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siRNA沉默HIF-1α在缺氧状态下对鼻咽癌细胞VEGF表达的影响

曾伟;张建国

摘要: 目的 观察体外乏氧培养条件下鼻咽癌细胞系CNE-Ⅱ中缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)和血管内皮生长因子(VEGF)的表达,探讨HIF-1α在低氧条件下对鼻咽癌血管生成的调控作用.方法 CoCI2化学缺氧法模拟肿瘤缺氧环境,RT-PCR、免疫印迹法(Western blot)分别检测缺氧状态下HIF-1α和VEGF 在mRNA和蛋白水平的表达.采用化学合成小干扰RNA (siRNA)介导的RNA干扰技术(RNAi)转染CNE-Ⅱ细胞.观察转染后HIF-1α沉默效果.结果 低氧条件下,CNE-Ⅱ细胞HIF-1α mRNA水平稳定,蛋白表达显著升高,而VEGF mRNA和蛋白的表达均显著升高.siRNA转染CNE-Ⅱ后能够显著下调HIF-1α的基因表达,同时VEGF基因的表达也受到明显抑制.结论 缺氧促使CNE-Ⅱ细胞HIF-1α在蛋白水平表达升高,并通过转录激活VEGF的机制调控鼻咽癌血管生成.

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