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  • 神经干细胞体外培养鉴定及诱导分化的表型特征

    作者:刘吉星;侯博儒;杨文桢;马浚宁;严贵忠;陈四化;尹立山;王刚;任海军

    背景:神经干细胞促进受损中枢神经系统结构和功能再修复具有广阔的应用前景,而进行神经干细胞体外培养鉴定及诱导分化表型的研究是实现这一应用的基础.目的:观察神经干细胞在体外培养条件下的生物学特性和分化表型特点.方法:从新生小鼠海马、嗅球提取神经干细胞.选取 3 代后稳定的神经干细胞采用 BrdU 进行标记,并进行BrdU+巢蛋白+Hochest33258免疫荧光复合染色对神经干细胞进行鉴定.体外诱导促使神经干细胞贴壁分化,对分化产生的子代细胞进行BrdU、β-微管蛋白Ⅲ、胶质纤维酸性蛋白、Hochest33258复合免疫荧光染色确定分化表型.结果与结论:来源于新生鼠海马及嗅球的细胞连续传代培养后可形成稳定悬浮的类球状细胞团,且 BrdU+巢蛋白免疫荧光双染阳性.神经干细胞体外诱导贴壁分化后可产生β-微管蛋白Ⅲ、胶质纤维酸性蛋白阳性的子代细胞.以上结果表明体外培养的神经干细胞具有很强的自我增殖更新的能力,在培养过程中趋向于形成稳定的神经球,经体外诱导通过不对称细胞增殖、分化产生神经元和星形胶质细胞等细胞表型.

  • Sox2和 Cdx2基因编码蛋白在胃癌及其癌前病变中的表达及意义

    作者:孙丹;武洋;辛彦

    目的:采用免疫组化法观察研究 Sox2和 Cdx2基因编码蛋白在胃癌及其癌前病变组织中的表达并分析其与胃癌临床病理生物学行为的关系,探讨 Sox2、Cdx2异常表达在胃癌发生发展中的作用机制及相互关系。方法:收集中国医科大学附属第一医院肿瘤外科手术切除胃癌标本257例,采用 Envision 免疫组织化学染色方法和 HID - ABpH2.5- PAS 黏蛋白组织化学染色法,观察 Sox2和 Cdx2在胃癌及其癌前病变中的表达,分析其表达的相互关系。结果:胃癌组织中 Sox2的阳性表达率(64.98%)显著低于正常胃黏膜(89.02%)、肠上皮化生(76.38%)和异型增生(71.01%)中的阳性表达率,P 均<0.05;弥漫型胃癌(71.54%)中的表达显著高于肠型胃癌(58.25%),P <0.05。Cdx2蛋白在胃癌组织中的阳性表达率(53.93%)明显高于正常胃黏膜中的阳性表达率(6.74%),在肠上皮化生组织中的阳性表达率(88.89%)显著高于胃癌组织的阳性表达率,肠型胃癌中(68.75%)的表达水平高于弥漫型胃癌(40.38%),P 均<0.05。结论:Sox2对胃表型的维持起重要作用,可能与弥漫型胃癌的发生关系更为密切。Cdx2对肠表型的维持起重要作用,可能与肠型胃癌的发生更为密切。

  • 慢性乙型病毒性肝炎患者外周血T淋巴细胞亚群CD27和CD28的表达

    作者:赵婷婷;杨智清;郭波;邹丽云;韩俊峰;吴玉章

    目的 分析慢性乙型病毒性肝炎患者外周血T淋巴细胞亚群CD27和CD28的表达,初步探讨其分化表型.方法 采集分离健康人和慢性乙型病毒性肝炎患者外周血单个核细胞(PBMC),利用多种荧光标记抗体标记细胞表面分子,再用流式细胞仪检测CD8+和CD4+T淋巴细胞表面CD27和CD28分子的表达.结果 31例慢性乙型病毒性肝炎患者CD8+CD27+CD28+T细胞占CD8+T细胞(41.13±24.89)%,低于28例健康对照组的(71.93±14.47)%(P<0.05).而CD8+CD27-CD28-T细胞占CD8+T细胞(42.16±10.98)%,显著高于健康对照组的(9.16±5.24)%(P<0.01).慢性乙型病毒性肝炎患者CD4+CD27+CD28+T细胞(80.89±7.93)%和健康对照组(83.17±8.31)%比较,差异无统计学意义.结论 健康人外周血T淋巴细胞以CD27+CD28+早期分化表型为主.而慢性乙型病毒性肝炎患者外周血中不同的亚群分化特征又有所不同,CD4+T淋巴细胞的分化表型仍然以CD27+CD28+早期分化表型为主,而CD8+T淋巴细胞中早期分化表型明显减少,晚期分化表型(CD27-CD28-)显著增加.

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