合核(sacral dorsal commissural nucleus,SDCN)神经元的药理学特性.方法采用制霉菌素穿孔膜片钳全细胞记录.结果在大鼠SDCN神经元,ET(10～3000μmol/L)在钳制电位为-40 mV时,可引起内向电流(IET),EC50为(33.35±3.07)μmol/L,该电流可被GABAA受体拮抗剂荷包牡丹碱(bicuculline)及氯通道阻滞剂印防己毒素(picrotoxin)以浓度依赖方式所阻断.结论ET在大鼠SDCN神经元可通过作用于GABAA受体而诱发氯通道电流,此作用可能和全麻状态下脊髓水平的麻醉效应有关.
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P物质对大鼠骶髓后连合核神经元甘氨酸激活的氯电流的调控
采用制霉菌素穿孔膜片箝技术, 研究了P物质(substance P, SP)对急性分离的大鼠骶髓后连合核神经元士的宁敏感性甘氨酸(glycine, Gly)反应的调控作用. 在箝制电压为-40 mV时,SP在1 nmol/L～1 μmol/L之间呈浓度依赖性地增强30 μmol/L甘氨酸激活的氯电流.SP既不改变IGly的翻转电位, 也不影响Gly与其受体的亲和力.Spantide和选择性NK1受体拮抗剂, L-668,169, 可阻断SP的增强作用, 而选择性NK2受体拮抗剂, L-659,877则不能阻断SP对IGly的增强作用, 提示SP对IGly的增强作用是由NK1受体介导的. 在不同的神经元上, chelerythrine或KN-62可去除SP对IGly的增强作用, 提示蛋白激酶C或钙离子/钙调素依赖性的蛋白激酶Ⅱ可能参与了SP对IGly增强作用的胞内机制. 以上结果提示, SP可能通过增强Gly的反应而抑制脊髓伤害性信息的传导.
关键词： P物质 甘氨酸 骶髓后连合核 蛋白激酶C 钙离子/钙调素依赖性的蛋白激酶Ⅱ -
5-HT增强大鼠骶髓后连合核神经元牛磺酸激活的全细胞电流
应用制霉菌素穿孔全细胞记录方法,研究了5-羟色胺(5-HT)对急性分离的大鼠骶髓后连合核(SDCN)神经元牛磺酸(taurine,Tau)激活的全细胞电流的调控.实验结果如下:(1)在SDCN神经元,Tau作用在士的宁(strychnine,STR)敏感型甘氨酸(glycine,Gly)受体,在箝制电位为-40mV时,可引起内向电流;(2)5-HT在0.01～100μmol/L范围内呈浓度依赖性地增强Tau反应(ITau);(3)5-HT的增强作用并未改变ITau的翻转电位及Tau与Gly受体的亲和力;(4)给予蛋白激酶C(PKC)的抑制剂chelerythrine后,5-HT的增强作用消失,表明5-HT对Tau的增强作用可能是通过细胞内PKC途径起作用的.结果提示:5-HT对Tau的增强作用至少部分是由细胞内PKC介导的;5-HT和Tau在参与脊髓抗伤害过程中可能具有重要的作用.
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锌离子对急性分离的大鼠骶髓后连合核神经元GABAA受体介导电流的抑制作用
采用制霉菌素穿孔膜片箝技术,研究了锌离子(Zn2+)对急性分离的大鼠骶髓后连合核神经元GABAA受体介导电流的作用.结果表明:(1)在箝制电压为-40mV时,GABA可通过GABAA受体介导产生内向电流;(2)此电流可被Zn2+呈非电压依赖性可逆地阻断;(3)在Zn2+存在的情况下,GABA的浓度-效应曲线平行右移.上述结果提示,Zn2+可能通过变构调控机制对GABAA介导的反应产生抑制作用.
关键词： Zn2+ GABA 受体 制霉菌素穿孔全细胞记录 分离细胞 骶髓后连合核 -
辣椒素对大鼠骶髓后连合核神经元AMPA受体所介导电流的抑制作用
目的 研究辣椒素(CAP)在急性分离的大鼠骶髓后连合核(SDCN)神经元的药理学特性.方法 采用制霉菌素穿孔膜片钳全细胞记录方法.结果 当钳制电压为-40mV时,在所有被检测的SDCN神经元上给予CAP不引起任何电流;CAP(10～3 000 μmol/L)可以呈浓度依赖方式可逆性的抑制海人藻酸(KA)所激活的AMPA受体介导的电流,IC50为(60.7±19.2)μmol/L;该抑制作用呈电压非依赖性.结论 CAP在大鼠SDCN神经元可对AMPA受体激活的电流产生抑制作用,此作用可能和内脏痛的调节有关.
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骶髓后连合核内躯体初级传入粗纤维的证明及其意义探讨
近20年来的研究表明,骶髓后连合核是接受和中继盆腔脏器初级传人信号的重要内脏感觉核团.通过盆神经传人脊髓的盆腔脏器初级传入神经纤维除一部分投射于中间带外侧核区参与排尿反射活动的调控外,其余部分基本上都投射于骶髓后连合核.本文作者等又曾发现躯体神经(坐骨神经、阴部神经)的初级传人粗纤维有一部分经后索投射于后连合核,推测这些躯体初级传人粗纤维可能与内脏传人细纤维汇聚于后连合核神经元并在此进行机能的整合、产生新的神经效应.但是投射于后连合区的躯体初级传人粗纤维,必须在电镜下直接证实.为此,本研究通过透射电镜及HRP标记电镜技术探索了阴部神经躯体初级传人粗纤维在后连合核区的存在,并用Philips CM-100电镜附件Measuring装置测量了这种纤维的轴突直径和髓鞘厚度、通过计算求得了它们之间的比例(A/M值),藉此取得了科学地辨认并确证粗纤维的根据.
