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屋尘螨提取液对哮喘气道上皮细胞间质转化的影响
目的 探究屋尘螨提取液(House dust mite extracets,HDM)对人支气管上皮16-HBE细胞间质转化(Epithelia-mesenchymal transition,EMT)的影响.方法 以16-HBE细胞株为研究对象,分别加入HDM和转化生长因子β1(Transforming growth factor-β1,TGF-β1),应用MTT法和Western blot法,检测细胞增殖情况以及EMT过程中E-钙黏蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达.结果 ①HDM刺激后,16-HBE细胞形态改变不显著,同时对细胞增殖无显著影响;与TGF-β1联合作用后,细胞形态发生EMT变化,并且显著促进细胞增殖(P＜0.05).②HDM刺激对16-HBE细胞中E-cadherin、Vimentin和α-SMA蛋白表达均无显著影响;与TGF-β1联合作用后,E-cadherin蛋白表达显著降低(P＜0.05),Vimentin和α-SMA蛋白表达升高(P＜0.05),效果较TGF-β1单独应用更为明显.结论 HDM不能直接刺激上皮细胞发生EMT改变,但可通过促进TGF-β1诱导的上皮细胞EMT改变而发挥作用.
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哮喘小鼠气道重塑中α平滑肌肌动蛋白的表达
目的:用屋尘螨提取液(House Dust Mite Extract,HDM)构建哮喘小鼠气道重塑模型,检测肺组织中α平滑肌肌动蛋白(Smooth Muscle Actin-α,α-SMA)的表达.方法:BALB/c小鼠随机分为空白组、HDM低、高剂量三组,每组再分为3、6、9周3个亚组.用不同浓度的HDM皮下/腹腔致敏,滴鼻激发.用医学图像软件分析气道重塑的病理改变,分别用qRT-PCR和IH检测肺组织中α-SMA mRNA和蛋白的表达.结果:与空白组对比,HDM高、低剂量组肺组织病理炎症计分增加,气道内外径比值降低,α-SMA蛋白及其mRNA表达增加,随激发时间延长改变越来越显著;高剂量组较低剂量组更显著.结论:HDM诱导BALB/c小鼠支气管哮喘气道重塑中,α-SMA随气道重塑的加剧而表达增加.
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屋尘螨提取液在BALB/c小鼠气道炎症中的作用
目的 比较3种屋尘螨提取液(house dust mite extract,HDM)对BALB/c小鼠气道炎症表型的影响,并分析其可能的原因.方法 BALB/c小鼠于实验第0、7、14、21、28、35天进行PBS液或HDM液(100 μg/50μl PBS)滴鼻.采用头体积描记法测量小鼠的气道反应性;对支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BAL)进行细胞计数和分类;ELISA法检测BAL中CXCL1、CXCL2、CCL11(eotaxin)、IL-5、IFN-γ、IL-10和IL-17的含量及血清总IgE;对肺组织PAS染色后进行病理学观察.结果 HDM1诱导了以中性粒细胞和嗜酸性粒细胞为主的混合型气道炎症;HDM2诱导的小鼠气道炎症以中性粒细胞升高为主;HDM3仅诱导了微弱的小鼠气道炎症反应,未见中性粒细胞和嗜酸性粒细胞的显著增加.3种HDM均引起BAL中CXCL1蛋白水平的升高,并伴随着高脚杯细胞增生等病理组织学改变.结论 不同来源的HDM可能与不同类型的小鼠气道炎症相关.
