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LC－MS/MS检测生物检材中雷公藤甲素和雷公藤酯甲
目的：建立生物检材中雷公藤甲素和雷公藤酯甲的液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）分析方法，并进行方法学验证。方法0.4 mL血液、尿液或0.4 g肝组织加入内标混匀后用乙酸乙酯进行提取，提取物经Allure PFP Propyl柱（100 mm×2.1 mm，5μm）分离，以甲醇-20 mmol/L乙酸铵溶液梯度洗脱，采用电喷雾正离子化（ESI+）、多反应监测检测雷公藤甲素和雷公藤酯甲。结果各生物检材中雷公藤甲素和雷公藤酯甲在相应的线性范围内线性良好（r>0.9950），检出限均为2 ng/mL或2 ng/g，回收率为61.08%~102.98%，日内精密度和日间精密度均小于12.58%，准确度为90.61%~105.80%。结论所建方法简便、选择性好，适用于同时分析各种生物检材中的雷公藤甲素和雷公藤酯甲，为雷公藤中毒的法医学鉴定和临床诊治提供技术保障。
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雷公藤甲素抑制大鼠主动脉平滑肌细胞增殖的作用及机制
目的观察雷公藤甲素(T10)对小牛血清介导的平滑肌细胞(SMCs)增殖的抑制作用,及其对细胞DNA周期的影响.方法体外主动脉SMCs培养、结晶紫染色法测定细胞数和流式细胞仪技术.结果 T10明显抑制指数增殖状态SMCs增殖(P＜0.01),抑制作用呈剂量依赖方式,有部分可逆性.细胞DNA周期分析,T10作用后,指数增殖期SMCsG0/G1期及G2/M期细胞比例均显著下降(P＜0.05),S期细胞比例却明显升高(P＜0.01),细胞凋亡率升高非常显著(P＜0.01).T10作用后静止状态SMCs(0.5%小牛血清培养)无变化.结论在实验采用的浓度范围内,T10对小牛血清刺激的SMCs指数增殖有明显抑制,其机制可能与T10促进G1期SMCs进入并阻滞于S期,发生凋亡有关.
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雷公藤甲素对大鼠平滑肌细胞增殖和分泌细胞因子的影响
目的观察雷公藤甲素(T10)对平滑肌细胞(SMCs)在肿瘤坏死因子(TNF)、白细胞介素6(IL-6)和氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)作用下增殖和分泌的影响.方法体外主动脉SMCs培养,结晶紫染色法测定细胞数,细胞毒法测定TNF,依赖细胞株MTT比色测定IL-6.结果 T10浓度依赖性抑制TNF、IL-6和ox-LDL促SMCs增殖作用,对指数增殖期SMCs自分泌及在脂多糖(LPS)、ox-LDL刺激下分泌TNF、IL-6,TNF和IL-6的相互诱生亦有明显抑制(P＜0.01).结论 T10可以抑制SMCs增殖和分泌TNF、IL-6.
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雷公藤甲素抗胶质瘤作用分子机制的研究进展
多形性胶质母细胞瘤的发生与发展中存在多个信号转导通路的异常,包括Rb信号通路、P53信号通路、MAPK信号通路、PI3K信号通路和细胞凋亡信号通路等.近期研究发现雷公藤甲素能够靶向恶性胶质瘤细胞中的多种异常通路,抑制胶质瘤细胞的增殖并诱导凋亡.本文将对胶质瘤细胞中的信号转导通路的异常以及雷公藤甲素靶向治疗胶质瘤的研究进展进行综述.
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雷公藤甲素(TP)促进GFAP转基因荧光小鼠脊髓损伤恢复的机制研究
目的:研究雷公藤甲素(TP)促进胶质纤维酸性蛋白(GFAP)转基因荧光小鼠脊髓损伤恢复的机制.方法:选取健康雄性GFAP转基因荧光小鼠120只进行研究,将其以随机数字表法均分成假手术组、二甲基亚砜对照组、TP治疗组以及甲基强的松龙组.分别予以脊髓损伤造模处理,随后予以给药.其中假手术组与二甲基亚砜对照组分别注射剂量相同的二甲基亚砜生理盐水溶液,TP治疗组予以腹腔注射含有浓度为0.2mg/kg TP的二甲基亚砜生理盐水溶液,甲基强的松龙组则注射30mg/kg的甲基强的松龙.比较四组小鼠在造模后不同时间点的运动功能恢复情况,分别采用RT-PCR、免疫组化以及Western blot法检测四组小鼠Bcl-2、caspase-3、GFAP、MAP2的表达情况.结果:TP治疗组与甲基强的松龙组造模后7d、14d、28d后肢运动功能BBB评分高于二甲基亚砜对照组(均P<0.05).TP治疗组与甲基强的松龙组造模后7d、14d、28d后Bcl-2、caspase-3、MAP2表达水平高于二甲基亚砜对照组,而GFAP表达水平低于二甲基亚砜对照组(均P<0.05).结论:TP可有效促进GFAP转基因荧光小鼠脊髓损伤恢复,其主要机制可能与上调Bcl-2、caspase-3、MAP2表达水平以及下调GFAP表达水平有关.
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中药成分雷公藤甲素可抗胰腺癌
美国明尼苏达大学研究人员报告说,小鼠模型显示在传统中药中有悠久使用历史的天然植物产品——雷公藤甲素对治疗胰腺癌有效.此前有研究表明,胰腺癌细胞可能含有过多HSP70蛋白,后者能保护癌细胞免于死亡.明尼苏达大学研究人员发现,雷公藤甲素可降低胰腺癌细胞中的HSP70浓度,进而减少小鼠体内的肿瘤细胞.
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雷公藤甲素对CIA大鼠外周血单个核细胞糖皮质激素受体表达的影响
目的观察胶原诱导的关节炎(CIA)大鼠外周血单个核细胞糖皮质激素受体(GR)和内源性皮质醇的变化情况以及雷公藤甲素对其的影响.方法于Wistar大鼠背部及尾根部多点皮内注射年II型胶原乳剂制作CIA动物模型,经过雷公藤甲素治疗后,用放射免疫分析法(RIA)测定大鼠外周血血清皮质醇,用放射配体结合法测定外周血单个核细胞GR位点数.结果:与正常对照组相比,CIA模型组外周血血清皮质醇升高外周血单个核细胞GR位点数下调.经过雷公藤甲素治疗后,以上指标均与正常对照组比较有差异(P<0.05).结论通过观察雷公藤甲素及地塞米松对CIA大鼠外周血单个核细胞GR位点数的不同影响,初步证明了雷公藤甲素使通过兴奋下丘脑一垂体-肾上腺轴(HPAA)来下调细胞仙的GR.为雷公藤甲素在临床治疗RA提供了实验依据,同时雷公藤甲素治疗RA的分子机制还需进一步研究.
