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陇中损伤散治疗激素性股骨头坏死的作用及机制研究
目的:研究陇中损伤散对兔激素性股骨头坏死模型的治疗效果及其作用机理.方法:成年青紫蓝兔75只,随机分为6组:正常组、模型组、健骨生丸组、陇中损伤散高、中、低剂量组.采用内毒素加激素诱导的方法建立早期激素性股骨头坏死模型.造模后2周,各组动物给予相应的药物或生理盐水灌胃.用药后2、4、8周心脏采血.第8周末处死动物,取双侧股骨头进行病理组织观察,血浆ET与NO、血浆TXB2与6-keto-PGF1α含量的变化.结果:病理学观察显示:与N组比较,M组骨组织形态学出现典型的坏死表现;各治疗组坏死程度较M组显著降低,特别是SH组尤为明显.与M组比较,第8周SH组和SM组ET水平明显降低(P<0.01),而NO水平明显增高(P<0.05).与M组比较,第2到8周SH组和SM组血浆TXB2含量明显下降,而6-keto-PGF1α含量明显上升,且第8周两者都基本接近正常值水平(P<0.05或P<0.01).SH组和SM组的T/K比值较M组有显著减小,用药后第2到8周,相应各组指标M组与N组比较差异显著(P<0.05或P<0.01),Y组与M组比较也有显著性差异(P<0.05或P<0.01).结论:陇中损伤散具有治疗早期激素性股骨头坏死的作用,其机理可能是部分改善血管内皮功能受损状态,降低血液黏稠度,降低骨内压,改善微循环.
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陇中损伤散对激素性股骨头坏死兔氧自由基的影响
目的:研究陇中损伤散对兔激素性股骨头坏死模型的治疗效果及其作用机制.方法:成年青紫蓝兔75只,随机分为6组:正常组(N)、模型组(M)、健骨生丸组(Y)、陇中损伤散高、中、低剂量组(SH组、SM组、SZ组).采用内毒素加激素诱导的方法建立早期激素性股骨头坏死模型.造模后2周,各组动物给予相应的药物或生理盐水灌胃.用药后2、4、8周心脏采血,检测血浆中SOD活力与MDA含量的变化.结果:SH组、SM组和SL组第8周血浆总SOD活力提高,MDA含量下降;其中SH组和SM组SOD活力与M组比较差异有统计学意义(P＜0.05),SL组SOD活力与M组比较差异无统计学意义(P＞0.05);SH组、SM组和SL组MDA含量与M组比较差异有统计学意义(P＜0.01).用药后第2到8周,各检测指标M组与N组比较差异有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01),Y组与M组比较差异也有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01).结论:陇中损伤散具有治疗早期激素性股骨头坏死的作用,其机理可能是清除自由基,部分改善血管内皮功能受损状态,改善微循环,降低骨内压.
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陇中损伤散含药血清对大鼠骨髓间充质干细胞增殖与成骨性分化的影响
目的:研究不同浓度的陇中损伤散含药血清对大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)增殖与成骨性分化的影响.方法:取三月龄wistar大鼠骨髓,分离BMSCs进行原代培养,在第一次换液后分别加入2%,5%,10%的陇中损伤散含药血清,通过倒置显微镜观察细胞形态变化,MTT法测量骨髓间充质干细胞增殖情况;偶氮偶合法进行碱性磷酸酶阳性克隆(CFU-FALP)组织化学染色,yon Kossa染色法测定钙化结节数目,免疫细胞化学技术检测Ⅰ型胶原表达;于不同时间进行ALP活性及钙盐沉积量的测定.结果:陇中损伤散含药血清对BMSCs的影响呈剂量依赖性,其中以浓度为10%时作用强.MTT结果显示陇中损伤散含药血清能明显促进BMSCs增殖;损伤散含药血清还能显著促进其成骨性分化.结论:陇中损伤散活性代谢产物能促进BMSCs的增殖和成骨性分化;陇中损伤散对骨髓间充质干细胞的这种作用可能是其促进骨折愈合、防治骨质疏松的细胞学机制之一.
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陇中损伤散治疗激素性股骨头坏死的实验研究
目的:研究陇中损伤散治疗兔激素性股骨头坏死模型的作用及机制.方法:成年青紫蓝兔75只,随机分为6组:正常组(简称N组,n=10)、模型组(简称M组,n=13)、健骨生丸组(简称Y组,n=13)、陇中损伤散高、中、低剂量组(以下分别简称SH组、SM组、SL组,各组n=13).采用内毒素致敏及大剂量激素诱导的方法建立早期激素性股骨头坏死模型.造模后2周,各组动物给予相应的药物或生理盐水灌胃.用药后2、4、8周心脏采血.第8周末处死动物,取双侧股骨头进行病理组织观察,并测定其血液流变学的变化.结果:病理学观察显示:与N组比较,M组骨组织形态学出现典型的坏死表现;各治疗组坏死程度较M组显著降低,特别是SH组尤为明显.SH组和SM组与M组比较,用药后第2到8周全血高切粘度、低切粘度、血浆粘度明显减低,有显著差异(P<0.05或P<0.01).用药后第2到8周,相应各组指标M组与N组比较差异显著(P<0.05或P<0.01),Y组与M组比较也有显著性差异(P<0.05或P<0.01).结论:陇中损伤散具有治疗早期激素性股骨头坏死的作用.其机理可能是部分改善血管内皮功能受损状态,降低血液粘稠度,降低骨内压,改善微循环.
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陇中损伤散提取物对成骨细胞增殖影响的血清药理学方法的建立及验证
目的:建立并验证陇中损伤散提取物(extract of Longzhong sunshang powder,LSE)对成骨细胞增殖影响的血清药理学研究方法.方法:用LSE末次给药后颈总动脉采血制备含药血清,按照LSE不同给药剂量、给药时间、采血时间分组,分别用含不同浓度LSE的血清培养胎鼠成骨细胞(osteoblast,OB).采用MTT法检测细胞增殖能力,倒置相差显微镜观察OB形态,Von kossa染色法观察OB的矿化结节,以碱性磷酸酶活性、矿化结节数、基质钙含量、Ⅰ型胶原免疫组化等指标与空白对照组进行对比分析.结果:等剂量组(给药剂量),5d组(给药时间),1h组(采血时间)的OD值,与对照组比较有显著性差异(P＜0.05);不同浓度含药血清组的OD值:10％组＞15％组＞5％组,组间比较有显著性差异(P＜0.05);LSE可显著增加OB的碱性磷酸酶染色阳性细胞数、矿化结节数、基质钙含量(P＜0.01)以及上调Ⅰ型胶原表达(P＜0.05).结论:LSE以等剂量(1g/kg)灌胃给药5d,末次给药1h后采血制备血清,以10％浓度与OB细胞共培养,是促进胎鼠成骨细胞增殖的优选方案.
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陇中损伤散治疗激素性股骨头坏死24例
目的:探索中药治疗激素性股骨头坏死的有效治疗方法.方法:对24例,共36髋激素性股骨头坏死患者,内服中药制剂陇中损伤散,30天为1疗程.结果:Ⅰ期优7髋,Ⅱ期优12髋,Ⅲ期优3髋,Ⅳ期优1髋.结论:陇中损伤散能有效治疗激素性股骨头坏死.
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陇中损伤散的长期毒性实验研究
目的:观察陇中损伤散长期应用的安全性.方法:将wistar大鼠随机分为4组,分别为陇中损伤散低剂量组(1g/kg)、中剂量组(2g/kg),高剂量组(4g/kg)和对照组,连续给药6个月后颈动脉采血处死动物进行指标检测.结果:各剂量组动物的一般状况良好,血液学、血液生化及脏器系数与对照组比较均无明显差异(P>0.05),也未见异常的组织学病理改变.结论:陇中损伤散长期应用不会产生蓄积性中毒反应.
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陇中损伤散对去卵巢大鼠股骨和第一腰椎生物力学的影响
目的:研究陇中损伤散对去卵巢大鼠所导致骨质疏松症的影响.方法:40只SD大鼠随机分成4组,其中3组切除卵巢后,分别给予口服损伤散(OVX+损伤散组)、肌注雌二醇(OVX+E2组)和单纯喂食处理(0VX组),1组作假手术处理(即进行同样操作,但不切除卵巢),只单纯喂食,用作正常对照(Sham组).治疗从术后10 d开始,持续3个月.实验结束时,摘取每只大鼠双侧股骨和第1腰椎进行三点弯曲试验和椎体压缩试验.结果:股骨三点弯曲试验中对大载荷、大应力、能量吸收的测定显示,去卵巢大鼠组均显著降低,而OVX+损伤散组、OVX+E2组,在治疗后的各项数值均有很大改善,与去卵巢大鼠组比较有显著差异(P＜0.01),与Sham组比较无显著差异(P＞0.05),OVX+损伤散组、OVX+E2组之间比较差异无显著性(P＞0.05).腰椎抗压缩试验中对大载荷、大应力、能量吸收的测定显示,去卵巢大鼠组均显著降低,而OVX+损伤散组、OVX+E2组,在治疗后的各项数值均有很大改善,与去卵巢大鼠组比较有显著差异(P＜0.01),与Sham组比较无显著差异(P＞0.05),OVX+损伤散组、OVX+E2组之间比较差异无显著性(P＞0.05).结论:陇中损伤散可有效维持切除卵巢后大鼠的正常骨骼生物力学特性,具有理想的预防骨质疏松症疗效.
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陇中损伤散对去卵巢大鼠股骨和第一腰椎骨密度的影响
目的:研究陇中损伤散对去卵巢大鼠所导致骨质疏松症的影响,并揭示其机理.方法:40只SD大鼠随机分成4组,其中3组切除卵巢(0VX组),分别给予口服损伤散(0VX+损伤散组)、肌注雌二醇(OVX+E2组)和单纯喂食处理(0VX组),1组进行假手术处理(即进行同样操作,但不切除卵巢),只单纯喂食,用作正常对照(Sham组).治疗从术后10天开始,持续3个月.实验结束时,摘取每一只大鼠双侧股骨和第一腰椎进行骨密度测量.结果:OVX组大鼠的股骨和腰椎骨骨密度显著降低,与Sham组有统计学差异(P＜0.05),而OVX+E2组明显抑制了这种变化,与Sham组无统计学差异.OVX+损伤散组也阻止了切除卵巢造成的股骨和腰椎骨密度降低,与OVX组之间具有统计学差异(P＜0.05),而与OVX+E2组和Sham组无明显差别(P＞0.05).结论:陇中损伤散可有效防治切除卵巢引起的骨量丢失和骨密度下降,具有理想的预防骨质疏松症疗效.
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陇中损伤散对大鼠股骨骨折愈合的影响
目的:观察陇中损伤散对大鼠股骨骨折愈合的影响.方法:采用自制钝性打击器对40只3月龄健康SD大鼠制造闭合股骨干骨折模型后随机分为观察组和对照组,每组20只.观察组每日以1.6 g/kg陇中损伤散拌食,对照组正常喂食,于2、4、6、8周每组各处死动物5只,行X线摄片,观察右股骨骨折愈合情况,并对患肢进行micro-CT测量分析.结果:X线摄片显示自2周开始即有骨痂开始形成,至8周骨痂塑形改建,骨折愈合,观察组骨痂形成、骨折愈合较对照组明显;micro-CT三维重建分析表明,在2、4、6周时观察组在骨小梁立体测量学的指标与对照组的差异有统计学意义,在4、6、8周时观察组的BMD、BMC分别比对照组高,结果有统计学意义(P<0.05).结论:陇中损伤散治疗能促进骨折部位骨小梁较早的形成和改建,促进矿盐的沉积,利于骨折愈合.
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陇中损伤散的毒理学实验研究
目的:对陇中损伤散进行毒理学实验研究,对其安全性进行客观评价,为临床药物的研制与开发提供确实实验数据.方法:急性毒性实验以大浓度、大体积的陇中损伤散灌胃小鼠,测定1日大给药量.长期毒性实验以高、中、低3个剂量的陇中损伤散连续灌胃大鼠90天,观察大鼠的生长发育、血液学、血液生化学、脏器系数、组织病理变化及停药后14天上述指标的变化.结果:急性毒性实验结果表明小鼠1日内的大给药量为生药49.6 g/kg体质量,相当于临床成人每日用量0.05 g/kg体质量的992倍.长期毒性实验结果表明给药90天时,高剂量组丙氨酸氨基转移酶(ALT)较对照组升高(P＜0.01),高剂量组肝重量系数增高(P＜0.05).停药14天后,大鼠行为、体质量、血液学、血液生化学、脏器系数、组织病理学检查均未见明显异常(P＞0.05).结论:按临床规定的疗程、剂量用药是安全、有效的.
