首页 > 文献资料
-
辛伐他汀对oxLDL诱导的巨噬细胞活性氧及IL-1β分泌的影响
目的：探讨辛伐他汀对氧化低密度脂蛋白( oxidized low density lipoprotein, oxLDL )诱导的巨噬细胞内活性氧( ROS)的水平及IL-1β分泌的影响。方法将oxLDL 0、50、100、200 mg·L-1作用于巨噬细胞J774A.1后,采用油红O染色观察脂滴在巨噬细胞内的聚集情况；用辛伐他汀0．5、1．0μmol·L-1作用于oxLDL处理的巨噬细胞,流式细胞仪检测辛伐他汀作用前后细胞内ROS的水平；Western blot检测pro-caspase-1、cleaved caspase-1和成熟 IL-1β的表达情况。结果油红O染色结果表明,oxLDL可导致巨噬细胞内明显的脂质聚集,并于100 mg·L-1作用剂量达到摄取脂质的饱和状态；流式细胞仪结果表明,oxLDL可以诱导脂质聚集巨噬细胞内ROS的水平增加,辛伐他汀作用后,ROS水平由(167±0．47)%下降到(139±0．97)%,并呈明显的剂量依赖；Western blot结果表明,辛伐他汀可抑制oxLDL诱导的caspase-1活化及IL-1β的分泌,辛伐他汀处理组与oxLDL实验组相比,cleaved caspase-1及成熟 IL-1β的表达呈下降趋势,灰度值差异有统计学意义( P<0．05)。结论在oxLDL诱导的巨噬细胞脂质聚集模型中,辛伐他汀可以抑制巨噬细胞内ROS的产生及caspase-1的活化,并减少IL-1β的分泌。
-
豚鼠高脂血症模型LDL-C代谢紊乱的机制研究
目的 建立豚鼠高胆固醇血症模型,并对形成机制进行探讨.方法 高脂饲料诱导法建立豚鼠高胆固醇血症模型,分别于造模1、2、4周检测血清脂质的动态变化;检测肝脏脂质;酶联免疫分析法测定血清ox-LDL浓度;实时荧光定量PCR法检测肝脏CYP7A1(cholesterol 7a-hydroxylase A1)、肝脏法尼酯X受体(hepatic farnesoid X receptor,FXR)、肝X受体α(liver X receptor,LXRα)、HMG-CoA还原酶mRNA的相对表达;Western blot法检测肝脏LDL-R的蛋白表达情况.结果 豚鼠经高脂饲料诱导1周后,模型组与对照组比较血清TC、LDL-C即发生升高,随造模时间延长,血脂一直维持在较高水平.造模4周后模型组血清ox-LDL、sd-LDL浓度,肝脏TC水平比正常组升高.肝脏HMG-CoA还原酶表达下调,LDL-R蛋白表达量明显高于正常组.值得注意的是豚鼠肝脏法尼酯X受体(FXR)表达明显上调,且肝X受体α(LXRα)表达也明显上调,但二者激活水平相当,终未改变肝脏CYP7A1mRNA的表达水平.结论 高脂诱导豚鼠形成高胆固醇血症主要与外源性胆固醇和低密度脂蛋白的清除发生障碍有关.
-
二苯乙烯苷对ox-LDL诱导的U937细胞ICAM-1、VCAM-1及VEGF表达的影响
目的 观察二苯乙烯苷(TSG)对ox-LDL诱导的U937细胞ICAM-1、VCAM-1及VEGF表达的影响,探讨TSG抗动脉粥样硬化(AS)的可能机制.方法 体外培养经PMA处理过的U937细胞,在给予ox-LDL刺激的同时给予不同浓度TSG干预,采用黄嘌呤氧化酶法测定细胞培养液中SOD活力,TBA法测定培养液中MDA含量,蛋白免疫印迹法分析观察各组细胞ICAM-1、VCAM-1及VEGF的蛋白表达,逆转录聚合酶链反应法分析观察各组细胞ICAM-1和VCAM-1的基因表达.结果 模型组细胞液总SOD活力较对照组明显降低,TSG高剂量及阳性对照组总SOD活力较模型组明显升高(P<0.05);模型组细胞液MDA水平较对照组明显升高,TSG高中剂量及阳性对照组较模型组明显升高(P<0.05).蛋白免疫印迹分析显示,模型组ICAM-1、VCAM-1及VEGF的蛋白表达较对照组明显升高(P<0.05);TSG高剂量和辛伐他汀能明显降低ICAM-1、VCAM-1及VEGF表达(P<0.05).逆转录聚合酶链反应分析显示, 模型组细胞ICAM-1、VCAM-1 mRNA水平较正常组明显升高(P<0.01);TSG高剂量和辛伐他汀较模型组能明显降低ICAM-1、VCAM-1 mRNA水平(P<0.01).结论 TSG具有抗氧化、抑制单核巨噬细胞黏附分子分泌作用;其作用可能与其抗动脉粥样硬化有关.
-
普罗布考在抗ox-LDL诱导THP-1巨噬细胞凋亡中对CD36、Caveolin-1表达的影响
目的 研究普罗布考(Probucol)在抗ox-LDL诱导THP-1巨噬细胞凋亡中对CD36、Caveolin-1表达的影响.方法 用流式细胞仪检测细胞凋亡;用RT-PCR、免疫荧光分别检测CD36、Caveolin-1 mRNA水平和蛋白表达.结果 普罗布考抗ox-LDL诱导THP-1巨噬细胞凋亡;RT-PCR检测发现普罗布考组与ox-LDL组CD36、Caveolin-1 mRNA表达无明显差异;免疫荧光检测结果显示普罗布考下调Caveolin-1蛋白表达,但对CD36蛋白的表达没有影响.结论 普罗布考在抗ox-LDL诱导THP-1巨噬细胞凋亡中下调Caveolin-1蛋白的表达.
-
绿谷灵芝对人脐静脉内皮细胞ICAM-1和VCAM-1表达的影响
目的采用血清药理学的方法研究绿谷灵芝含药血清对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)和糖化白蛋白诱导的内皮细胞表面血管细胞粘附分子(VCAM-1)和细胞间粘附分子(ICAM-1)表达的影响.方法通过细胞ELISA和流式细胞仪技术检测细胞表面VCAM-1和ICAM-1表达的变化.结果细胞ELISA结果显示0.24 g*kg-1、0.72 g*kg-1绿谷灵芝连续灌胃给药10 d后取血分离得到的血清可降低糖化白蛋白诱导的内皮细胞表面VCAM-1和ICAM-1表达(P< 0.05),降低ox-LDL 诱导的ICAM-1表达(P< 0.05);流式细胞技术检测结果显示0.72 g*kg-1绿谷灵芝含药血清可降低ox-LDL和糖化白蛋白诱导的内皮细胞表面ICAM-1表达(P< 0.05),0.12 g*kg-1绿谷灵芝含药血清和无药血清对内皮细胞表面粘附分子的表达无影响.结论绿谷灵芝含药血清可降低糖化白蛋白和ox-LDL诱导的内皮细胞表面粘附分子的表达.
-
丹参酮ⅡA对 ox－LDL诱导血管内皮细胞自噬效应蛋白 Beclin1表达的影响
目的：氧化型低密度脂蛋白（ oxidized low－densitylipoprotein，ox－LDL）可诱导血管内皮细胞发生自噬，造成血管内皮损伤，从而导致动脉粥样硬化的发生。该研究拟探讨丹参酮ⅡA对ox－LDL诱导的血管内皮细胞自噬效应蛋白Beclin1表达的影响。方法（1）运用不同浓度ox－LDL处理人脐静脉血管内皮细胞HUVECs，MDC染色、流式细胞仪检测ox－LDL对HU-VECs自噬水平的影响，采用免疫印迹技术检测自噬标记蛋白Beclin1表达；（2） ox－LDL处理后，运用不同浓度丹参酮ⅡA干预，MDC染色、流式细胞仪HUVECs自噬水平变化，免疫印迹检测Beclin1蛋白水平变化。结果 ox－LDL能诱导HUVECs发生自噬，丹参酮ⅡA能抑制ox－LDL诱导的HUVECs自噬效应蛋白Beclin1表达。结论丹参酮ⅡA通过抑制ox－LDL诱导的HUVECs自噬，从而对ox－LDL所致的HUVECs损伤起保护作用。
-
不同剂量他汀类药物对缺血性脑卒中患者hs-CRP和ox-LDL的影响
目的：探讨不同剂量他汀类药物对缺血性脑卒中患者高敏C反应蛋白（hs-CRP）和氧化低密度脂蛋白（ox-LDL）的影响。方法选取缺血性脑卒中患者90例，随机分为三组，其中A组采用常规药物治疗，而B、C组分别在此基础上加用每日10、20 mg阿托伐他汀钙片。测定所有患者治疗前和治疗后1月血脂、hs-CRP、ox-LDL值。结果 C组与A、B组相比，血清总胆固醇、三酰甘油、高密度脂蛋白胆固醇以及低密度脂蛋白胆固醇水平等均显著降低（P＜0．05），且治疗后的hs-CRP、ox-LDL水平等均显著降低（P＜0．05）。结论早期大剂量地使用阿托伐他汀不仅可以降脂减轻动脉硬化，且还可以减少炎性反应。
-
木犀草素对实验性糖尿病大鼠肾脏的保护作用
目的 研究木犀草素对实验性糖尿病大鼠肾脏的保护作用.方法 制备实验性糖尿病模型,将大鼠分成4组,分别为木樨草素高剂量组、中剂量组、低剂量组、模型组与正常组,实验进行到第12周,处死大鼠,测定血清FBG、FINS、Cr、BUN及肾脏Ox-LDL,并计算ISI.结果 木犀草素具有降糖、改善胰岛素抵抗、改善肾功能、降低肾脏组织Ox-LDL的作用.结论 木犀草素对实验性糖尿病大鼠肾脏具有一定的保护作用,其机制可能与改善胰岛素抵抗与减少肾脏组织Ox-LDL有一定的关系.
-
氧化型低密度脂蛋白与冠状动脉病变程度的关系
目的探讨血浆氧化修饰低密度脂蛋白(OX-LDL)与冠状动脉病变程度的关系.方法采用酶免疫吸附法测定OX-LDL,同时用酶法测定血脂、免疫透射比浊法测定载脂蛋白水平.结果冠心病组OX-LDL、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、TC、TG、ApoB、及LP(a)较对照组增高,而HDL-C、ApoA1降低,且冠状动脉病变程度越重,OX-LDL越高.结论血浆OX-LDL水平与冠状动脉粥样硬化及其程度显著相关,测定其水平对评价冠心病的程度有一定临床意义.
-
缬沙坦对血凝素样氧化低密度脂蛋白受体-1基因在肾皮质中表达的影响
目的 通过研究血凝素样氧化低密度脂蛋白受体-1(LOX-1)在肾皮质中的表达,明确LOX-1与肾损伤以及血管病变的关系.方法 将48只雄性SD大鼠按随机数字表法分为对照组、实验组和治疗组.对照组用生理盐水(NS)10 mL·kg-1·d-1灌胃,实验组用腺嘌呤300 mg·kg-1·d-1灌胃,治疗组用腺嘌呤300 mg·kg-1·d-1和缬沙坦10 mg·kg-1·d-1联合灌胃.21 d后取血和尿检查,明确造模成功.治疗组继续用缬沙坦10 mg·kg-1·d-1灌胃,8周后颈内静脉插管监测血压(BP),断头取血检测血清中的肌酐(Crea)、低密度脂蛋白(LDL)、脂蛋白a(Lp(a))、超敏C反应蛋白(hs-CRP),同时取肾皮质,行实时荧光检测LOX-1的表达.结果 用腺嘌呤灌胃造模示成功,LOX-1在慢性肾衰竭大鼠肾皮质中表达明显增加,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05).缬沙坦治疗后LOX-1在慢性肾衰竭大鼠肾皮质中表达明显下降,与实验组比较差异有统计学意义(P<0.05),与对照组比较无统计学意义(P>0.05).BP、Crea、LDL、Lp(a)、hs-CRP在慢性肾衰竭大鼠中明显升高,与对照组和治疗组比较差异有统计学意义(P<0.05).缬沙坦治疗后BP、Crea、LDL、Lp(a)、hs-CRP下降,与对照组比Crea、LDL、hs-CRP无统计学意义(P>0.05),BP、Lp(a)有统计学意义(P<0.05).LOX-1在肾皮质中的表达上调与BP、Crea、LDL、Lp(a)、hs-CRP有相关性(r分别为0.816、0.698、0.829、0.724、0.740).结论 慢性肾衰竭大鼠肾皮质中LOX-1的表达是明显上调的,缬沙坦能明显抑制LOX-1在肾皮质中的表达.LOX-1在肾皮质中的表达上调与BP、Crea、LDL、Lp(a)、hs-CRP呈正相关,提示LOX-1参与了慢性肾衰竭的发生和发展.
-
贝那普利对原发性高血压病患者内皮素、一氧化氮、OX-LDL的影响
目的观察贝那普利对原发性高血压病患者内皮素、一氧化氮、OX-LDL等的影响.方法对30例原发性高血压病患者进行治疗前后内皮素、一氧化氮、OX-LDL等指标的测定,统计学处理采用t检验,数据采用x±s表示.结果治疗前后患者上述指标均明显改善,有显著差异,P＜0.05.结论说明贝那普利是原发性高血压病患者的理想用药之一.
-
ox-LDL与动脉粥样硬化的关系研究进展
动脉粥样硬化是以动脉血管壁脂质沉积、内膜增生、炎性浸润和粥样斑块形成为主要病理特征的病变,其引起的心脑血管疾病严重危害人类生命健康.氧化低密度脂蛋白(oxidized low density lipoprotein,ox-LDL)是动脉粥样硬化的重要危险因子,研究发现其具有促进动脉粥样硬化泡沫细胞形成、损伤血管内皮细胞、促进血管平滑肌细胞增殖迁移以及炎性细胞因子释放等作用,参与、促进了动脉粥样硬化的发生和发展,国内外学者针对oxLDL进行了抗动脉粥样硬化的相关研究,现就近年来ox-LDL与动脉粥样硬化关系的主要进展进行简要综述.
-
《金匮要略》泻心汤对实验性动脉粥样硬化大鼠主动脉细胞凋亡的影响及其机制研究
细胞凋亡异常是动脉粥样硬化发生发展过程中的一个重要因素,在冠心病急性突发事件的发生中也起着非常重要的作用.研究了<金匮要略>泻心汤对实验性动脉粥样硬化大鼠主动脉细胞凋亡的影响.结果发现泻心汤可以通过影响动脉粥样硬化过程中诱导细胞凋亡的因素ox-LDL、NO等发挥抑制细胞过度凋亡的作用.认为该方既可用于动脉粥样硬化的防治,也可用于冠心病急性突发事件的预防.
-
ox-LDL特异性人血管平滑肌细胞cDNA消减文库的构建
目的:构建ox-LDL特异性人血管平滑肌细胞cDNA消减文库.方法:35%ug/ml ox-LDL刺激培养的人血管平滑肌细胞,利用消减杂交技术,构建cDNA消减文库,并运用蓝白斑筛选和影印杂交进一步确定文库克隆的特异性.结果:成功构建ox-LDL特异性血管平滑肌细胞cDNA消减文库,约2000个白色克隆.影印杂交后共获82个差异表达克隆.结论:消减文库的构建为进一步克隆ox-LDL特异性基因cDNA片段和全长奠定了基础.
-
Let-7 d靶向LOX-1逆转ox-LDL诱导血管内皮细胞凋亡观察
目的:研究Let-7d对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导人脐静脉内皮细胞(HUVECs)凋亡以及凝集素样氧化低密度脂蛋白清除受体1(LOX-1)表达的影响.方法:用50 mg/L的ox-LDL处理HUVECs 24 h和48 h,分别采用Western blot和RT-qPCR法检测LOX-1和Let-7d表达的变化.TargetScan和双荧光素酶报告基因实验预测LOX-1与Let-7d之间的靶向调控关系.将miRNA模拟物对照(NC)和Let-7d单独或联合50 mg/L的ox-LDL处理HUVECs 48 h,分别记为NC组、Let-7d组、NC+ox-LDL组和Let-7d+ox-LDL组,采用Western blot和RT-qPCR法检测各组中LOX-1、Caspase 3、Bax和Bcl-2蛋白表达及LOX-1 mRNA表达,流式细胞仪检测各组细胞凋亡率.结果:用50 mg/L的ox-LDL处理HUVECs 0 h、24 h和48 h后,各组HUVECs中LOX-1蛋白表达增加,Let-7d表达降低(P<0.05).TargetScan和双荧光素酶报告基因实验表明LOX-1可能是Let-7d的靶基因.NC组、Let-7d组、NC+ox-LDL组和Let-7d+ox-LDL组HUVECs中LOX-1的表达、细胞凋亡率及Caspase 3、Bax、Bcl-2蛋白表达比较,差异均有统计学意义(P<0.001).ox-LDL可诱导HUVECs中LOX-1、细胞凋亡率和促凋亡蛋白Caspase 3、Bax表达增加,抗凋亡蛋白Bcl-2表达降低;Let-7d能够显著抑制ox-LDL对HUVECs中LOX-1表达、细胞凋亡率及促凋亡蛋白Caspase 3、Bax表达的诱导作用和抗凋亡蛋白Bcl-2表达的抑制作用(P<0.05).结论:Let-7d能够逆转ox-LDL诱导的HUVECs凋亡,其机制可能与Let-7d靶向抑制LOX-1表达有关.
-
温和灸对原发性高脂血症患者血脂、血浆氧化低密度脂蛋白、内皮素-1及一氧化氮的影响
目的 观察温和灸对高脂血症患者血脂、血浆氧化低密度脂蛋白、内皮素-1及一氧化氮的影响,探讨灸法以温促“通”效应机制.方法 温和灸55例高脂血症患者神阙穴及足三里穴,每次每穴10 min,隔日一次,治疗12周,肘静脉抽血观察指标治疗前后的变化.结果 与治疗前比,治疗后TC、TG、LDL、Ox-LDL、ET-1、ET-1/NO显著下降,HDL-c、NO显著升高,且均差异有显著性意义(P＜0.05).治疗后ApoA1升高,ApoB、Lip-a降低,但无统计学意义.结论 温和灸对脂质代谢失调有明显调整作用,同时温和灸具有抗氧化、保护血管内皮和调节血管舒缩功能的作用,说明温和灸对AS的发生发展在一定程度上起到预防作用.
-
LOX-1在吡格列酮调节高脂血症大鼠主动脉凋亡蛋白表达中的作用
氧化型低密度脂蛋白(Oxidized Low-Density Lipoprotein, ox-LDL)诱导内皮细胞(Endothelial Cells,ECs)活化和功能失调是动脉粥样硬化(Atherosclerosis,AS)发生的关键步骤之一.研究显示凝集素样氧化型低密度脂蛋白受体-1(Lectin-like Oxidized Low-Density Lipoprotein Receptor-1, LOX-1)主要表达于ECs和血管丰富的器官组织中,能特异性结合、吞噬和降解ox-LDL,介导ECs活化、损伤和凋亡,使平滑肌细胞和巨噬细胞内脂质聚集,活化血小板,促进血栓形成,并增加斑块不稳定性,促进AS的发生发展[1].
-
灯盏细辛治疗椎-基底动脉供血不足及对血液流变性及SOD、ox-LDL的影响
椎-基底动脉供血不足( Vertebrobasilar Insufficiency, VBI)是以脑后循环缺血为特征的一组症候群,为临床上多见的神经内科疾病之一.随着祖国医药在心脑血管疾病中越来越广泛的应用,灯盏细辛也受到越来越多的关注.本文报道灯盏细辛注射液对109例VBI患者的临床疗效及对血液流变学指标及血浆超氧化物歧化酶(SOD) 、氧化低密度脂蛋白 (ox-LDL)水平的影响.
-
氧糖剥夺条件下脑血管内皮细胞对氧化型低密度脂蛋白损伤的易感性及机制研究
目的:观察缺氧缺糖性损伤条件下,血管内皮细胞对氧化型低密度脂蛋白刺激易感性的考察,以及下游氧化应激信号通路的调控机制.方法:将细胞分为正常对照组、氧糖剥夺(OGD)组6h、100 μg/ml氧化型低密度脂蛋白ox-LDL处理24 h组(ox-LDL组)、OGD 6 h+100 μg/ml ox-LDL刺激24 h组(OGD+ox-LDL组),分别处理分离的大鼠脑血管内皮细胞(RBECs).Western blot检测脑血管内皮细胞小凹蛋白1(Cav-1)、凝集素样氧化型低密度脂蛋白受体(LOX-1)变化,及考察下游氧化应激MAPK信号通路和内皮型一氧化氮合酶(eNOS).免疫荧光检测RBECs中Dil细胞膜荧光标记的ox-LDL (Dil-ox-LDL)荧光强度的变化.比色法和ELISA法检测炎症因子即一氧化氮(NO)、白细胞介素1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达.结果:ox-LDL刺激可对增加LOX-1表达和RBECs的Dil-ox-LDL荧光强度,并同时降低Cav-1表达.OGD组LOX-1表达和Dil-ox-LDL荧光强度相较于正常对照组无明显增加,然而Cav-1表达有所降低,然而在OGD+ ox-LDL组LOX-1表达和Dil-ox-LDL荧光强度增加,且相较于ox-LDL组,有显著性差异.另外,除正常对照组外,各组RBECs均观察到MAPK信号通路中p38、ERK1/2、JNK氧化应激通路激活和NO、IL-1β、TNF α炎症因子释放增加,并且OGD+ox-LDL组相较于OGD组、ox-LDL组均有显著性差异.结论:RBECs在OGD和ox-LDL共同刺激条件下,对ox-LDL的刺激具有易感性,可在增加细胞内Dil-ox-LDL荧光强度,并且诱导下游氧化应激反应,机制可能与Cav-1调控氧化应激反应相关,本研究可为以OGD细胞模型为代表的缺血性脑卒中等疾病相关脂质代谢研究提供科学根据.
-
阿托伐他汀抑制心脏瓣膜成肌纤维细胞向成骨细胞样表型转化
目的:通过观察猪主动脉瓣成肌纤维细胞在受氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)作用时,阿托伐他汀(Ator)对细胞凋亡的影响以及是否表达骨相关蛋白,来探讨阿托伐他汀对心脏瓣膜钙化的防治机制.方法:以原代培养的猪主动脉瓣成肌纤维细胞作为研究对象,用ox-LDL处理细胞.将瓣膜间质细胞随机分为4组:对照组(Ctrl),ox-LDL组(25 mg· L-1 ox-LDL),ox-LDL+ Ator组(25mg·L-ox-LDL+ 50 mg·L-1 Ator),Ator组(50 mg·L-1 Ator).采用流式细胞学技术测定各组细胞在24,48,72 h的凋亡变化,利用Western印迹法和Real-time PCR检测72 h各组细胞的α-平滑肌蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)活性,以及骨形成蛋白2(bone morphogenetic protein 2,BMP2),碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)的基因表达.结果:ox-LDL分别处理成肌纤维细胞24,48,72 h后,细胞显示出时间依赖性的凋亡加速(P＜0.05),加入Ator后,细胞的凋亡速度明显减低(P＜0.05).ox-LDL组α-SMA的表达明显增加(P＜0.05),成为活性细胞,加用Ator并未对α-SMA蛋白产生影响(P＞0.05).骨相关蛋白BMP2、ALP和mRNA在对照组和Ator组仅有低水平表达;而在ox-LDL组表达显著增加(P＜0.01),加入Ator后,BMP2、ALP的表达明显下降(P＜0.05).结论:ox-LDL促使心脏瓣膜成肌纤维细胞分化、凋亡加速以及向成骨细胞样表型转化;Ator可以抑制ox-LDL所诱导的细胞凋亡,并对细胞的激活,以及向成骨样细胞表型分化可以起到一定的抑制作用,对心脏瓣膜钙化有防治作用.
