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血小板经mPEG-SPA化学修饰后体外功能特性研究
血小板输血在生理性止血、血小板减少性疾病的治疗中起重要作用[1] ,但多次输注血小板患者可产生新的血小板抗体,造成血小板输注无效.采用线性高分子化合物甲氧基聚乙二醇-丙酸-琥珀酸亚胺(mPEG-SPA)可有效遮蔽血小板表面抗原,避开体内抗体的攻击,制备通用血小板,解决临床由免疫因素引起的血小板配型困难[2].
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体外检测生物人工肝支持功能组合物的研制
目的 依据临床上肝功能衰竭时血清成分变化的主要特点,研制一种可用于体外检测生物人工肝支持功能的组合物. 方法 (1)以未结合胆红素,鹅去氧胆酸,胆酸和氯化铵为组合物中的主要成分,将其先后溶解在含5～10 g/L人血白蛋白的RPMI-1640或DMEM细胞培养基中,并使未结合胆红素,鹅去氧胆酸,胆酸和氯化铵的浓度分别在171～342、 80～160、20～40和240～400 μmol/L范围内;(2)或者是先将未结合胆红素制备成胆红素二钠后,再将其与鹅去氧胆酸,胆酸、氯化铵按照上述同样浓度范围先后溶解在不含人血白蛋白的无血清细胞培养基中.上述两种不同方法配制的组合物放置在4℃的环境中,分别检测其在0、12和24 h组合物中各物质的浓度. 结果 在4℃时,以未结合胆红素、鹅去氧胆酸、胆酸和氨为主要成分所组成的组合物,组合物中各物质在0、12和24 h时性质稳定,浓度变化差异无显著性( P >0.05).结论 在4℃时,以浓度分别在171～342 μmol/L未结合胆红素、 80～160 μmol/L鹅去氧胆酸、20～40 μmol/L胆酸和240～400 μmol/L氯化铵,所组成的组合物性质稳定,能够在同一基线水平检测生物人工肝的体外功能.
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洗涤混合血小板的质量和部分体外功能的测定
目的 了解混合白膜层(BC)法制备的洗涤混合血小板(洗涤混合BC-PC)的质量和体外功能,为临床应用提供质量依据.方法 400ml/袋新鲜全血在4～6h内分离出的BC在22℃静置过夜,6袋同血型的BCs混合、制备成BC-PC,用生理盐水洗涤,用血细胞计数仪测定该洗涤混合BC-PC的血小板含量和红细胞残留量、用Nageotte白细胞计数板测定白细胞残留量、用比浊法测定大聚集率、用流式细胞计数仪测定CD41和CD62p阳性表达率,并测定该制品的Ph值和血浆蛋白清除率.结果 血小板含量≥2.5×1011/袋,白细胞的残留量达到106/袋,血浆蛋白清除率≥98%,胶原蛋白诱导的大聚集率＞90%,CD62p阳性表达率平均为19.52%.结论 生理盐水洗涤混合BP-PCs的质量符合单采血小板和洗涤红细胞的标准,具有较好的聚集功能,洗涤并未加强血小板的活化,可以用于临床输注.
