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脂多糖通过调节iNOS表达影响人卵巢癌SKOV3/DDP细胞顺铂耐药性的研究
目的 观察脂多糖诱导的SKOV3/DDP细胞内分泌型一氧化氮合酶(iNOS)表达变化对人卵巢癌SKOV3/DDP细胞株顺铂耐药性的影响,并初步探讨机制.方法 体外培养SKOV3/DDP细胞,分为对照组、顺铂组、脂多糖(Lipopolysaccharides,LPS)组和联合用药组共4组,对照组给予常规不加血清培养基,顺铂组给予10 μg/ml顺铂,LPS组给予浓度为1 μg/ml的LPS,联合用药组给予10 μg/ml顺铂和1μg/ml LPS,均作用24 h.MTT法检测各组细胞活力;蛋白免疫印迹法观察各组iNOS表达;流式细胞术检测各组细胞凋亡情况;间接免疫荧光法观察各组细胞激活型Caspase-3表达.结果 联合用药组细胞活力明显低于顺铂组(P＜0.05);顺铂组与对照组iNOS表达差异无统计学意义(P＞0.05),LPS组和联合用药组iNOS表达水平明显高于对照组(P＜0.05),且联合用药组高于LPS组(P＜0.05);流式细胞术结果显示联合用药组细胞凋亡率明显高于顺铂组(P＜0.05),且通过间接免疫荧光法显示联合用药组细胞激活型Caspase-3表达高于顺铂组(P＜0.05).结论 LPS能够降低人卵巢癌SKOV3/DDP细胞顺铂耐药性,这可能与其提高SKOV3/DDP细胞内iNOS表达水平有关.
关键词： 脂多糖 顺铂耐药性 iNOS SKOV3/DDP细胞 -
雷公藤多甙对耐顺铂人上皮卵巢癌细胞体外活性的影响及机制研究
目的:探讨传统中药雷公藤多甙(Tripterygium Wilfordii Hook.F.,GTW)对耐顺铂人上皮卵巢癌细胞体外活性的影响及机制研究.方法:将顺铂、不同浓度雷公藤多甙及二者联合处理SKOV3/DDP细胞24 h,于倒置相差显微镜及荧光倒置显微镜下观察细胞形态学变化;采用Hochest 33258染色法计算细胞平均凋亡率;流式细胞术检测细胞周期变化;Western blot检测P13K/Akt/NF-κB信号通路相关因子PI3K、T-AKT、p-AKT(ser473)、IκBα、NF-κB、Bcl-2的表达变化.结果:SKOV3/DDP细胞经不同浓度雷公藤多甙处理24 h后,出现典型的凋亡样改变;且凋亡率呈浓度依赖性,顺铂联合组凋亡率较相应单药组明显升高;SKOV3/DDP细胞经雷公藤多甙处理24 h后,S期细胞比例明显升高,升高程度呈浓度依赖性(P<0.05),雷公藤多甙与顺铂联合组S期细胞比例与相应单药组相比均明显升高;雷公藤单药及雷公藤、顺铂联合处理SKOV3/DDP细胞24 h后,p-AKT、NF-κB、Bcl-2蛋白表达明显下调.结论:雷公藤多甙可使耐顺铂人上皮卵巢癌SKOV3/DDP细胞周期阻滞于S期并诱导其凋亡,与小剂量顺铂联用效用明显增加,其机制可能与p-AKT、NF-κB、Bcl-2表达下调,抑制P13K/Akt/NF-κB信号通路有关.
关键词： 雷公藤多甙 SKOV3/DDP细胞 卵巢癌 凋亡 化疗增敏 -
磁性纳米Fe_3O_4对卵巢癌细胞耐药性的逆转作用及其与凋亡相关基因的关系
背景与目的:目前认为多药耐药(multi-drug resistance,MDR)是卵巢癌化疗失败和复发的主要原因.本研究探讨磁性纳米Fe_3O_4颗粒对卵巢癌细胞(SKOV3/DDP)耐药性的逆转作用及其与凋亡相关基因的关系.方法:将卵巢癌细胞的耐药株SKOV3/DDP分为对照组、顺铂组(DDP组)、磁性纳米Fe_3O_4颗粒组(Fe_3O_4-MNPs组)、DDP+磁性纳米Fe_3O_4颗粒组(DDP+Fe_3O_4-MNPs组)4个组,用MTT比色法检测对细胞增殖的抑制作用,流式细胞术测定细胞凋亡,电感耦合等离子体原子发射光谱法测细胞内顺铂的含量,RT-PCR检测凋亡相关基因Bcl-2和Survivin mRNA在SKOV3/DDP中的表达.结果:Fe_3O_4-MNPs组细胞耐药性的逆转倍数为2.259.DDP+Fe_3O_4-MNPs组细胞凋亡率[(42.1±5.6)%vs.(26.9±4.1)%]及细胞内铂含量[(0.074±0.006)μmol/L vs.(0.057±0.003)μmol/L]均高于DDP组(P＜0.05),其差异有统计学意义(P＜0.05).DDP+Fe_3O_4-MNPs组细胞bcl-2、survivin mRNA表达均低于DDP组,其差异有统计学意义(P＜0.05).结论:磁性纳米Fe_3O_4颗粒可逆转卵巢癌细胞对顺铂的耐受性,作用机制可能与其降低抗凋亡基因bcl-2和survivin mRNA表达有关.
关键词： 磁性纳米Fe_3O_4颗粒 卵巢肿瘤 SKOV3/DDP细胞 耐药 逆转 凋亡相关基因
