全髋关节假体聚乙烯磨损和界膜组织学特征的研究

目的 通过对聚乙烯假体表面进行扫描电镜观察,分析假体磨损方式,并结合假体周围界膜的组织学表现探讨其中的规律.方法 临床翻修手术中采集12个国产全髋聚乙烯假体,通过扫描电镜观察表面磨损情况.同时测算聚乙烯摩擦界面磨损总量,并采集相应患者的假体周围组织进行组织学切片染色和定量评分,将磨损程度与组织学表现进行相关分析.结果 聚乙烯表面的磨损特征存在差异,骨水泥三体磨损颗粒存在时多表现为以折痕、台阶和压坑形成为特征的塑性磨损;金属三体磨损颗粒多表现为以犁沟、划痕形成为特征的切削磨损.假体磨损越严重,假体周围慢性异物炎性组织学反应越明显,二者之间存在相关性.结论 三体磨损颗粒的存在使聚乙烯假体磨损更加严重,其表现形式各有特点.磨损颗粒在界膜内蓄积并可引起显著的组织学反应.

犬正常前列腺导管系统形态的初步研究

目的 研究犬正常前列腺导管系统的三维结构,探讨后尿道高压导致前列腺尿液返流(IPUR)的机理. 方法 利用铸型法及扫描电镜技术(SEM),依据IPUR现象,制造前列腺部尿道高压,对8只1～2岁雄性Beagle犬正常前列腺灌注丙酮和丁酮各半的混合ABS液,进行铸型初步研究. 结果 6例Beagle犬正常前列腺标本铸型成功,2例失败.铸型腐蚀后犬前列腺腺体表面呈小柱状微突起,剖面下腺导管主要从尿道开口处向外分支走行,每一主支导管反复分支,呈树状分支结构,Y形导管＞90%,多为6分支形,导管末端呈囊状.主支直径(0.37±0.14)mm,长(1.14±0.04)mm.外周腺导管与尿道夹角大于其他区,分支多且管壁光滑,导管与尿流方向垂直或逆向.外周腺腺泡呈椭圆形,表面较光滑.中央腺腺泡表面粗糙,呈网孔状和火山口样凹陷. 结论 铸型法及SEM为研究前列腺导管系统的三维结构创造了条件,清晰显示了犬正常前列腺导管系统的立体形态、走行.从形态学角度说明IPUR易发生于外周腺,提示前列腺炎好发于外周腺,进一步证实后尿道高压可导致IPUR.

人脐带间充质干细胞培养上清液与阿莫西林体外联合应用对金黄色葡萄球菌的结构影响

目的 探讨联合应用人脐带间充质干细胞(hUCMSC)上清液与阿莫西林对烧伤创面分离的金黄色葡萄球菌的抗菌活性研究.方法 (1)取足月剖宫产健康胎儿的脐带组织,分离、培养、鉴定hUCMSC后选取第3代细胞接种于4个6孔板,对应培养后分别提取其上清液用于以下实验,其中l组为100 ng/mL脂多糖预处理hUCMSC培养上清液.选取内蒙古烧伤研究所患者创面分离培养的金黄色葡萄球菌菌株进行体外增殖培养,按随机数字表法分为阿莫西林对照组(简称对照组)、阿莫西林+上清液组(简称上清液组)、阿莫西林+上清液+ LL-37抗体组(简称抗体组)、阿莫西林+100 ng/mL脂多糖预处理上清液组(简称预处理组).于7、12、24、48 h读取各组阿莫西林E-Test药敏试条的低抑菌浓度(MIC)值,计算上清液组、抗体组、预处理组阿莫西林的部分抑菌浓度(FIC)指数.(2)细胞、细菌分组和培养同实验(1),选取金黄色葡萄球菌菌株进行体外增殖培养24 h,每组在抑菌环附近取菌,涂片固定,扫描电镜检测.(3)对数据行析因设计方差分析、单因素方差分析、LSD-t检验、Kruskal-Wallis检验、Mann-Whitney检验.结果 (1)阿莫西林E-Test药敏试条结果:在不同时相点(7、12、24、48 h),对照组阿莫西林对金黄色葡萄球菌的MIC大于上清液组、抗体组和预处理组(Z值为6.609 ～6.655,P值均小于0.05),抗体组阿莫西林对金黄色葡萄球菌的MIC大于上清液组和预处理组(Z值为5.797 ～6.656,P值均小于0.05),上清液组阿莫西林对金黄色葡萄球菌的MIC大于预处理组(Z值为5.923 ～6.656,P值均小于0.05).在不同时相点(7、12、24、48 h),上清液组、预处理组阿莫西林的FIC指数均小于0.5,抗体组小于或接近0.5且小于1.0.(2)扫描电镜结果:对照组金黄色葡萄球菌的排列变得松散,无规律,不能聚集成葡萄状,细胞间的界限略变模糊,部分胞体间界限明显.上清液组细菌形状无圆形结构,部分胞体壁、细胞膜已经被破坏,可见少量穿膜孔道,细胞壁的降解物多糖类物质在菌体细胞附近聚集,从而使细胞黏结成团块状.抗体组细菌形状变形,细胞壁和细胞膜界限敏明显,细胞膜凹陷.预处理组细胞膜已经被完全破坏,可见大量穿膜孔道,可见部分细胞崩解.结论 hUCMSC上清液联合阿莫西林协同抗菌,可以有效增强抗菌作用,中和敲除LL-37后,hUCMSC上清液的协同抗菌作用明显降低.适宜浓度脂多糖预处理后hUCMSC上清液的协同抗菌作用增强.

法乐四联症心肌纤维扫描电镜的观察

为选择法乐四联症手术的适宜年龄,应用扫描电子显微镜对30例法乐四联症病人的右室流出道心肌纤维进行观察,结果可见多数心肌纤维排列紊乱、增生、肥大;肌纤维表面横纹的宽度粗细不均,有的异常增宽、增高.细胞表面凹凸不平,在肌膜下可见异常大量堆积的线粒体.心肌纤维内的肌原纤维排列方向紊乱,致使横小管不在同一水平.心肌间质明显增生.随着年龄的增长,上述改变愈重.因此法乐四联症病人,在条件允许下,应尽早手术.

人脂肪间充质干细胞在聚乳酸-羟基乙酸上的黏附、增殖与分化能力

目的 探讨人脂肪间充质干细胞在可降解骨基质材料聚乳酸-羟基乙酸(PLGA)上的黏附、增殖和分化能力,为进一步体内回植提供实验依据.方法 等比混合聚乳酸(PLA)和聚乙醇酸(PGA),有机溶剂注模法制备PLGA.体外培养人脂肪间充质干细胞,复合PLGA,通过扫描电镜观察人脂肪间充质干细胞在PLGA上的黏附、增殖,以及在成脂诱导情况下细胞形态的变化.结果 合成的PLGA呈多孔状,孔隙率为85 % ,孔径为100～400 μm.人脂肪间充质干细胞可在PLGA上黏附、增殖、分泌细胞外基质,并可在成脂诱导剂的作用下分化为圆形的成脂样细胞.复合后14 d,人脂肪间充质干细胞和细胞外基质已将基质材料颗粒完全覆盖.结论 人脂肪间充质干细胞能在PLGA上黏附、增殖,PLGA可作为人脂肪间充质干细胞的载体和组织工程的支架材料.

不同导尿管材料对大肠埃希菌生物膜形成的影响

目的研究不同导尿管材料对大肠埃希菌生物膜形成的影响.方法采用体外平板法经过细菌孵育对未硅化处理乳胶、硅化处理乳胶、全硅3种导尿管材料膜片制备生物膜模型,通过菌落计数法确定黏附于导尿管材料生物膜内细菌菌落数量并用扫描电镜观察生物膜的形态.结果全硅橡胶形成生物膜细菌少,平均菌落数为6.98×103 CFU/cm3,硅化乳胶材料黏附生物膜的膜内平均菌落数为3.72×105CFU/cm3,未硅化处理乳胶形成生物膜的细菌多,平均菌落数为6.74×105 CFU/cm3,三者两两比较,统计学均有差异显著性(P＜0.01);扫描电镜观察未硅化处理乳胶、硅化处理乳胶导尿管、全硅导尿管材料的生物膜内均有细菌团块聚集,可见纤维素样物质交联;但在全硅导尿管材料中,有的部位仅见大量细菌附着,无纤维素样物质交联.结论3种导尿管材料中,全硅导尿管材料不容易形成细菌生物膜,临床长期留置导尿的患者应选择全硅导尿管.

机械通气患者气管内导管生物被膜的观察

目的研究机械通气患者气管内导管生物被膜的形成情况以及生物被膜的形态和病原学分布特征及耐药性. 方法前瞻性研究了27例施行人工气道(气管插管和气管切开)并机械通气的患者拔除的气管内导管,分别进行扫描电镜观察生物被膜的形成,并进行细菌培养及耐药性检测. 结果 27例气管导管中培养阳性25例,占92.6%,以粪肠球菌、金黄色葡萄球菌及铜绿假单胞菌常见,均呈高度耐药,但与痰培养结果差异无明显性;扫描电镜观察26例均可见膜状物,并可见细菌团状聚集,其间可见纤维样物质交联,膜状物中可见网状裂纹,其上附着大量细菌. 结论机械通气时气管内导管表面易黏附细菌,形成生物被膜,生物被膜的形成可能与VAP的发生有关,并常常导致难治性感染.

扫描电镜观察体内留置双J管表面生物膜的形成

目的 观察植入人体内的双J管表面生物膜的形成情况.方法 对42例泌尿外科手术后植入人体内的双J管分成4段分别作细菌学检验,然后用扫描电镜观察其表面生物膜的形成.结果 42份双J管标本中,4段双J管均有同种细菌生长20例(47.6%),各段双J管细菌培养阳性率分别为:肾盂段81.0%、输尿管上段64.3%、输尿管下段71.4%和膀胱内段83.3%,共培养出18种126株细菌,以大肠埃希菌(23.0%)、铜绿假单胞菌(15.9%)、棒杆菌属(15.1%)和表皮葡萄球菌(13.5%)多见;电镜扫描双J管表面观察到未经使用过的双J管表面呈凹凸不平,但干净无任何附着物或结晶体,植入体内的双J管表面均有数量不等的炎性附着物或结晶体,可观察到细菌结构,生物膜的细菌被包裹在大量的纤维膜之中.结论 植入体内的双J管表面易形成细菌生物膜,这可能是导管相关感染的因素之一.

不同清洗剂对内镜生物膜清除的效果评价

目的 评价含酶及非含酶清洗剂不同作用时间对内镜生物膜的清除效果.方法 建立内镜生物膜模型,两种含酶清洗剂及一种非含酶清洗剂分别作用于生物膜3、5、7min,运用菌落计数测定及扫描电镜观察内镜生物膜细菌及生物膜的变化.结果 空白对照组及3种清洗剂作用3、5、7min后,测定的生物膜平均标准菌落计数为(5.44±0.19)lgCFU/cm2,四重酵素清沽剂:(4.59±0.51)、(4.60±0.52)、(4.63±0.57)lg CFU/cm2,Scopezime:(4.70±0.52)、(4.68±0.50)、(4.63±0.49)lg CFU/cmz,Intercept:(1.31±0.14)、(1.28±0.11)、(1.30±0.13)lg CFU/cm2;不同清洗剂分别作用于生物膜3、5、7min后,含酶清洗剂处理组所残留的生物膜明显多于非含酶清洗剂处理组,而同种清洗剂不同时间处理后差异不明显.结论 两种含酶清洗剂分别减少了<1个对数级的生物膜细菌,在一定程度上清除了生物膜细菌间胞外基质;而非含酶清洗剂明显地减少了生物膜细菌及胞外基质.

施万细胞和神经干细胞在PLGA支架中共培养的扫描电镜观察

目的扫描电镜观察施万细胞和神经干细胞在生物可降解材料(乙交酯-丙交酯)共聚物(Poly(1actide-co-glycolide acid),PLGA)支架中的生长状态,探讨施万细胞、神经干细胞与PLGA取向支架的细胞亲和性.方法体外培养大鼠神经干细胞和施万细胞,待细胞生长良好,移植接种至PLGA支架上,培养9d后行扫描电镜观察.结果施万细胞与神经干细胞在PLGA支架表面贴附,形态正常,生长良好.迁出神经球的神经干细胞分化成多种形态的细胞紧贴PLGA表面,部分细胞形态类似神经细胞.结论施万细胞和神经干细胞在PLGA支架中生长良好,PLGA对施万细胞及神经干细胞具有良好的细胞亲和性.

生殖系统支原体感染的研究4.感染脲原体的生精细胞扫描及透射电镜观察

前文对解脲脲原体感染的精子扫描与透射电镜的观察已经介绍[1].对于解脲脲原体感染生精细胞国内尚未见报道,扫描电镜与透射电镜的观察更未见报道,现将结果报告如下.

生殖系统支原体感染的研究3.感染脲原体精子扫描及透射电镜观察

性传播疾患中,支原体与衣原体引起的非淋菌性尿道炎发病率已超过淋病,解脲脲原体导致的不孕引人注目[1～4].本文对生殖系统支原体感染,进行了系统研究,现将观察结果,报告如下.

217内淋巴囊:扫描电镜和透射电镜检查的研究

雌激素对小鼠风洞噪声性听力损伤的保护作用

目的 探讨雌激素对暴露于风洞噪声小鼠听觉电生理及耳蜗形态学改变的影响,为噪声性耳聋的预防提供依据.方法 60只小鼠随机分为A、B、C 三组,每组20只,三组小鼠分别暴露于风洞模拟噪声环境中,每天8小时,连续7天.B组于暴露噪声前30 min肌肉注射苯甲酸雌二醇0.15 mg/只,C组暴露噪声结束后30 min肌肉注射苯甲酸雌二醇0.15 mg/只.分别于实验前、接噪3天、接噪7天、脱噪恢复3天、脱噪恢复7天后测试各组小鼠脑干诱发电位(ABR)阈值,取耳蜗标本行扫描电镜检查.结果 三组小鼠在接噪3天、接噪7天的ABR阈值均比实验前增高,但组间无明显差异.三组小鼠在脱噪恢复3天、脱噪恢复7天ABR阈值均比接噪7天有恢复,但雌激素治疗组较其余两组恢复效果明显.扫描电镜显示单纯噪声组损伤重,雌激素预防组损伤次之,雌激素治疗组损伤轻.结论 风洞噪声能造成小鼠听觉电生理及耳蜗形态学的改变；雌激素对小鼠风洞噪声性耳聋有保护作用；雌激素治疗组保护效果较雌激素预防组明显.

人Corti's器扫描电镜观察

目的了解正常人Corti's器的超微结构特征.方法用扫描电镜观察成年人和胎儿的Corti's器.结果成人和胎儿Corti's器基底圈内、外毛细胞排列规则,中圈和顶圈毛细胞排列不规则,内毛细胞以一排,外毛细胞以三排排列.可观察到列外的内、外毛细胞,四排排列和自然缺失的外毛细胞.外毛细胞粗大的静纤毛以及由于固定不及时引起的外毛细胞静纤毛气球样改变.结论用扫描电镜观察成人和胎儿Corti's器的精细结构,发现了毛细胞排列的基本规律和一些异常的形态.及时固定是保存Corti's器结构完好的必要条件.

豚鼠耳蜗盖膜的扫描电镜观察

目的为了更好地理解耳蜗盖膜在听觉产生过程中的作用.方法用扫描电子显微镜观察豚鼠耳蜗盖膜的超微结构.结果在盖膜上表面观察到许多纤维网,相应与内毛细胞静纤毛顶部接触的部位有一条带状结构,在耳蜗的基底圈盖膜的下面观察到外毛细胞静纤毛的压迹,外毛细胞静纤毛的W型印在盖膜下面也形成W型的压迹.结论根据扫描电镜观察的结果讨论了盖膜与内、外毛细胞之间的接触在听力形成的作用.

豚鼠内淋巴管和内淋巴囊的扫描电镜观察

目的 探讨豚鼠内淋巴管和内淋巴囊的表面超微结构特点.方法 用扫描电子显微镜观察正常豚鼠内淋巴管和内淋巴囊的表面超微结构.结果 内淋巴管的管腔面光滑、平整,上皮细胞表面的微绒毛少且短,细胞间隐窝小而少.内淋巴囊近端部上皮细胞表面的微绒毛明显增多、变长,细胞间隐窝明显,偶尔可见细胞顶部的胞饮小泡.内淋巴囊的中间部腔面上皮突起,复合折叠形成褶皱,细胞间隐窝多而大,突向囊腔的细胞多,囊腔内充满细胞和细胞碎片.根据电子密度上皮细胞可分为亮细胞和暗细胞两型,其中暗细胞较多,两型细胞表面均有大量长的微绒毛.细胞顶部可见到较多的胞饮小泡.内淋巴囊远端部的结构与内淋巴管近似,腔面光滑,上皮褶皱小,无细胞间隐窝,上皮细胞以亮细胞为主,表面微绒毛少而短,几乎没有胞饮小泡.结论 内淋巴管及内淋巴囊各部分的结构存在明显的不同,各有特点,这种结构特点可能与其在内淋巴代谢中的不同作用有关.

高强度低频稳态噪声对大鼠耳蜗形态和功能影响的研究

目的：探讨高强度低频稳态噪声对大鼠耳蜗形态和功能的影响。方法42只SD大鼠随机分为2组，分别暴露于频率100Hz和300Hz，声压级153.7dB和158dB的声场中10分钟。暴露前、暴露后即刻、3天和7天分别测试大鼠听性脑干反应阈值（ABR），并取耳蜗标本行扫描电镜观察。结果2组大鼠噪声暴露后听性脑干反应阈值均显著提高，脱离声场3天后仅可轻度恢复，7天后无进一步改善。300Hz组听力损伤更重。2组大鼠内外毛细胞均损伤严重，表现为毛细胞静纤毛缺失、融合及团状变，并可见螺旋器表面渗出性改变。由底圈向顶圈毛细胞损伤逐渐减轻，7天损伤程度较即刻有所减轻。300Hz组损伤较100Hz组重。结论高强度低频稳态噪声可造成大鼠耳蜗形态及功能严重损伤。耳蜗形态损伤以底圈重，外毛细胞损伤较内毛细胞重。

PET滤膜用于承载耳蜗基底膜培养的实验研究

目的：探讨一种适宜耳蜗组织贴壁培养的方法。方法 PET滤膜预先置入层粘连蛋白、鸟氨酸、胎牛血清按2：2：1比例混合均匀的液体中在4℃预孵过夜，选取出生四天的C57BL/6J小鼠作为研究对象。剥取基底膜以PET滤膜作为承载介质培养在加入含青霉素的培液中，48小时后收取样本，进行免疫荧光（一抗goat anti-otoancorin、mouse anti-beta tubu?linⅢ及对应二抗采用cy3 donkey anti goat，647 donkey anti mouse，染核试剂DAPI，phalloidin)观察不同部位细胞，扫描电镜及制备原位超薄切片透射电镜观察体外培养新生小鼠基底膜内外毛细胞、螺旋缘内细胞、螺旋神经元细胞显微结构的改变。结果耳蜗基底膜在PET膜上贴附生长良好。各种细胞的微小结构和超微结构保持正常状态。结论PET滤膜能作为一种新颖的承载基底膜培养的介质。

出生后大鼠听毛细胞纤毛发育过程

目的 观察新生大鼠(P1、P7、P14、P21)耳蜗Corti器的形态结构及排列方式,以便了解听毛细胞纤毛发育的过程.方法 取新生SD大鼠四个阶段的耳蜗,采用扫描电镜对出生后大鼠耳蜗Corti器形态结构进行系统观察.结果 发现这四个阶段在体大鼠耳蜗毛细胞从出生至毛细胞完全发育成熟,绝大部分都是以一排内毛细胞和三排外毛细胞的方式排列的,只有少部分在局部发现多出几个外毛细胞形成第四排.毛细胞的形态结构及排列方式随着时间的改变逐渐发育成熟.P14这个阶段是个重要的时期,Corti器表面柱细胞头板增宽,表面的微绒毛减少,Deiter细胞表面微绒毛也减少,动纤毛从底圈至顶圈逐渐退化已经基本结束,P14这个阶段Corti器各个部分发育已经完全成熟.结论 出生后14天之内,大鼠听毛细胞静纤毛和动纤毛与听器其他细胞形态结构仍不同程度地处于由不成熟剑成熟的逐渐发育过程,为研究大鼠出生后Corti器的发育、听觉功能的建立和完善提供了比较可靠的形态学证据.