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隐丹参酮对肾癌干细胞增殖和凋亡的影响
背景：前期研究发现隐丹参酮对多种肿瘤具有抑制作用，但是对肾癌的影响尚未有报道。目的：探讨隐丹参酮对肾癌干细胞增殖和凋亡的影响。方法：采用免疫磁珠法分离纯化CD133+肾癌干细胞。通过MTT法检测不同质量浓度(0，0.2，1，5 mg/L)隐丹参酮对CD133+肾癌干细胞增殖的影响；流式细胞仪检测不同质量浓度(0，0.2，1，5 mg/L)隐丹参酮对CD133+肾癌干细胞凋亡的影响；免疫印迹检测5 mg/L隐丹参酮对肾癌干细胞中Ki67、Bcl-2、Caspase-3和p-Caspase-3蛋白表达的影响。结果与结论：分选前CD133+阳性细胞的百分率为6.32%，分选后CD133+阳性细胞的百分率为82.73%，差异有显著性意义(P <0.001)。隐丹参酮抑制肾癌干细胞生长，促进肾癌干细胞凋亡，并呈浓度依赖性。Ki67和Bcl-2在5 mg/L隐丹参酮组中的表达明显低于未加药组，p-Caspase-3的表达水平则明显高于未加药组，而Caspase-3在两组中的表达水平没有明显变化，结果表明隐丹参酮可能通过抑制肾癌干细胞Ki67和Bcl-2表达，促进p-Caspase-3表达来发挥抑增殖促凋亡效应。
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人肾癌干细胞的培养鉴定及其端粒酶活性的分析
目的：研究分析人肾癌干细胞的培养鉴定及其端粒酶活性情况。方法：应用含有碱性成纤维生长因子（英简 bFGF）、表皮生长因子（英简EGF）的 DMEM / F12的培养基对分离的肾癌干细胞进行无血清悬浮培养，并以正常的肾组织细胞及含血清培养的肾癌细胞作为对照。通过端粒重复序列扩增法（英简 TRAP）对肾癌干细胞端粒酶活性进行实时、定量的检测。结果：无血清悬浮培养组的 CD133+ CD34+的表达率显著高于含血清培养组，差异 P ﹤0.05有统计学意义。并且，肾癌干细胞球、肾癌细胞端粒酶活性均显著高于正常肾组织细胞，差异 P ﹤0.05有统计学意义。结论：无血清悬浮培养相比含血清培养，肾癌干细胞 CD133+的表达率更高，但二者培养的肾癌细胞的端粒酶活性均明显高于正常肾组织细胞。
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益气解毒方对ACHN人肾癌干细胞微环境影响的实验研究
目的:观察益气解毒方对人肾癌干细胞微环境的影响,探讨其抗肿瘤机制.方法:建立ACHN人肾癌干细胞裸鼠皮下移植瘤模型,随机分为对照组(生理盐水)和益气解毒方组,连续给药25 d,剥取瘤体计算瘤重及抑瘤率;免疫组织化学方法测定移植瘤组织血管内皮生长因子(VEGF)、转化生长因子-β1 (TGF-β1)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、乏氧诱导因子-1α(HIF-1α)表达.结果:与对照组比较,益气解毒方组移植瘤重量显著下降,抑瘤率为37.1％(P＜0.01);益气解毒方组瘤组织VEGF、TGF-β1、MMP-2、TGF-β1蛋白表达的平均光密度值降低(P＜0.05).结论:益气解毒方能够抑制ACHN人肾癌干细胞移植瘤的生长,对肾癌干细胞血管生成环境、细胞外因子环境、细胞外基质环境、乏氧环境等微环境的影响是其抗肿瘤作用机制之一.
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ABCG2与肾癌干细胞的研究进展
随着对干细胞研究的不断深入和研究技术的不断提高,人们逐渐认识到包括肾癌在内的恶性肿瘤是一种干细胞疾病,近先后在不同的恶性肿瘤中找到了肿瘤干细胞的分子标志物.ABCG2转运蛋白首先是在人肿瘤组织中发现的一种耐药蛋白,根据其分子功能作为SP细胞(侧群干细胞)的分子标志.肾癌的一大特性是对化疗极不敏感,并且根据ABCG2在肾癌中表达的研究,认为ABCG2可作为肾癌干细胞的表面标记,有可能为肾癌的药物治疗提供新的思路.本文综述了肿瘤干细胞的概念,ABCG2的结构、作用及其与肾癌干细胞可能的关系.
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肾癌中CD133+细胞和CD133-细胞生物学特性差异的研究
目的:研究人肾癌细胞系786-O和OS-RC-2中CD133+细胞和CD133-细胞的生物学特性差异.方法:应用流式细胞仪检测肾癌细胞系786-O和OS-RC-2中CD133的膜表达状况;以免疫磁珠法将CD133+细胞和CD133细胞分离纯化,比较两者在光镜下的形态、生长特点、体外增殖能力、长期分化能力及体外克隆形成率的差异;流式细胞术分析两者细胞周期分布的变化.采用MTT法分析两者对化疗药物顺铂(DDP)(10、20、50、80μg/ml)敏感性的差别.结果:786-O和OS-RC-2均有CD133的少量表达,表达率为(8.12±0.86)%、(6.83±0.20)%,CD133+细胞和CD133细胞相比具有较强的体外增殖、克隆形成及长期分化能力;细胞耐药性实验表明CD133+细胞、CD133细胞对50 μg/ml DDP敏感性差异有统计学意义(P＜0.05).结论:肾癌细胞系中CD133+细胞具有肾癌干细胞的部分特征,能否作为肾癌干细胞的表面标志还需要进一步的实验加以明确.
