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Bcl-2、Fas-L蛋白在胰腺癌及癌旁组织中的表达及意义
目的:探讨胰腺癌及癌旁组织的Bcl-2、Fas-L蛋白表达,并分析其临床意义.方法:对41例胰腺癌、26例癌旁组织、10例正常胰腺组织石蜡标本进行Bcl-2、Fas-L单抗的免疫组化染色.结果:胰腺癌Bcl-2、Fas-L蛋白表达阳性分别为68.3%、63.4%,在癌旁组织中表达阳性分别为43.2%、34.6%,其阳性率间有显著差异(P＜0.05).Bcl-2蛋白表达阳性率在临床Ⅰ、Ⅱ期和病理学高分化癌高于临床Ⅲ、Ⅳ期和病理学低分化癌高,差异有显著性(P＜0.05).Fas-L蛋白表达阳性率在临床分期和病理学分化上无差异.正常胰腺有Bcl-2染色阳性3例;而Fas-L未见染色阳性,差异有显著性(P＜0.05).结论:Bcl-2、Fas-L蛋白的表达与胰腺癌的发生有关;胰腺癌旁组织中某些细胞Bcl-2、Fas-L染色阳性,这些细胞较易发生癌变,使胰腺癌呈多中心性发生.
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可溶性FasL联合survivin RNA干扰诱导肺腺癌细胞凋亡
目的:探讨可溶性FasL(sFasL)联合survivin RNA干扰对肺腺癌细胞A549增殖和凋亡的影响.方法:构建survivin特异RNA小干扰表达载体,DNA测序,转染A549细胞.G418(geneticin)筛选稳定表达survivin RNA小干扰细胞株,荧光实时定量RT-PCR、免疫印迹 (Western blot)和免疫组化法检测survivin mRNA和蛋白表达.sFasL作用于转染后细胞,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法和流式细胞仪检测细胞活性和凋亡率.结果:成功构建survivin-siRNA表达载体,筛选出稳定表达单克隆细胞.Survivin mRNA和蛋白表达分别下降76.4%(P＜0.01)和84.5%,免疫组化也显示survivin下调.sFasL联合survivin RNA干扰细胞,光密度值在各时间点较siRNA组、sFasL组和对照组均明显降低(P＜0.01),抑制率增加;凋亡率较siRNA组、sFasL组和对照组明显增加(P＜0.01).结论:Survivin RNA干扰表达载体可降低survivin的表达.sFasL 联合survivin RNA干扰较单用sFasL或survivin RNA干扰能更有效地抑制肺腺癌细胞A549增殖,促进凋亡.
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七氟醚对心肌缺血-再灌注幼兔心肌细胞凋亡及Fas/FasL蛋白表达的影响
目的 探讨七氟醚对幼兔缺血-再灌注心肌细胞凋亡及Fas、FasL蛋白表达的影响.方法 取30只日本大耳白幼兔随机均分为三组,缺血-再灌注组(IR组):结扎30 min,再灌注120 min;七氟醚预处理组(S组):缺血前吸入2.5％七氟醚30 min,洗脱15 min后处理同IR组；假手术组(C组):只穿线不结扎.观察三组兔心肌细胞凋亡和Fas、FasL蛋白表达情况,电镜观察细胞超微结构.结果 心肌细胞凋亡率S组(13.71±6.01)％明显低于IR组(31.33±7.04)％(P＜0.05),而C组(3.3±0.5)％明显低于IR组和S组(P＜0.05).S、C组Fas、FasL蛋白表达的平均灰度高于IR组(P＜0.05).电镜显示S组细胞损伤程度小于取组.结论 七氟醚能明显降低幼兔缺血-再灌注心肌细胞的凋亡.
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FasL-Fas系统与脑缺血
在生理情况下,Fas配体(Fas ligand,FasL)对于维持中枢神经系统的免疫豁免状态至关重要.在缺血性卒中发病后,FasL与Fas结合,通过外源性通路介导缺血半暗带神经元凋亡.此外,FasL通过诱导炎性细胞因子和趋化因子表达、促进脑内小胶质细胞激活和外周中性粒细胞浸润、参与调节T淋巴细胞亚群,从而加重卒中后免疫炎症反应.而在缺血性卒中恢复期,FasL-Fas系统对促进神经功能修复具有一定的作用.以FasL-Fas系统作为靶点,可能会成为缺血性卒中脑保护治疗的新途径.
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Survivin、Fas与FasL在宫颈癌介入化疗前后组织中的表达及意义
目的:探讨细胞凋亡相关蛋白Survivin、Fas、FasL在宫颈癌术前行动脉介入化疗前后组织中的表达变化及其临床意义.方法:采用免疫组化的方法,检测56例ⅠB～ⅡB期的宫颈癌介入化疗前、后组织标本、40例正常宫颈组织以及30例宫颈上皮内瘤变组织中Survivin、Fas与FasL的表达,并分析其相关性,探讨介入前后各因子的表达与临床有效性的关系.结果:(1)介入化疗后宫颈癌组织中Survivin、FasL的表达较介入前显著下降,而Fas的表达则显著升高,差异均有统计学意义(P＜0.05).(2)介入化疗前后Fas表达变化与Survivin的表达变化及FasL表达变化呈明显负相关(r分别为-0.9580,-0.9530;P＜0.05).(3)术前介入前后宫颈癌组织中Survivin、FasL表达下降越明显,Fas 表达上升越显著,临床有效率越高(P＜0.05).结论:凋亡蛋白Survivin、FasL、Fas表达变化与宫颈癌的发生发展密切相关,通过术前动脉介入化疗促进宫颈癌肿瘤细胞的凋亡,可达到抑制肿瘤生长、缩小肿瘤体积、降低临床分期及抑制远处转移的目的.
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视网膜变性小鼠视网膜组织中FasL蛋白表达的动态变化
背景 视网膜移植是治疗视网膜变性性疾病的新方法,但如何避免或减少视网膜移植后的免疫排斥反应是亟待解决的问题之一.目前的实验研究中常将正常C57 BL/6小鼠视网膜作为供体,视网膜变性(rd)小鼠作为受体.研究表明视网膜中Fas配体(FasL)蛋白通过FasL/Fas途径诱导Fas+炎症细胞凋亡,推测可能与视网膜移植后的免疫排斥反应密切相关. 目的 探讨FasL蛋白在不同鼠龄C57BL/6小鼠和rd小鼠视网膜中的表达特点,揭示小鼠视网膜的免疫特性,为视网膜移植免疫排斥反应的研究提供参考依据.方法 分别将出生后(PN)-0周(出生日)、PN-1周、PN-2周、PN-3周、PN-4周的正常C57BL/6小鼠和rd小鼠处死制备眼球冰冻切片,采用免疫荧光技术摄片,并经激光扫描共焦显微镜采集图片,用图像分析软件对各鼠龄不同品系小鼠间视网膜中FasL蛋白表达的荧光强度(FI)变化进行半定量分析. 结果 PN-1周C57BL/6小鼠视网膜发育尚不完善,FasL蛋白在视网膜各层均呈阳性表达.PN-2、3、4周C57BL/6小鼠已发育成10层的视网膜结构,FasL蛋白在视网膜色素上皮(RPE)、内节段(IS)、外界膜(OLM)、外丛状层(OPL)、内核层(INL)、内丛状层(IPL)及节细胞层(GCL)呈阳性表达.PN-1周rd小鼠视网膜结构与同龄C57BL/6小鼠接近,FasL蛋白在视网膜各层均呈阳性表达.PN-2周至PN-4周rd小鼠视网膜中外核层(ONL)细胞随着鼠龄增大逐渐减少,FasL蛋白在RPE、OPL、INL、IPL及GCL呈阳性表达;PN-2、3、4周rd小鼠RPE中FasL蛋白表达FI值分别为184.199±16.747、186.797±7.904和184.319±18.795,均明显高于同龄C57BL/6小鼠的160.402±22.851、160.995±22.799和105.787±17.676,差异均有统计学意义(t=-3.360,P=0.002;t’=-4.277,P=O.000;t=-12.175,P=0.000);各周龄rd小鼠与C57BL/6小鼠间视网膜IPL中FasL蛋白表达的FI值差异均无统计学意义(均P＞O.05).结论 rd小鼠随着鼠龄增加视网膜ONL细胞逐渐减少,其RPE内免疫赦免相关抗原FasL蛋白的表达强度明显高于同龄C57BL/6小鼠.
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细胞因子上调大肠癌细胞Fas配体表达
目的:研究白介素18(IL-18)等内源性细胞因子对大肠癌细胞FasL表达水平的调控作用.方法:采用Western蛋白印迹法测定细胞因子处理后大肠癌细胞的FasL表达水平.结果:在检测的6株大肠癌细胞中,全部表达FasL蛋白;TNF-α和IFN-γ显著上调DLD-1FasL蛋白的表达水平;TNF-α和IFN-γ以及乙酸肉豆佛波醇(phorbol12 myristate13 acetate,PMA)加离子霉素(ionomycin)显著上调SW620的FasL蛋白表达水平,并且TNF-α和PMA加离子霉素处理增加SW620的FasL蛋白表达具有时间效应;低浓度IL-18增强DLD-1和SW620的FasL蛋白表达,并具有时间效应.结论:TNF-α和IFN-γ以及IL-18等细胞因子具有上调大肠癌细胞Fas配体表达的作用.
