人用禽流感疫苗猴的一般毒性

高致病性禽流感是由高致病性禽流感病毒所引起的禽类烈性传染病.近年来,世界各国都在积极研制人用禽流感疫苗,但与之相关的疫苗安全性评价的报道却较少.因此,我们对家蚕生物反应器生产的新型人用禽流感疫苗进行了猴一般毒性实验,为其临床上的应用提供科学依据.

美国发明器官体外保存仪器/德国开发出新型禽流感疫苗/微创冷热能刀研制成功/适量饮啤酒有助减轻放射线损害

H5N1亚型人禽流感疫苗研究进展

H5N1亚型高致病性禽流感病毒(highly patho-genic avian influenza,HPM)首先发现于禽鸟类.1997年,香港报道了人类感染H5N1亚型禽流感病毒的病例,证实其不仅能够在禽鸟中流行,而且能够感染人类并导致患者死亡[1].目前,全球已有50多个国家从禽鸟类分离到了H5N1亚型高致病性禽流感病毒,14个国家曾发生H5N1亚型病毒感染人类的事件.截至2008年4月15日,WHO报道禽流感确诊病例380例,死亡240例,病死率高达63.2%[2].人禽流感已成为全球新的重大公共卫生问题.在抗病毒药物不断发生耐药的情况下,安全有效的疫苗可能是降低发病率和病死率,减少大规模流行带来的经济损失的重要的公共卫生方法之一[3],人禽流感疫苗的研制已成为当务之急[4]!本文就H5N1亚型禽流感病毒疫苗相关抗原以及疫苗研发进展作一阐述.

鸭不同MHC单倍型对禽流感重组疫苗免疫效果的影响

目的 不同品系的鸭对禽流感(AI)疫苗诱导的效价有差异,分析这种差异是否与主要组织相容性复合体(MHC)有关.方法 用表达H5亚型禽流感HA基因重组鸭瘟活载体疫苗免疫抗原提呈相关转运体TAP基因等位基因型不同的4种SPF鸭,比较其血清HI动态变化.结果 免疫后连续观察的9周中,B3群SPF鸭HI抗体效价始终显著高于另外3个群.结论 鸭的不同MHC单倍型可能与AI疫苗的不同免疫效力相关.

人用H5N1禽流感疫苗免疫动物效果观察

目的 将用禽流感毒种R1203株按3种生产工艺生产的疫苗进行动物接种,观察疫苗的免疫效果.方法 用不同剂量的3种工艺生产的禽流感疫苗,分别免疫大鼠和家兔,肌肉接种2针(隔14d),首针后14和28 d静脉采血,测定接种1针和2针后,动物血清中血凝抑制抗体和中和抗体的产生情况.结果 大鼠的抗体反应较家兔敏感;大鼠和家兔在疫苗接种1针后14d,都能产生血抑抗体,滴度可达1:40,但中和抗体滴度都很低,几乎测不到;接种2针后,血抑抗体或中和抗体反应都显著高于第1针;裂解-2苗接种大鼠和家兔后的抗体反应普遍高于另2种疫苗,且家兔量-效反应明显.结论 裂解-2疫苗优于其他2种;中和抗体能正确反应疫苗的质量;H5N1禽流感疫苗的效力试验可用于免疫家兔测定中和抗体和临床前研究的动物试验,用15 μg血凝素(HA)接种家兔2针,血清中和抗体滴度达1:40或以上.

人用H5N1禽流感疫苗毒种检定及毒种库建立

目的 为了研制人用H5N1禽流感疫苗,按照《中国药典》三部"生物制品生产和检定用菌毒种管理规程"中的要求,建立用于生产禽流感疫苗的毒种库.方法 从国外引进2株H5N1禽流感疫苗的毒种(R1194和R1203),进行全面检定,建立三级种子库,即原代、主代和工作代,用于疫苗生产.结果 引进的R1194和R1203 2个毒株能在胚蛋中大量增殖并稳定传代;与普通流感A1,A3,B作交叉血凝抑制试验和交叉单向免疫扩散试验表明,符合H5N1禽流感病毒的特征;经对血凝素序列测定,证实了引进的2毒株为H5N1禽流感病毒;测得的序列与原始株序列比较可知,2毒株均已去除有毒基因,属弱毒株;确定2毒株的P2为原代,P4为主代,P5为工作代.结论 引进的R1194和R1203毒种为H5N1禽流感减毒株,可用于禽流感疫苗的生产.

人用H5N1禽流感疫苗检定评价

目的 选用H5N1禽流感毒种(R1194和R1203),按设计的生产工艺,制成的疫苗进行全面检定,选取其中较好毒株生产的疫苗,用于以后人用禽流感疫苗临床前研究的动物免疫.方法 利用从国外引进2株H5N1禽流感病毒,设计生产3种疫苗(全病毒、裂解-1、裂解-2)的纯化工艺,优化纯化条件,全面检定制成的疫苗,比较2毒种生产疫苗的质量.结果 2毒株在接种滴度104EID50/ml(半数鸡胚感染剂量/ml),培养温度34.5℃,培养时间3 d的条件下,病毒增殖滴度较高;检定结果证明,制成的所有疫苗中反映质量的内毒素、卵清蛋白、总蛋白、总蛋白与血凝素之比这4项指标,明显优于国家标准;3种工艺疫苗的电镜形态完全不同;经十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE),全病毒疫苗和裂解-2疫苗的蛋白条带形态相似,但裂解-1疫苗在32 KD左右的条带缺失;毒种R1203株疫苗的产量明显高于R1194株.结论 设计的3种生产疫苗的纯化工艺,均可生产出高质量的疫苗;毒种R1203株的疫苗产量高于毒种R1194株;可用R1203毒株,按3种不同工艺生产的疫苗接种动物,观察免疫效果.

H5N1人用禽流感疫苗免疫原性检测方法的建立

目的 确定人用禽流感疫苗免疫原性检测方法.方法 用禽流感病毒R1203株制备疫苗,以不同剂量免疫家兔,检测血清中的血凝抑制抗体和中和抗体,并进行交叉血凝抑制试验、交叉单向免疫扩散试验和交叉中和试验.结果 R1203株疫苗接种家兔1针后14 d,中和抗体和血抑抗体滴度均较低;第2针后14 d均明显升高.血抑抗体量-效反应不明显,而中和抗体量-效反应明显.交叉血凝抑制试验显示,异型之间普遍有交叉反应,滴度大部分不低于1:40.单向免疫扩散试验显示异型之间无交叉反应.禽流感疫苗抗血清不能中和人流感病毒,但能中和同型病毒(R1194),滴度可达1:240.结论 中和抗体能正确反映疫苗的免疫原性;检测中和抗体的方法可用于禽流感疫苗的效力试验.

人用禽流感疫苗研究渐入佳境

由高致病性禽流感病毒导致的人流行性感冒(简称流感)发病和死亡迄今仍严重危害人类健康和公共卫生安全.据世界卫生组织(WHO)报道,自2003年12月～2006年7月,全球共报告131例死于禽流感;我国已累计报告人感染高致病性禽流感病例19例,死亡12例,报告病例的省份11个.对于人禽流感,目前尚无有效的特异性预防手段,而高致病性禽流感病毒一旦突破人群免疫屏障,演变为人-人间可传播的高致病性流感病毒,将造成大量的感染和死亡病例.进行有效的疫苗接种是迅速建立人群免疫屏障,阻断流感大流行的蔓延,减少和降低其危害的有效手段.为此,世界各国迅速开展了禽流感疫苗的研制,特别是人用禽流感预防性疫苗的研制.

禽流感病毒的免疫原性及其疫苗的研究进展

禽流感引起世界性大流行的主要原因与禽流感病毒(AIV)表面抗原血凝素(HA)和神经氨酸酶(NA)频发的变异有很大关系,抗原的变异使得AIV可以逃逸机体的免疫防御,而且使许多应用中的疫苗失去防御效果.随着分子生物学的发展,人们对AIV分子结构、免疫原性及抗原变异的分子基础都有了较深入的认识,相应地开发出了一些更加安全有效的疫苗,本文将对AIV免疫原性的特点及抗AI疫苗的研究进展作一综述.