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蛋白芯片标记系统的优化研究

罗进;李丁;张文红;王琰;杨浩;朱文伟;夏琳;韩锋产;阎小君

摘要: 目的: 探讨一种能够更好的制备单一均匀的纳米免疫金颗粒的方法,使蛋白芯片在临床诊断疾病时更为灵敏、准确.方法: 利用不同的方法制备3种胶体金,用分光光度计对其均一性和颗粒大小进行评价;用麦氏方法寻找出3种胶体金的佳蛋白标记量;根据免疫金的制备条件设计5种离心条件,制备出15种免疫金;利用质控蛋白芯片、梅毒检测蛋白芯片和弓形虫检测芯片分别对15种免疫金显色,通过XK2100阅读仪得到其相应的灰度值,分析这些数值来确定免疫金的稳定性和灵敏度,终确定相对优化的免疫金及其制备工艺.结果: 在制备200 mL胶体金的3种配方中以400 g/L氯金酸50 μL与10 g/L的柠檬酸三钠溶液8 mL得到的胶体金颗粒较为均匀;而该胶体金以30 100 g,离心2次得到的免疫金能够在灵敏度和稳定性之间达到一个较好的平衡点.结论: 改进后的免疫金制备方法是更优良的方案.

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