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人芽囊原虫生物学特性——形态特征、繁殖方式及与细菌的关系研究
目的 观察人芽囊原虫(Blastocystis hominis,B.h)的生殖方式,对B.h与细菌的关系及相互间微环境的影响进行初步探索.方法 分别对新鲜粪便标本和RPMI 1640培养基中B.h,经碘液染色和苏木素染色观察其形态,对B.h阳性的粘液便、粘液血便进行肠道常见致病菌的培养和鉴定,并通过B.h与大肠埃希菌共培养实验,观察两者相互作用.结果 本研究确证了四种B.h繁殖方式:二分裂生殖、内二芽生殖、复分裂增殖及出芽生殖.半数B.h阳性标本未检出已知肠道致病菌.B.h对大肠埃希菌有一定抑制作用.结论 B.h存在多种繁殖方式;B.h可能单独致病,其致病机制与微生态改变有关.
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人芽囊原虫在DMEM单相培养基中体外培养方法的建立
目的 建立人芽囊原虫(Blastocystis hominis,B.h)在DMEM单相培养基中的体外连续培养方法,为进一步研究其诊断、生活史、致病机制奠定基础.方法 比较不同pH值、血清种类、血清浓度及接种量等条件下虫体生长繁殖情况及影响因素.结果 使用DMEM培养基、接种量大于105/管、pH7.0～8.0、10%～30%小牛血清(或人、马血清),青、链霉素及二性霉素B,于37 ℃条件下厌氧培养,每三、六或五天转种一次,可达到体外长期培养B.h的目的.结论 使用DMEM单相培养基可用于人芽囊原虫的诊断及体外长期培养.
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人芽囊原虫病原学检查方法比较及形态观察
目的 比较3种人芽囊原虫病原学检查方法的检出效果. 方法 收集腹泻组400例、健康对照组394例送检粪便标本,分别采用生理盐水涂片法、碘液染色法和改良酸醚离心沉淀法检查人芽囊原虫,并观察镜下形态. 结果 腹泻患者粪便标本3种方法阳性检出率粪便为11.50％、12.75％和20.75％;改良酸醚离心沉淀法检出率高于其他两种方法(x＝15.804,P＜0.05),且该法检出密度亦明显高于其他两种方法(x2＝144.715,P＜0.05).健康对照组改良酸醚离心沉淀法阳性检出率(1.52％)和检出密度高.粪便中人芽囊原虫常见为空泡型,其次为颗粒型. 结论 临床检测人芽囊原虫时,应根据实际需要和检测条件选取合适的检查方法.
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mLES法培养人芽囊原虫的实验观察
目的 建立一种简便、灵敏的可用于人芽囊原虫(Blastocystis hominis,Bh)感染诊断实验室方法. 方法 比较改良洛氏-鸡蛋-血清双相培养法(modified Locke-egg serum medium culture method,mLES培养法)与碘液直接涂片法对Bh的检出率;比较普通洛氏-鸡蛋-血清双相培养基(Locke-egg serum medium culture method,LES培养法)与 mLES培养法中Bh形态、低检出限、生长曲线及厌氧条件形成时间. 结果 检查397份临床粪便标本,mLES培养法Bh阳性率为5.54％(22/397),碘染法阳性率为1.01％(4/397),差异有统计学意义(P＜0.01).中央空泡型是Bh存在两种培养基中的主要形态.mLES培养法48hBh低检出限(102/5ml)优于LES培养法(103/5ml),重复测量方差分析表明组内Bh密度在不同时间点有差异、时间与分组交互作用及培养基种类的差异有统计学意义(P＜0.05);除了第6d,其余各时间点两种培养基中人芽囊原虫生长密度差异均有统计学意义(P＜0.05),mLES培养法前3dBh密度高于LES培养法.mLES培养法先于普通培养基达到厌氧环境. 结论 mLES培养法简便、灵敏,可用于诊断Bh的体外培养检查.
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人芽囊原虫病患者肠黏膜表皮生长因子水平及其临床意义
目的 检测人芽囊原虫感染者肠黏膜表皮生长因子(EGF)的水平,探讨EGF与肠黏膜损伤程度的关系.方法 感染组为确诊人芽囊原虫感染者44例,对照组为健康体检者40例,均经电子肠镜检查肠黏膜病变情况,并用ELISA法检测肠黏膜组织匀浆EGF水平.结果 电子肠镜检查可见人芽囊原虫感染者的肠黏膜有不同程度病变,表现为充血、水肿、糜烂、溃疡等.感染组EGF为(559.60±178.5)pg/ml,对照组为(977.58±215.5)pg/ml,差异有统计学意义(t=9.7136,P＜0.01).且EGF水平随着肠黏膜病变严重程度的增加而逐渐降低.结论 人芽囊原虫感染能引起患者肠黏膜的病理改变及肠黏膜EGF水平降低.人芽囊原虫感染所致肠黏膜损伤可能与原虫的侵入及黏膜中EGF的减少有关.EGF在人芽囊原虫病肠道损伤的修复中起重要作用.
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人芽囊原虫在腹泻患者中的感染状况及繁殖方式
目的观察人芽囊原虫在腹泻患者中的感染状况及繁殖方式,为进一步研究其生理生化特性及致病机理奠定基础. 方法调查腹泻患者临床表现;用生理盐水涂片、碘液染色和铁苏木素染色法在光镜下观察其在粪便标本和培养物及动物模型肠内容物中形态、结构及繁殖方式. 结果健康人群和腹泻人群粪便标本中人芽囊原虫检出率分别为0.94 %(2/213)和24.73 %(46/186);人芽囊原虫与其它肠道寄生原虫有合并感染;有二分裂、内二芽生殖和裂体增殖3种繁殖方式. 结论人芽囊原虫在腹泻患者中有较高的感染率;易与结肠内阿米巴和其他非致病阿米巴合并感染;以3种无性生殖方式繁殖.
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口服甲硝唑治疗人芽囊原虫感染的临床研究
目的观察甲硝唑治疗人芽囊原虫感染的疗效. 方法 115例患者因腹疼、腹泻及粘液血便行肠镜检查,肠镜下取病变粘膜做病理检查,并采集其新鲜粪便,行直接涂片法和三色染色法用光学显微镜检查,确诊人芽囊原虫阳性而其他寄生虫阴性者,予口服甲硝唑0.4 g/d,4次/d,连续服7 d.治疗3周后粪检仍阳性者,再重复用药7 d.30例患者治疗后复查电子肠镜,观察肠粘膜损伤的变化. 结果甲硝唑治疗人芽囊原虫感染的总有效率为94.65%(230/243),其中服药7 d的治愈率76.54%(186/243);服药14 d的治愈率18.11%(44/243);治疗无效5.35%(13/243).部分患者服药后出现恶心、呕吐、食欲不振等不良反应,占4.53%(11/243). 电子结肠镜检查,所检患者的肠道病变部位主要在左半结肠、直肠,表现为粘膜糜烂及溃疡;病理检查多为粘膜慢性炎症或溃疡病变.治疗后复查肠镜30例,肠粘膜损伤均获治愈. 结论人芽囊原虫感染可引起肠粘膜糜烂及溃疡,口服甲硝唑治疗该病引起的肠粘膜损伤有较好的疗效,但少数患者出现药物不良反应或因产生抗药性而治疗无效.
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不同理化因素对人芽囊原虫体外存活的影响
目的观察不同理化因素对人芽囊原虫体外生存和发育的影响. 方法将人芽囊原虫感染者新鲜粪便定量分成若干份,分装于有盖小平皿中,设自然因素及常用消毒剂试验组,用直接涂片法镜检,以原虫数量和细胞活度为指标,观察自然因素(温度、湿度、紫外线、渗透压)和化学消毒剂(HCl、酒精、碘酒、新洁而灭)组人芽囊原虫的生长发育情况,记录实验结果并照像. 结果低温、高温、干燥及消毒剂均可致人芽囊原虫数量减少,细胞活度降低,而紫外线照射和低渗对原虫数量和细胞活度无明显影响. 结论低温、高温、干燥和常用消毒剂对体外人芽囊原虫有抑制或杀灭作用.
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3种培养基体外培养人芽囊原虫的效果观察
目的观察人芽囊原虫在3种培养基中的生长繁殖情况,以探讨佳的培养方法. 方法从大学生粪便中分离人芽囊原虫,转种至3种不同培养基,定时观察人芽囊原虫的生长繁殖情况,根据原虫密度评价培养效果. 结果培养96 h后,Locke's鸡蛋血清(LES)双相培养基中的人芽囊原虫密度高,改良Jones单相液体培养基次之, Locke's琼脂血清(LAS)双相培养基原虫密度低,差异有显著性(P＜0.05);观察3种培养基中的原虫密度高峰持续时间分别为360 h、96 h和72 h,长存活时间分别为552 h、336 h和168 h. 结论 Locke's鸡蛋血清双相培养基较适用于人芽囊原虫体外增殖培养.
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一起人芽囊原虫病暴发流行的调查研究
江西省崇义县横水镇在1996年10月25日至11月1日发生了1122例人芽囊原虫病,人群总发病率为2.39%.为查明本次暴发流行的原因,1997年我们采用疫情资料回顾性调查和病原体实验研究的方法,证实本次暴发流行是通过污染的水而传播,同时与带虫者粪便中病原体的耐低渗性和居民饮用水的不良卫生习惯有关.
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人芽囊原虫在不同培养基中生长状况的观察
目的筛选培养人芽囊原虫的适培养基. 方法将同一株人芽囊原虫阳性粪便标本以2×105细胞/管接种至RPMI1640、199和LES培养基中,加入20%小牛血清及青、链霉素,pH值为7.5,放置厌氧罐中于37 ℃恒温培养,每24 h计数,每6 d转种1次.观察人芽囊原虫在3种培养基中的存活时间、虫体密度和虫体形态. 结果人芽囊原虫在RPMI1640培养基中存活时间长、虫体密度高,虫体以空泡型多见;在LES培养基中存活时间短、虫体密度低,但虫体形态清晰、规则;在199培养基中存活时间和虫体密度均介于前两者之间. 结论 RPMI1640培养基适宜人芽囊原虫的生长繁殖,为人芽囊原虫体外培养的首选培养基;LES培养基中虫体形态清晰、规则,可用于人芽囊原虫的形态学研究;199培养基也可用于人芽囊原虫的体外培养,但不作为首选.
关键词： 人芽囊原虫 RPMI1640培养基 199培养基 LES培养基 生长状况 -
IL-5及嗜酸粒细胞与人芽囊原虫病患者肠黏膜损伤关系的探讨
目的 探讨IL-5及嗜酸性粒细胞与人芽囊原虫病患者肠黏膜损伤的关系.方法 实验组为确诊为人芽囊原虫感染的30例患者,对照组为30例健康体检者.均做电子肠镜检查,用ELISA法检测肠黏膜组织匀浆中的IL-5水平.实验组取病变黏膜做病理检查,HE染色病理切片,并观察嗜酸性粒细胞的浸润情况.结果 经电子肠镜检查,30例人芽囊原虫病患者均出现不同程度的肠道病变,表现为充血、水肿、糜烂、溃疡等.病理学观察病变组织有嗜酸性粒细胞浸润.实验组肠黏膜组织匀浆IL-5(45.75±24.1)pg/ml,对照组为(19.90±7.6)pg/ml,差异有统计学意义(t＝5.603 0,P＜0.01),且人芽囊原虫感染者肠黏膜组织匀浆IL-5水平随着浸润嗜酸性粒细胞数目增加而逐渐升高,人芽囊原虫感染度与嗜酸性粒细胞浸润数目呈正相关(rs=0.771 1,P＜0.01).结论 人芽囊原虫感染能引起患者肠黏膜的病理改变,嗜酸性粒细胞浸润及细胞因子IL-5水平升高.IL-5和嗜酸性粒细胞在人芽囊原虫感染所致的肠黏膜损伤中起重要作用,且IL-5是人芽囊原虫感染引起免疫反应导致肠黏膜损伤的重要细胞因子之一.
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上海市不同人群人芽囊原虫感染调查
目的 了解上海市不同人群人芽囊原虫感染情况.方法 在上海市6个区收集居民新鲜粪便, 采用Ringer溶液37 ℃恒温条件下培养人芽囊原虫,计算人芽囊原虫感染率.结果 检查居民2 984人,人芽囊原虫阳性者88人,感染率2.95%.上海市各区人群感染率间差异无统计学意义(χ2 =9.90,P>0.05);青浦区男性感染率为5.56%,女性感染率1.57%,差异有统计学意义(χ2=5.38,P<0.05),其他5个区男、女性感染率差异无统计学意义(χ2 =0.08～0.54,P均＞0.05);农民感染率为6.87%,与其他职业人群比较差异有统计学意义(χ2=18.57,P<0.05).结论 上海市人群对人芽囊原虫普遍易感,以农民感染率高.体外培养法敏感性较高,可用于人芽囊原虫感染的流行病学调查.
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感染人芽囊原虫昆明鼠肠粘膜的病理改变
目的通过观察昆明鼠感染人芽囊原虫后肠粘膜病理变化,探讨人芽囊原虫的致病机制. 方法从腹泻患者粪便中分离培养人芽囊原虫.15只昆明鼠分为3组:A组为接受免疫抑制剂处理组,B组为非免疫抑制剂处理组,经口感染人芽囊原虫1.6×105个/鼠,观察小鼠感染情况及肠粘膜的病理变化;C组为健康对照组. 结果实验鼠人芽囊原虫检出率90%(9/10),虫体主要寄生在小鼠回盲部肠腔和肠粘膜表面,个别虫体侵入肠粘膜上皮,部分肠粘膜充血水肿,腺体增生,粘液分泌增强,可见有炎症细胞浸润,偶见局灶性肠粘膜坏死.病变程度免疫抑制剂处理组比未接种免疫抑制剂处理组重. 结论感染人芽囊原虫的昆明鼠回盲部肠粘膜发生病理损害,病变程度受宿主机体免疫状况的影响.
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人芽囊原虫病患者肠粘膜损伤及其粘膜细胞因子的测定
目的探讨人芽囊原虫感染引起的肠粘膜病变及其分泌细胞因子IL-8、IL-18、GM-CSF水平变化的病理意义.方法经粪便检查确诊为人芽囊原虫感染的30例患者做电子肠镜检查,取病变粘膜做病理检查.用ELISA法检测人芽囊原虫感染者和30例正常对照者肠粘膜组织匀浆中的IL-8、IL-18和GM-CSF水平. 结果电子肠镜检查人芽囊原虫感染者均出现肠道病理改变,病变部位主要在左半结肠、直肠,病变程度与人芽囊原虫感染度呈正相关(rs =0.853 8,P<0.001);病理切片检查多数粘膜呈慢性炎症或溃疡病变.患者肠粘膜组织匀浆中IL-8、IL-18、GM-CSF水平均显著高于正常人,且随人芽囊原虫感染度的加重逐渐升高. 结论人芽囊原虫感染能引起患者肠粘膜病理改变和细胞因子IL-8、IL-18、GM-CSF水平的升高,且与感染程度相关.人芽囊原虫感染诱导并调节肠上皮细胞的免疫反应,细胞因子可能起重要作用.
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人芽囊原虫在不同培养基及条件下的培养效果观察
目的 观察人芽囊原虫(Blastoc ystis hominis,Bh)在IMDM、RPMI1640以及传统的洛克氏液-鸡蛋-血清(LES)培养基中的生长情况,应用正交试验筛选人芽囊原虫的适培养基及培养条件. 方法 将门诊病人Bh阳性粪便标本调匀后作虫体计数,分别接种于IMDM、RPMI1640及LES培养基进行培养,以正交试验分析培养基、血清浓度、pH值和接种虫体数4个因素对Bh体外培养效果的影响,以首次达虫体数量高峰时间、虫密度平均峰值、虫密度平均值的综合评分值K为指标,考核虫株的综合培养效果. 结果 对正交试验结果进行极差及方差分析,各因素对Bh培养效果的影响为:培养基＞血清浓度＞pH值＞接种量.经SSR检验,IMDM、RPMI 1640及LES 3种培养基对Bh的培养效果差异有统计学意义(P＜0.05),以IMDM培养基中培养综合评分K值高,培养效果优；RPMI 1640与LES培养基对Bh的培养效果差异无统计学意义(P＞0.05).培养基中加入血清0.5、1、1.5 ml时培养效果差异有统计学意义(P＜0.05),以血清量0.5 ml培养效果优；Bh在pH7.0、pH7.5、pH8.0条件下培养效果差异有统计学意义(P＜0.05),在pH7.5和pH8之间培养效果差异无统计学意义(P＞0.05). 结论 含血清0.5 ml、pH 7.5～8.0的IMDM单相培养基适宜Bh生长繁殖,可用于Bh体外长期培养.
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青海省土族人体肠道寄生虫感染状况调查
青海省位于我国西北、青藏高原之东北部，总面积72.12万km2，总人口488.3万人(1996年)。青海是我国多民族聚居的省份，土族是其主要的少数民族之一，人口总数(18.4万人)仅次于藏族和回族，主要分布在互助、民和、大通、乐都、同仁等地。该民族具有悠久和特有的风俗习惯，以农业生产为主，种植青稞、小麦和薯类。1 调查方法 按全国人体寄生虫分布调查实施细则［1］的要求和方法进行。计数蛔虫卵，按WHO分类标准［2］划分感染强度，轻度：EPG≤5 000，中度：5 000
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赣州市人芽囊原虫感染的流行病学调查分析
目的 了解赣州市人芽囊原虫病流行情况.方法 随机抽取江西省赣州市5个县(市)20个调查点,调查不同人群、6种家禽家畜人芽囊原虫感染率,粪检采用生理盐水涂片法.采集生活污水饮用水及自然水源水样,用自然沉淀法查人芽囊原虫污染程度.结果 共检查不同人群1336人,查出人芽囊原虫感染99人,感染率为7.41%.采集5种家禽家畜粪便628份,查出人芽囊原虫67份,平均感染率为10.67%.调查3种水体标本304份,阳性11份,占3.62%.结论 赣州市人群与6种家禽家畜均存在人芽囊原虫感染,3种水体均受到人芽囊原虫污染.
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南宁市城区人群人芽囊原虫感染情况调查
目的 了解南宁市城区人群人芽囊原虫感染情况及流行规律,为采取相应的防治措施提供科学依据. 方法 对2009～2011年到医院体检或就诊的4 263例南宁市城区人群进行粪便检查,对人芽囊原虫感染情况进行分析. 结果 检出入芽囊原虫感染者320例,感染率为7.51％,其中粘液脓血便者的感染率为27.33％(176/644),显著高于其他受检者(X2 =513.2％,P＜0.05)；单纯人芽囊原虫感染者289例(90.31％),合并华支睾吸虫感染者26例(8.13％)；男性感染率为7.72％,女性为7.25％,差异无统计学意义(x2=0.328,P＞0.05)；腹泻人群感染率为11.78％,显著高于健康人群感染率(3.56％)(x2=103.6,P＜0.05),但健康人群间感染率差异无统计学意义(X2=4.561,P＞0.05)；全年以秋季感染率高(11.26％),其次是夏季(9.72％);2009～2011年各年度感染率分别为3.86％、7.02％和10.77％,差异有统计学意义(x2=72.533,P＜0.05),感染率呈逐年上升趋势.感染者多有不良卫生、饮食习惯；有症状者229例(71.56％). 结论 南宁市城区人群人芽囊原虫感染普遍存在,应全面推进和落实健康教育工作,切断传播途径,以降低人群感染率.
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粪便人芽囊原虫与常见生物微粒的形态鉴别
粪便标本经生理盐涂片法和碘液染色法制片后,光镜下观察并描述人芽囊原虫与花粉颗粒、类酵母菌和脂肪滴的形态特征,为人芽囊原虫的病原学诊断提供参考依据.
