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大负荷运动对雌性大鼠雌激素及抗苗勒管激素的影响
目的 探讨大负荷运动对卵巢功能的影响,为防治运动性月经失调,提高训练成绩提供依据. 方法 选择20只动情周期稳定的健康雌性SD大鼠,随机分为两组,实验组和对照组各10只,按预设方案进行跑台训练;动态观察阴道脱落细胞;监测大鼠的体重及血清雌二醇(E2)、抗苗勒管激素(AMH)水平. 结果 随着运动负荷增加,实验组大鼠于第4周起开始出现动情周期紊乱现象;第5、6周实验组大鼠的平均体重[分别为(288.80±8.51)g、(286.70±12.95)g]显著低于对照组[分别为(305.76±7.57)g、(314.67±11.08) g](P均＜0.01);第5、6周实验组大鼠的血清E2水平[分别为(349.86±25.84) pmol/L、(332.14±27.82) pmol/L]显著低于对照组[分别为(412.80±36.81) pmol/L、(417.79±22.24) pmol/L](P均＜0.01),AMH水平[分别为(2.06±0.42)ng/ml、(1.81±0.48)ng/ml]亦显著低于对照组[分别为(2.55±0.50) ng/ml、(2.46±0.55)ng/ml](P均＜0.05). 结论 持续的大负荷运动会造成大鼠动情周期紊乱,血清E2和AMH水平下降,提示大负荷运动应激导致月经失调的发生机制可能与卵巢功能下降有关.
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前动力蛋白2/前动力蛋白受体2基因杂合突变小鼠表型特征
目的 观察前动力蛋白(PK2)、前动力蛋白受体2(PKR2)基因单拷贝丢失后小鼠生长发育及生殖系统发育情况.方法 对比观察PK2+/-、PKR2+/-、以及PK2+/-∶PKR2+/-复合杂合突变小鼠与野生型小鼠体重增长、外生殖器发育情况；免疫荧光染色法观察四组小鼠颅内促性腺激素释放激素(GnRH)神经元分布；阴道冲洗细胞涂片评估法观察小鼠动情周期. 结果 三组杂合突变小鼠体重增长、外生殖器发育及颅内GnRH神经元分布与野生型小鼠相比均无显著差异,但杂合突变小鼠动情周期延长、无规律,双基因杂合突变小鼠表现明显. 结论 PK2、PKR2基因单拷贝丢失后虽不影响小鼠生殖系统和GnRH神经元发育,但雌鼠表现出动情周期紊乱.因此PK2/PKR2通路对生殖系统功能有调节作用.
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2-05 小鼠多终点试验检测美他多辛的雌激素样作用
目的美他多辛(metadoxine,MTDX)是一种治疗酒精中毒性肝病的新药,化学名为吡哆素L-2-吡咯烷酮～5-羧酸酯.在毒理学安全性评价中发现该药可引起大鼠精子减少,交配率和受孕率下降.该试验的目的是探讨其雄性生殖毒性机制是否包括雌激素样作用.方法性成熟NIH雌性小鼠,体重20～25g,卵巢摘除后观察1周,剔除去势不全的小鼠.1周后将小鼠随机分成5组,每组10只.分别灌胃给予MTDX 0、640、1 500和4 000 mg/kg及雌二醇0.2 mg/kg(阳性对照),每天1次,连续5 d.每天阴道涂片观察动情周期.第6天处死,观察子宫/体重比、子宫积液、子宫上皮细胞高度和子宫基质细胞层厚度等指标.结果 MTIDX各剂量组小鼠在5 d中均未出现明显的动情周期,未发现子宫水肿和积液,子宫/体重比、子宫上皮细胞高度和基质细胞层厚度与对照组比较,差异均无显著性.结论在本试验条件下,MTDX在小鼠体内不具有雌激素样作用.
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针刺对动情周期不同阶段大鼠下丘脑性唤起刺激兴奋性神经元电活动的影响
目的:比较针刺不同穴位对动情周期不同阶段大鼠下丘脑性唤起刺激兴奋性神经元电活动的作用,为遴选针刺调节生殖内分泌功能的有效穴位、确定佳治疗时机提供实验依据.方法:雌性SD大鼠,以阴道脱落细胞检测大鼠动情周期.动情前期/动情期大鼠14只,动情间期/动情后期大鼠18只.用玻璃微电极记录下丘脑内侧视前区、弓状核、室旁核部位神经元放电.刺激阴蒂模拟性唤起刺激,记录神经元放电反应,再从颈外静脉给大鼠注射β-雌二醇等, 观察是否有反馈性作用, 进一步鉴定所记录的神经元属性.以该神经元放电为指标,比较在动情周期不同阶段针刺不同穴位(8个)30 s 对这类神经元的效应.实验在氨基甲酸乙酯(10%,1.0～1.2 g/kg)麻醉状态下进行.结果:从针刺的穴位看,动情前期/动情期雌鼠针刺后神经元放电增加的百分率由大到小的顺序为:"子宫""关元""足三里""肾俞""中脘""厥阴俞""内关""膻中";动情间期/动情后期:"关元""子宫""足三里""中脘""肾俞""厥阴俞""内关""膻中".从针刺部位来看,下丘脑与阴蒂刺激相关的兴奋性神经元电活动增加的百分率由大到小的顺序为:下腹部(脐以下)、下肢、下背部(L1-S5)、上腹部(剑突-脐)、背部(T12以上)、胸部(剑突以上)、上肢.结论:针刺能有效调节下丘脑与模拟性唤起刺激相关的兴奋性神经元的电活动,但动情周期相同阶段针刺不同穴位和动情周期不同阶段针刺同一穴位对该神经元的激活效应不同,"子宫""关元"的激活效应较明显.针刺部位或穴位的神经节段支配与生殖器官的神经节段支配越接近, 对下丘脑内性唤起刺激相关的神经元的激活作用越明显.
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电针对动情周期不同阶段大鼠生殖内分泌轴的调节作用
目的:探讨电针调节生殖内分泌相关激素的特异反应穴位、佳治疗时机及作用途径.方法:①选用成熟雌性有正常动情周期的SD大鼠,根据阴道涂片确定动情周期所处阶段.设假电针组、关元组、内关组,每个组当中大鼠分别处于动情间期、动情前期、动情期和动情后期.分别在电针治疗前、电针30 min后即刻、出针30 min从髂外静脉采血,用放射免疫法检测血清促性腺激素释放激素(GnRH)和黄体生成素(LH)浓度.②设损毁组(损毁正中隆起)和假损毁组,观察电针"关元"穴对两组大鼠血中GnRH、LH和雌二醇(E2)的调节规律.结果:①从假电针组可以看出:动情周期不同阶段GnRH和LH水平是不同的,GnRH水平在动情期高,LH水平在动情前期高GnRH和LH的含量变化是同步的;②针刺可以使血中GnRH和LH水平增加,以关元穴组效果明显,在动情间期和动情后期表现更明显;③针刺对GnRH和LH 的调节作用表现出时间性,30 min比60 min明显;④损毁正中隆起后电针对血中GnRH水平仍有一定的调节作用,但对LH和E2水平的调节作用基本消失.结论:相同穴位在动情周期不同阶段对GnRH和LH的调节程度不同,以动情间期和动情后期表现更明显;不同穴位在动情周期相同阶段对GnRH和LH的调节作用不同.针刺对与生殖内分泌相关激素的调节作用主要是通过下丘脑-垂体-性腺轴买现的.
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电针对动情周期不同阶段大鼠GnR H免疫反应表达的研究
目的:探讨电针对下丘脑-垂体-靶腺轴特异性调节规律.方法:成熟雌性SD大鼠按动情周期的4个阶段随机分为假电针组、"关元"组、"内关"组.针刺治疗在早晨9:30开始持续30min,下午15:00时断头取脑组织.通过免疫组织化学染色观察促性腺激素释放激索(GnRH)免疫反应在下丘脑与生殖内分泌相关核团的表达.结果:①动情周期不同阶段GnRH免疫反应表达的数量不同,动情前期和动情期较多;针刺后在内侧视前区、弓状核、室旁核等部位动情周期的不同阶段GnRH免疫反应的表达均有不同程度的增加,尤其是"关元"组在动情间期和动情后期GnRH"强"免疫反应表达增加明显.结论:电针后下丘脑GnRH免疫反应表达明显增加的部位有内侧视前区、弓状核、室旁核等,"关元"组优于"内关",动情间期及动情后期表现明显.
关键词： 电针 动情周期 基因表达促 促性腺素释放激素/代谢 下丘脑/代谢 -
桃红四物汤对寒凝血瘀模型大鼠卵巢功能的影响
寒凝血瘀是临床上引起妇科疾病的常见病机,桃红四物汤是治疗寒凝血瘀、冲任瘀阻所致妇科疾病行之有效的方剂.为探讨寒凝血瘀型妇科疾病的形成机理和桃红四物汤的作用机制,我们观察了桃红四物汤对寒凝血瘀模型大鼠卵巢功能的影响,现报道如下.
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ATF4基因在小鼠动情周期中子宫内膜的表达
目的 探讨转录激活因子4(ATF4)在小鼠动情周期中子宫内膜的表达规律.方法 采用RT-PCR、免疫组织化学和Western blot法分别检测小鼠子宫内膜中ATF4mRNA和蛋白在动情前期、动情期、动情间期和动情后期的表达规律.结果 ATF4mRNA在动情期表达显著高于其他3期(P＜0.05);ATF4蛋白主要在腺上皮细胞和腔上皮细胞胞质表达,其表达规律与RT-PCR的结果基本一致.结论 ATF4在小鼠动情周期子宫内膜中呈动态表达,提示ATF4可能参与了动情周期子宫内膜变化的调控.
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2.128大鼠性别及动情周期对内脏感觉影响的研究
目的研究生理状态下大鼠内脏感觉的性别差异,及雌性大鼠动情周期对内脏感觉的影响.方法选取清洁级成年SD大鼠,雌雄各8只.根据阴道涂片,将雌性大鼠分为两期:动情前期和动情期归为A组(体内雌激素高水平组),动情后期和动情间期归为B组(体内雌激素低水平组),雄性大鼠为C组.采用结肠直肠气囊注气扩张法,分别测定A、B、C三组大鼠的行为反射,重复2个动情周期.
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大鼠去卵巢前后血清雌二醇浓度变化及其对输卵管粘膜上皮的影响
目的研究哺乳动物血清雌二醇与输卵管粘膜上皮细胞高度之间的相关性. 方法据阴道涂片检查将动物分为:动情间期(DE)组,动情前期(PE)组,动情期(E)组,动情后期(ME)组和去卵巢(OVX)组,用放射免疫法检测各组大鼠血清雌二醇浓度,同时在光镜下对输卵管壶腹部、峡部的形态结构进行测量分析. 结果大鼠血清雌二醇浓度依次为:动情期组＞动情前期组＞动情后期组＞动情间期组＞去卵巢组,各组间差异均有显著性;输卵管粘膜上皮高度在动情周期中变化为:动情期组＞动情前期组＞动情间期组＞动情后期组;去卵巢后,输卵管粘膜上皮萎缩. 结论上述两项检测结果经回归分析发现,从动情间期至动情前期再至动情期两者呈正相关.
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骨桥蛋白在动情周期与妊娠早期小鼠输卵管上皮的表达
目的 探讨骨桥蛋白(OPN)在动情周期和妊娠早期小鼠输卵管的表达.方法 70只昆明雌性小白鼠分为动情周期组、妊娠组和假孕组,昆明雄性小白鼠15只用于与雌鼠合笼.取雌鼠动情周期、妊娠和假孕第1～5天的输卵管,利用免疫组织化学染色及半定量分析检测OPN在小鼠输卵管的定位和表达情况.结果 整个动情周期小鼠输卵管上皮组织OPN的免疫染色均呈阳性,动情期的输卵管上皮OPN染色的平均吸光度值(AA)高,动情间期组AA值低;妊娠和假孕第1～5天小鼠输卵管上皮OPN的免疫染色均为阳性.妊娠第4天输卵管上皮OPN染色的AA值高;妊娠组第3～5天OPN染色的AA值显著高于假孕组所对应的妊娠天数(P ＜0.05,P＜0.01,P＜0.05).结论 小鼠动情周期输卵管上皮OPN的表达可能受体内雌激素的调节,妊娠早期小鼠输卵管上皮OPN的表达可能受雌激素和着床前胚胎共同调节.
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超声波终止早孕的母体安全性和遗传毒理评价Ⅱ超声对小鼠的发育毒性和生殖毒性的研究
目的:研究超声波终止早孕的安全性.方法:选用8周龄的ICR小鼠,用不同剂量超声分组辐照后常规交配.诊断组频率5MHz,强度24mW/cm2,照射5min;治疗组频率0.8MHz,强度1.5W/cm2,照射1min.本实验研究从致死、生长发育、外观致畸和行为致畸四个方面评价了两代仔鼠的遗传表型,同时还观察了超声对母鼠动情周期和生殖机能的影响,并统计其肿瘤发病率.结果:各项指标均无显著性差异.结论:一定剂量范围的超声辐照不诱发生殖细胞显、隐性突变的升高,不引起卵巢的机能障碍,也没有致癌作用.该技术的临床应用具有安全性.
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雌性大鼠性激素与骨生化指标相关性研究
目的 研究老年雌性大鼠性激素和骨生化标志物间的关系.方法 选用18月龄老年大鼠作为老年性骨量降低模型,分析大鼠血清FSH、LH、P、E2水平和血清ALP,TrACP活性间的关系,并探讨了老年大鼠体内雌激素的来源问题.结果 老年大鼠的动情周期时相与青年大鼠明显不同,性激素水平发生明显改变.FSH、LH 可以独立于E2而直接对血清TrACP进行调节.结论 骨生化指标和性激素水平有相关性.雌激素降低是引发这一调节过程的重要因素,老年大鼠非生殖系统雌激素所占比例增大.
关键词： 动情周期 性激素 骨代谢标志物 芳香化酶 银染蛋白(AgNOR) -
牙齿移动对大鼠动情周期和雌激素水平的影响
目的探讨正畸施力时间对雌性大鼠动情周期的影响.方法 200只雌性大鼠均分为对照组、加力1次组、加力4次组、假处理1次组和假处理4次组.各组均分为4个亚组,在动情周期不同时段进行相应处理.测定雌激素含量,记录动情周期变化.结果在同一动情周期时段加力的各亚组之间,雌激素测量值的差异有统计学意义(P<0.01);在同一处理方式下各亚组之间,雌激素测量值的差异也有统计学意义(P<0.05).结论加力对动情后期和间期加力组大鼠的动情周期有影响.选择在动情期戴入矫治装置及加力,可减少加力对雌性大鼠的不利影响.
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环磷酰胺对大鼠卵巢结构与功能的影响及机制
目的 探讨环磷酰胺(CTX)对卵巢结构与功能的影响及其相关机制.方法 50只SD雌鼠随机分为模型组和对照组.模型组大鼠首日以50mg/kg负荷剂量腹腔注射CTX溶液,随后以8mg/(kg·d)维持剂量连续腹腔注射CTX溶液14d建立早发性卵巢功能不全(POI)模型;对照组每日腹腔注射等量生理盐水.观察两组大鼠动情周期、性激素水平及脏器组织形态学改变等指标,判断建模效果;TUNEL法检测卵泡内颗粒细胞的凋亡情况,ELISA检测组织匀浆中相关炎症因子含量,并采用Western blotting检测凋亡相关蛋白的表达水平,初步探讨POI的发生机制.结果 与对照组比较,模型组大鼠动情周期紊乱;血清抗苗勒管激素(AMH)、雌激素(E2)水平明显降低(P＜0.01),促卵泡激素(FSH)水平明显升高(P＜0.01);各级卵泡数量明显减少(P＜0.05);子宫内膜萎缩,子宫壁变薄,腺体稀少.与对照组比较,模型组大鼠卵泡内颗粒细胞凋亡增加,组织匀浆肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)及IL-6含量明显升高(P＜0.01),血管内皮生长因子-α(VEGF-α)含量明显降低(P＜0.01),凋亡相关蛋白Bax表达水平明显升高(P＜0.01),Bcl-2表达水平明显降低(P＜0.01).结论 CTX导致大鼠卵巢结构、生殖及内分泌功能发生明显改变,其机制可能与局部微环境改变及Bax/Bcl-2表达失衡引起颗粒细胞凋亡增加有关.
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递增负荷训练诱导的动情周期抑制大鼠肾上腺结构与功能变化
目的:从肾上腺轴(HPA)对性腺轴(HPO)影响的角度,探讨运动性月经失调(AMI)的发生机制.方法:将35只成熟、健康的雌性2月龄SD大鼠随机分为对照组(C),7周训练组(Ta),7周训练恢复1周组(Tar),5周训练组(Tb)和3周训练组(Tc).跟踪观察大鼠阴道细胞脱落情况.训练期结束后,使用电子透射显微镜和光学显微镜分别观察大鼠肾上腺皮质束状带细胞的超微结构和肾上腺直径及厚度,用化学发光法(CLIA)检测各组大鼠血浆促肾上腺皮质激素(ACTH)水平.结果:(1)训练5周后,Ta、Tb组大鼠出现不同程度的动情周期抑制.训练至第7周,Ta组大鼠阴道中底层细胞多.(2)Ta、Tb组大鼠肾上腺皮质束状带窦状血管明显扩张,线粒体增多,线粒体和脂滴多见"半包裹"、"全包裹"现象;Tar组大鼠胞浆内出现胆固醇结晶体,胞浆浓缩,轻度核固缩;Tc组肾上腺束状带细胞胞浆内线粒体出现增生.光镜下,Ta组大鼠肾上腺皮质较C组明显增厚.(3)随着运动负荷的递增,大鼠血浆ACTH呈正性增高.Ta组与C组相比有显著性差异(P＜0.05),恢复1周后,大鼠血浆ACTH水平有所下降.结论:递增负荷运动诱导了大鼠动情周期的抑制和肾上腺束状带结构与功能的改变.大鼠动情周期抑制发生在肾上腺轴活化到一定程度之后.经过短暂休息,大鼠动情周期抑制状况未见明显改观,这与垂体-肾上腺轴仍处于较高的活化水平有关.提示HPA轴的过度活化可能参与调节了AMI的发生.
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高能量饮食对运动性动情周期抑制大鼠血清FSH、LH和下丘脑NPY mRNA水平的影响
目的:探讨高能量饮食对运动性动情周期抑制大鼠血清促卵泡激素(FSH)、黄体生成素(LH)和下丘脑组织神经肽Y(NPY)mRNA水平的影响.方法:选用健康、成熟的2月龄雌性SD大鼠24只,随机分为3组:安静对照组(C组)8只,递增负荷训练组(T组)8只,递增负荷训练+营养干预组(Tn组)8只.C组大鼠和T组大鼠用基础饲料喂养,能量摄入为570KJ/只/天.Tn组大鼠用高能量饲料喂养,能量摄入为710KJ/只/天.训练组进行6周递增负荷训练.实验结束后,采用放射免疫法测定各组大鼠血清FSH和LH浓度;用反转录聚合酶链反应法测定下丘脑NPY mRNA水平.结果:T组大鼠血清FSH浓度和FSH/LH比值均显著高于C组(P<0.01),其下丘脑NPY mRNA相对表达量显著低于C组(P<0.01).Tn组大鼠血清FSH浓度与FSH/LH比值均显著低于T组(P<0.01),其下丘脑NPY mRNA相对表达量显著高于T组(P<0.01).结论:(1)持续递增负荷训练可导致大鼠卵巢功能低落及下丘脑NPY mRNA水平降低.(2)本研究采用的高能量饮食可以改善运动性动情周期抑制大鼠卵巢功能,维持下丘脑NPY mRNA水平.
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附子提取物的大鼠生殖毒性研究
目的：探讨附子提取物对雌性大鼠生殖毒性的影响。方法附子提取物给大鼠连续灌胃30 d,考察脏器指数、动情期观察、生殖激素含量变化。结果附子提取物造成雌性大鼠动情周期紊乱,脏器指数明显下降,性激素：卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)、雌二醇(E2)、孕酮(P)含量较阴性对照组均显著下降。结论附子提取物的生殖毒性作用可能与FSH、LH、E2、P含量下降有关,提示提高性激素水平,可有助于降低附子提取物的生殖毒性。
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肝郁证雌性大鼠的动情期变化及柴胡疏肝散的防治作用
目的 探查肝郁证雌性大鼠的证候学和动情周期的变化及柴胡疏肝散的防治作用.方法雌性大鼠随机分为正常组,模型组,柴胡疏肝散大、小剂量组,每组10只.肝郁证模型复制采用慢性束缚法.大鼠造模第2周末(造模第14天),柴胡疏肝散大、小剂量组分别给予柴胡疏肝散1.26 g/(kg· d)和0.31 g/(kg· d)灌胃,每日1次,连续2周;模型组和正常组大鼠给予等量蒸馏水.记录造模期间各组大鼠的外观行为和动情周期(阴道涂片法)的变化,实验2周末和4周末做糖水偏嗜实验,实验4周末做旷场实验.结果 模型组大鼠实验期间出现由早期多动兴奋、烦躁易怒逐渐变为扎堆少动,行动迟缓,饮食减少等表现;第2周和第4周糖水偏嗜度分别增加和降低(P<0.01),第4周旷场实验中中央区停留时间、穿格次数、直立次数均降低(P<0.01),出现明显的动情周期紊乱.柴胡疏肝散的防治作用:与模型组比较,柴胡疏肝散大剂量组大鼠外部一般行为的异常趋于适度,糖水偏嗜度增加(P<0.01),旷场实验中的中央区停留时间、穿格次数、直立次数均见增加(P<0.01),动情周期紊乱率明显下降(P<0.01);柴胡疏肝散小剂量组上述指标变化无明显差异(P>0.05).结论 慢性束缚法建立的雌性肝郁模型大鼠不仅表现有中医肝郁证的变化且伴有动情周期的紊乱,肝郁证的治疗代表方柴胡疏肝散对该模型大鼠的中医证候及性周期紊乱均有良好改善作用,且大剂量作用优于小剂量.
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加减温经汤对寒凝血瘀模型大鼠卵巢功能的影响
目的观察加减温经汤对寒凝血瘀模型大鼠卵巢功能的影响,探讨加减温经汤治疗寒凝血瘀型妇科疾病的作用机制.方法将大鼠置于0～1℃冰水中造成寒凝血瘀大鼠模型,采用阴道涂片检测大鼠动情周期;剖取子宫、卵巢,称重,计算子宫指数、卵巢指数;HE染色,光镜下观察子宫、卵巢组织形态学改变;采用放射免疫法测定血清生殖激素水平.结果各组大鼠子宫指数、卵巢指数之间差异无统计学意义;与正常组比较,模型组大鼠组织形态学异常,动情周期延长,血清生殖激素水平明显下降;与模型组比较,治疗组动情周期缩短,血清生殖激素水平明显升高;桃红组血清E2、P、LH、FSH明显升高;治疗组与桃红组比较动情周期缩短,血清E2、P明显升高.结论寒凝血瘀时内分泌紊乱,卵巢功能异常,加减温经汤可通过调节内分泌,改善卵巢功能而治疗寒凝血瘀型妇科疾病.
