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树脂薄切片在周围神经病变诊断中的应用
在神经科疾病的病理诊断中越来越多地使用周围神经活体组织检查来进行某些疾病的确诊及鉴别诊断,如遗传性周围神经病(HMSN运动感觉性神经病),线粒体肌病并发周围神经病,继发于糖尿病的周围神经病,多发性肌炎引起的外周神经损害及格林巴利综合征、异染性白质脑病等等[1-4]都需要作外周神经组织活检.以往的外周神经组织活检多采用石蜡切片Weil染色[5],由于此方法染色对比度差,分色不好掌握,此后又有学者介绍了变色-亮绿法[6]、改良的Meyer三色染色法[7]及髓鞘Loyez染色法.但石蜡切片在标本处理过程中往往会产生脂质抽提及石蜡包埋的收缩率较高、切片较厚等缺陷,镜下观察的结果往往与实际的病理改变有一定距离,我们在工作中探索了树脂包埋薄切片的天青-美蓝染色方法,可以提高神经髓鞘的分辨率,更为清晰真实地显示周围神经病变的微细结构.
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组织脂质抽提方法评估与应用
目的 比较3种常用的组织三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)抽提方法.方法 脂质提取分别采用3种方法.A:氯仿-甲醇抽提,B:庚烷-异丙醇-聚山梨酯20抽提,C:叔醇-Triton X-100-甲基乙醇抽提.采用氧化酶法检测混合人血清、普食或高脂饲养大鼠肝组织TG和TC水平,自动生化仪或手工比色测定.结果在3种方法中,A法较其他方法耗时长;C法需手工测定.尽管3种方法的批内和批间差异无明显不同,方法A、B提取的TG、TC回收率随抽提溶液体积增大而增加,而C法回收率随抽提液体积增大而呈下降趋势.采用B法作组织抽提,普食大鼠肝脏中TG、TC的抽提量不随抽提液体积的改变而变化,高脂大鼠肝脏TG、TC含量随抽提液体积增加而升高.进一步选用5 mL抽提液提取普食和高脂大鼠肝脏,高脂大鼠TG、TC含量均明显高于普食组(P＜0.01).结论 3种脂质抽提方法中,B法回收率高,自动化程度高、省时,适合肥胖大鼠肝脏脂质的抽提.用B法提取50 mg高脂肝脏脂质时,抽提溶液体积以5或7 mL为宜.
