首页 > 文献资料
-
DAPT对骨髓瘤细胞RPMI8226增殖和凋亡的影响
本研究旨在探讨DAPT对人多发性骨髓瘤细胞系RMI8226体外增殖的抑制作用及相关机制.用CCK-8法检测RPMI8226细胞的增殖率,用流式细胞术检测凋亡率,用Western blot法检测RPMI8226细胞Notch1、Hes1蛋白表达情况.结果表明,DAPT0.5- 5.0 μmol/L作用于RPMI8226细胞24 -72 h后,细胞增殖水平明显下降,呈时间和浓度依赖性(r=1.000).不同浓度的DAPT能诱导RPMI8226细胞发生凋亡,与对照组相比差异有统计学显著性；随着DAPT浓度的增加,Notch1、Hes1蛋白的表达逐渐下调(rNotch=-0.979,rHes1=-0.988).结论:DAPT能够抑制RPMI8226细胞的增殖,其机制可能与RPMI8226细胞中Notch1、Hes1蛋白的下调有关.
关键词： 多发性骨髓瘤 RPMI8226细胞 DAPT Notch信号通路 -
大黄素衍生物E11的筛选及对多发性骨髓瘤细胞增殖抑制和诱导凋亡作用的研究
目的:筛选抑制多发性骨髓瘤细胞增殖作用强的衍生物,研究大黄素衍生物对两种多发性骨髓瘤细胞株RPMI8226及U266细胞抑制增殖和诱导凋亡的作用.方法:以大黄素为母体合成16种大黄素衍生物,从中筛选出大黄素衍生物E-11进行实验.应用MTT比色法及细胞集落形成实验观察大黄素衍生物E11对RPMI8226、U266细胞增殖的影响;应用DAPI染色法在荧光显微镜下观察大黄素衍生物作用后的细胞形态变化;应用DNA片段化检测大黄素衍生物E11诱导细胞凋亡的作用.结果:MTT结果显示,16种大黄素衍生物作用于RPMI8226细胞48 h后,除了E10、E15无法计算外,其余14种半数抑制浓度(IC50)在0.83-34.68 μmol/L之间.MTT结果显示,大黄素衍生物E11作用于RPMI8226、U266细胞48 h的IC5o分别为0.831±0.045 μmol/L和1.039±0.093μmol/L.细胞集落形成实验均显示,大黄素衍生物E11能抑制2种细胞集落的形成,在一定范围内呈浓度及时间依赖性(r=0.72).DAPI染色后在荧光显微镜下能看到大黄素衍生物E11作用后的RPMI8226、U266细胞出现典型的凋亡形态学改变;应用DNA片段化可观察到典型的DNA凋亡梯带.结论:在合成的16种大黄素衍生物中,E11对多发性骨髓瘤RPMI8226细胞的抑制增殖作用强.大黄素衍生物E11对RPMI8226、U266细胞有明显的抑制增殖、诱导凋亡的作用.
-
正常人骨髓成纤维样基质细胞对骨髓瘤细胞RPMI8226增殖的影响
为了观察正常人骨髓成纤维样基质细胞系HFCL对多发性骨髓瘤细胞系RPMI8226增殖的影响,建立了RPMI8226细胞和HFCL细胞共培养体系,用MTT法测粘附率,台盼蓝拒染法测定生长曲线;流式细胞术(FCM)检测细胞周期的变化,瑞氏-吉姆萨染色后进行分裂指数(MI)测定,Western blot检测增殖细胞核抗原(PCNA)表达.结果显示,与HFCL细胞共培养1小时后,RPMI8226细胞的粘附率为29.4%;生长曲线显示直接接触组RPMI8226细胞生长受抑,而非直接接触组(transwell组)无变化;RPMI8226细胞与HFCL细胞共培养后,直接接触组G1期细胞增高,S期细胞减少;其分裂指数表现为单独骨髓瘤细胞组大于与HFCL直接接触组;直接接触组PCNA表达下调.结论:正常人骨髓成纤维样基质细胞HFCL能抑制骨髓瘤细胞系RPMI8226的增殖,阻止其细胞周期的运行.
关键词： 骨髓成纤维样基质细胞 多发性骨髓瘤 细胞增殖 RPMI8226细胞 -
苦参碱诱导多发性骨髓瘤RPMI8226细胞凋亡及其对细胞黏附分子表达的影响
为了探讨苦参碱诱导多发性骨髓瘤(MM)RPMI8226细胞凋亡及其对细胞黏附分子表达的影响,将苦参碱与RPMI8226细胞共培育,采用CCK-8法观察细胞生长,AnnexinV-FITC/PI双染色流式细胞仪检测细胞凋亡,PI单染色法检测细胞周期,双染色流式细胞仪检测细胞膜表面CD44、CD44v6、CD54和CD106的表达.结果表明,苦参碱对RPMI8226细胞具有明显的生长抑制作用,呈量效和时效关系;苦参碱能诱导RPMI8226细胞凋亡,其发生率随着药物浓度增加而增加;细胞周期分析显示G0/G1期细胞相对增多,S期相对减少,但G2/M期细胞数无明显改变;苦参碱作用于RPMI8226细胞48小时导致CD44和CD54表达减少,但CD44v6和CD106表达无明显改变.结论:苦参碱通过诱导凋亡和细胞周期阻滞抑制RPMI8226细胞的生长,同时降低CD44、CD54等细胞黏附分子表达.
-
酪氨酸激酶抑制剂逆转黏附诱导的骨髓瘤细胞的耐药性
为了探讨酪氨酸激酶抑制剂STI571对RPMI8226细胞黏附、黏附诱导耐药以及靶细胞Rac1 mRNA表达的影响,本研究采用结晶紫染色法分析了RPMI8226细胞与纤连蛋白(fibronectin,FN)的黏附率,用MIT法检测瘤细胞的增殖性,并用半定量RT-PCR研究Rac1 mRNA水平的变化.结果显示:RPMI8226细胞与FN黏附1、6、12小时,其黏附率分别为(43.71±2.18)%、(55.63±1.56)%、(63.42±2.46)%;用20 μmol/L STI571处理1、6、12小时后黏附率分别降为(15.12±1.04)%、(17.58±1.32)%、(17.24±1.59)%;组间差异显著(P＜0.05);阿霉素作用后,FN黏附组细胞IC50值[(1.46±0.04)μmol/L]显著高于BSA组[(0.78±0.03)μmol/L](P＜0.05);FN联合ST1571组IC50值[(0.81±0.05)μmol/L]与BSA联合STI571组[(0.74±0.02)μmol/L]相比无显著性差异(P＞0.05),但却低于FN组(P＜0.05);半定量RT-PCR显示,Rac1 mRNA水平在20μmol/L STI571处理14小时后明显下降.结论:STI571能降低RPMI8226细胞与FN的黏附率、逆转黏附介导的阿霉素耐药,并且可以下调其Rac1 mRNA水平.
-
蛋白酶体抑制剂诱导多发性骨髓瘤RPMI8226细胞凋亡及对Notch 1和NF-κB表达的影响
多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)的发生、发展与骨髓微环境关系密切,有多种信号通路参与.Notch信号是造血微环境调节造血细胞增殖分化的重要信号通路,其中Notch 1与血液肿瘤的发生、发展较为密切.骨髓瘤是高度依赖NF-κB的恶性肿瘤,后者与肿瘤细胞的发生和转移、增殖和凋亡、耐药相关.已证实NF-κB2家族是Notch信号通路-的一个靶基因.蛋白酶体抑制剂Bortezomib已获美国FDA批准用于治疗难治及复发多发性骨髓瘤,但其诱导骨髓瘤细胞凋亡的机制尚未完全明确.本研究探讨bortezomib诱导多发性骨髓瘤细胞凋亡和对Notch 1、NF-κB表达水平的影响,采用透射电子显微镜检、流式细胞术及原位缺口末端标记技术观察药物对MM细胞凋亡的影响,用RT-PCR法和免疫荧光细胞化学染色分析分别检测细胞凋亡时Notch 1及NF-κB的表达情况.结果表明:RPMl8226细胞高表达Notch 1和NF-κB;随着bortezomib作用浓度的增高,RPMI8226细胞出现典型的凋亡改变,Notch 1的表达逐渐降低,NF-κB在胞核表达减少,胞浆表达增多.这种改变在浓度升高到一定数值时与对照相比具有显著性差异(P＜0.05).结论:bortezomib治疗多发性骨髓瘤机制中有Notch 1和NF-κB两条通路的参与,二者可能存在一定的联系,提示Notch 1信号可能作为MM治疗的潜在靶点,为相关新药的研发提供一定实验基础.
-
热疗提高RPMI8226细胞对阿霉素敏感性的实验研究
本研究探讨热疗对多发性骨髓瘤细胞株RPMI 8226化疗敏感性的影响及其可能机制.用MTT法确定阿霉素的工作浓度.RPMI 8226细胞分为对照组、热疗组(42℃)、化疗组(ADM)、热化疗组(42℃+ADM)并分别对其进行相应的处理.48小时后采用台盼蓝拒染法检测各组细胞的存活率,MTT检测热疗对肿瘤细胞增殖的抑制作用,流式细胞术检测细胞周期、凋亡率、细胞内阿霉素浓度和细胞表面P-gp蛋白的表达情况.以作用48小时的1/4 IC50值作为实验的工作浓度.结果表明,热疗促进G0/G1期细胞进入S期和G2/M期;热疗组和热化疗组细胞表面P-gP蛋白表达减低;热化疗组细胞内的ADM浓度明显增加.结论:热疗与阿霉素联合对RPMI 8226细胞增殖有明显的抑制作用.热疗通过降低细胞表面P-gP蛋白的表达水平和增加细胞内阿霉素的药物浓度,提高RPMI 8226细胞对化疗的敏感性.
关键词： 热疗 阿霉素 RPMI8226细胞 多发性骨髓瘤 -
自噬在多发性骨髓瘤细胞系RPMI8226阿霉素耐药中的作用
目的 探讨自噬在多发性骨髓瘤(MM)细胞阿霉素(DOX)耐药中的作用.方法 用浓度递增法诱导多发性骨髓瘤细胞系RPMI8226细胞建立DOX耐药株RPMI8226/DOX；用MTT法测定RPMI8226/DOX细胞耐药倍数；分别用透射电镜、抗LC3-FITC抗体免疫荧光、Westem blot检测MM细胞自噬情况；Annexin V/PI标记流式细胞术检测羟氯喹、3-甲基腺嘌呤(3-MA)抑制自噬对DOX诱导RPMI8226/DOX细胞凋亡的影响.结果 通过浓度梯度递增法诱导的RPMI8226/DOX细胞,耐药倍数约为10.8,透射电镜下RPMI8226/DOX细胞出现较多自噬体或自噬溶酶体；荧光显微镜下见RPMI8226/DOX细胞出现荧光颗粒；Western blot检测结果显示RPMI8226/DOX细胞LC3-Ⅱ蛋白表达水平较RPMI8226细胞升高；流式细胞术检测结果显示:单用8μmol/L羟氯喹和10 mmol/L 3-MA作用24 h后RPMI8226/DOX细胞凋亡率分别为(3.24±1.08)％和(2.81±0.80)％,与空白对照组的(2.12±1.24)％比较,差异无统计学意义(P＞0.05)；2、4、6μmol/L DOX作用24 h后RPMI8226/DOX细胞凋亡率为(9.75±2.15)％、(24.36±2.16)％、(40.51±3.14)％；在此基础上加入8μmol/L羟氯喹后细胞凋亡率分别上升为(16.56±1.89)％、(36.44±2.91)％和(62.68±3.75)％,与单用DOX相比差异有统计学意义(P＜0.05)；而加用10 mmol/L 3-MA后细胞凋亡率分别上升为(15.47±1.85)％、(39.28±3.06)％和(55.46±4.07)％,与单用DOX相比差异亦有统计学意义(P＜0.05).结论 自噬在耐药骨髓瘤细胞中被活化,抑制自噬可部分逆转DOX诱导的骨髓瘤细胞耐药,提示自噬可能为骨髓瘤细胞耐药机制之一.
关键词： 多药耐药 自噬 RPMI8226细胞 阿霉素 -
CD40不同形式的活化对CD40突变的RPMI8226细胞增殖和表型的影响
目的 分析CD40抗体或配体不同形式刺激对RPMI8226细胞增殖及表面共刺激分子和黏附分子表达的影响,探讨RPMI8226细胞CD40基因突变在其生物学行为中的作用.方法 用RT-PCR方法和DNA序列测定检测RPMI8226细胞CD40基因突变体,分析RPMI8226细胞经CD40抗体或配体四种不同方式(CD40单抗、CD40单抗包板、rhsCD40L和CD40L转基因细胞)刺激后,其体外生长曲线、细胞表型及细胞周期的变化,并利用激光共聚焦显微镜对RPMI8226细胞表面CD40信号转导体的形成进行初步分析.结果 RPMI8226细胞表达CD40突变体(TCA→TTA,Ser→Leu),但是该点突变并未影响hmuCD40的抗原表位.三种激发CD40活化的分子(CD40单抗、rhsCD40L和CD40L转基因细胞)并不影响RPMI8226细胞的体外增殖,但是CD40单抗包板能明显抑制RPMI8226细胞的增殖[(2.5±0.6)×105 vs (7.8±1.2)×105,P＜0.05],并产生明显的G1期阻滞[(58.0±3.6)% vs (42.0±2.3)%,P＜0.05].RPMI8226细胞上黏附分子和共刺激分子的表达无明显变化.激光共聚焦显微镜分析结果显示,在CD40被激活后能形成CD40信号传导的复合体.结论 RPMI8226细胞高表达一种CD40基因突变体,该突变体能在被激活后形成相应的信号传导复合体.
关键词： RPMI8226细胞 抗体 CD40 CD40配体 DNA突变分析 -
抑制缺氧诱导因子-1α表达对多发性骨髓瘤RPMI8226细胞裸鼠体内成瘤性的影响
目的 利用RNA干扰(RNAi)技术抑制多发性骨髓瘤(MM)细胞系RPMI8226细胞中缺氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor,HIF-1α)表达,探讨对RPMI8226细胞在裸鼠体内成瘤性的影响.方法 利用短发夹RNA(shRNA)表达载体pSilencer 2.1-U6 hygro构建RNAi载体,在RPMI8226细胞中抑制HIF-1α的表达.应用RT-PCR技术和Western blot方法 ,鉴定RNAi后HIF-1α的表达.ELISA法测定细胞上清中血管内皮生长因子(VEGF)表达的改变.流式细胞术检测RNAi前后细胞周期的改变.研究缺氧(PO2为1%)条件下,抑制HIF-1α的表达对其靶基因VEGF和葡萄糖转运蛋白(Glut-1)表达的影响.利用异种移植瘤模型观察HIF-1α干扰后对肿瘤生长的影响.结果 RNAi后,HIF-1α的表达在mRNA和蛋白水平均明显降低.常氧条件下,RNAi组(RPMI8226-i1和RPMI8226-i2)和未干扰组(RPMI8226-c和RPMI8226)细胞上清中VEGF浓度无明显差异;缺氧条件下四组细胞上清中VEGF浓度分别为(506.0±53.2)、(494.7±63.1)、(984.4±61.9)和(938.2±62.2)pg/ml.RPMI8226-i1和RPMI8226-i2组较RPMI8226-c和RPMI8226组明显降低(P＜0.05).G0/G1期累积受到抑制,S期细胞比例增加.缺氧条件下VEGF和Glut-1等靶基因的表达明显下调(P＜0.05).裸鼠皮下成瘤性实验表明,抑制HIF-1α的表达,能够明显抑制肿瘤的生长.结论 RNAi抑制RPMI8226细胞HIF-1α表达,可能通过抑制肿瘤的血管新生和糖代谢过程来发挥肿瘤抑制作用.
关键词： RNA干扰 缺氧诱导因子-1α RPMI8226细胞 成瘤性 -
氟达拉滨、米托蒽醌对多发性骨髓瘤细胞株RPMI8226 KM3的增殖抑制作用
目的:观察氟达拉滨、米托蒽醌对两株不同多发性骨髓瘤细胞RPMI8226、KM3体外增殖的抑制作用.方法:采用MTT法观察1.25～20μg/mJ氟达拉滨及联合应用米托蒽醌处理RPMI8226、KM3细胞后其增殖的变化.结果:氟达拉滨剂量逐渐增大时,对两株多发性骨髓瘤细胞抑制率逐渐增强(P<0.01).氟达拉滨对RPMl8226细胞的IC50为5.261μg/ml,对KM3细胞的IC50为4.931μg/ml.氟迭拉滨联合米托蒽醌对RPMI8226、KM3细胞的增殖抑制作用显著强于氟达拉滨或米托蒽醌单独处理组(P<0.01).结论:氟达拉滨对两种不同性质的多发性骨髓瘤细胞株均有明显的杀伤作用.氟达拉滨联合米托蒽醌能更有效地抑制多发性骨髓瘤细胞的增殖,为临床治疗多发性骨髓瘤提供实验依据.
关键词： 氟达拉滨 米托蒽醌 RPMI8226细胞 KM3细胞 -
丹参酮诱导多发性骨髓瘤RPMI8226细胞凋亡及其对CD54、VEGF表达的影响
目的 探讨丹参酮抑制多发性骨髓瘤(MM)RPMI8226细胞生长及其对细胞黏附分子CD54和血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响.方法 将丹参酮与RPMI8226细胞共培育,采用MTT法观察细胞生长,AnnexinV-FITC/PI双染色流式细胞仪检测细胞凋亡,流式细胞仪检测细胞膜表面CD54和VEGF的表达.结果 表明丹参酮对RPMI8226细胞具有明显的生长抑制作用,呈量效关系; 丹参酮诱导RPMI 8226细胞凋亡,丹参酮作用于RPMI8226细胞48 h导致VEGF和CD54表达减少.结论丹参酮抑制RPMI8226细胞的生长诱导其凋亡,同时降低VEGF、CD54等细胞黏附分子表达.
关键词： 丹参酮 多发性骨髓瘤 RPMI8226细胞 细胞凋亡 黏附分子 -
锯叶棕提取物对RPMI8226细胞凋亡相关蛋白表达的影响
[目的]探讨锯叶棕提取物对RPMI8226细胞凋亡的影响以及对细胞凋亡相关蛋白表达的影响.[方法]①体外培养的RPMI8226细胞加入到不同浓度的锯叶棕提取物(0.5或1.0μL/mL)培养24h,利用流式细胞仪测定位于前G1时期的细胞百分比以检测细胞凋亡;②体外培养的RPMI8226细胞加入到锯叶棕提取物(1.0μL/mL)培养24h,应用Western Blot检测PARP、MCl-1蛋白表达.[结果]①锯叶棕提取物诱导RPMI8226细胞凋亡具有剂量依赖性(P<0.05);②RPMI8226细胞暴露于锯叶棕提取物(1.0μL/mL)培养24h,PARP蛋白水平表达明显增加,但不能调整Mcl-1.[结论]锯叶棕提取物诱导RPMI8226细胞凋亡.
关键词： RPMI8226细胞 锯叶棕提取物 细胞凋亡 PARP Mcl-1 -
维生素K3和三氧化二砷诱导多发性骨髓瘤细胞凋亡的协同作用
目的:探讨三氧化二砷(As2O3)联合维生素K3对人多发性骨髓瘤细胞株RPMI8226细胞生长抑制及诱导凋亡作用机制.方法:采用四甲基噻唑氮蓝比色法检测As2O3联合VK3对RPMI8226细胞生长抑制作用DNA电泳、流式细胞术Annexin V/PI标记法检测凋亡,观察As2O3联维生素K3对RPMI8226细胞的增殖抑制及促凋亡作用；同时通过RT-PCR检测VEGF表达来观察VK3、As2O3对RPMI8226细胞的凋亡诱导作用及两者是否有协同作用.结果:VK3和As2O3二者均可明显抑制RPMI8226细胞系的增殖,其作用机制可能通过降低Bc-2mRNA的表达、诱导调亡,这种效应具有时间与剂量依赖性；二者间具有协同作用.经VK3和As2O3作用后的RPMI8226细胞出现凋亡细胞的特征；维生素K3(VK3)、As2O3单独及联用作用于RPMI8226细胞DNA凝胶电泳可见明显的梯形条带.与单用As2O3相比,As2O3联合VK3作用于RPM0I8226细胞48h后,细胞凋亡率显著增加(P＜0.05),G0/G1期细胞比例升高,S期细胞减少.RT-PCR检测表明RPMI8226细胞经VK3、As2O3单独及联合作用后血管内皮生长因子VEGF表达明显降低.结论:VK3、As2O3单用及联用对RPMI8226细胞有明显的增殖抑制作用和诱导凋亡作用,且具有一定的量效和时效关系.可能通过VEGF表达降低而起作用.VK3和As2O3在诱导RPMI8226细胞凋亡中具有明显的协同作用.
关键词： 维生素K3 三氧化二砷 多发性骨髓瘤 凋亡 RPMI8226细胞 -
丙戊酸钠协同硼替佐米对RPMI8226细胞的促凋亡作用
目的:以骨髓瘤细胞株RPMI8226为实验对象,观察丙戊酸钠(valproic acid,VPA)和硼替佐米(bortezomib,BZ)对此细胞株的增殖及凋亡的诱导情况.方法:实验分组如下:对照组,VPA单药组(1.0 mmol/L),BZ单药A组(10.O nmol/L),BZ单药B组(20.0 nmol/L),BZ单药C组(35.0 nmol/L),联合用药A组(VPAl.0 mmol/L+BZ10.0 nmol/L),联合用药B组(VPA l.0 mmol/L+BZ20.0 nmol/L),联合用药C组(VPA 1.0 mmol/L+BZ 35.0 nmol/L).用MTT技术检测细胞增殖抑制情况;流式细胞仪检测凋亡比例.结果:丙戊酸钠与硼替佐米单用对RPMI8226细胞株细胞增殖有抑制作用,有细胞凋亡,但丙戊酸钠与硼替佐米协同用药A组、B组、C组增殖抑制可达75.1％及凋亡情况可达68.9％(P＜0.01).结论:丙戊酸钠与硼替佐米协同用药后对RPMI8226细胞增殖抑制及诱导凋亡作用更显著,丙戊酸钠对硼替佐米有增敏作用.
关键词： 丙戊酸钠 硼替佐米 RPMI8226细胞 凋亡 -
姜黄素对人多发性骨髓瘤细胞的抑制作用及其机制
目的:探讨姜黄素(curcumin)对人多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)细胞H929、RPMI8226的抑制作用及其机制.方法:姜黄素处理细胞后,采用MTT法检测细胞的增殖抑制作用;FCM分析细胞凋亡和周期的变化;RT-PCR法检测存活蛋白(survivin)、Bcl-2和Bax mRNA表达的变化.结果:姜黄素可抑制细胞H929和RPMI8226的增殖,并呈时间和浓度依赖性.姜黄素诱导RPMI8226细胞凋亡,发生G2/M期阻滞.姜黄素处理H929和RPMI8226细胞后,survivin和Bcl-2 mRNA的表达明显下调,而Bax mRNA的表达明显上调.结论:姜黄素可抑制人MM细胞增殖并诱导其凋亡,推测姜黄素在转录水平影响survivin、Bcl-2、Bax的表达,可能是其抑制肿瘤的作用机制之一.
关键词： 多发性骨髓瘤 姜黄素 H929细胞 RPMI8226细胞 -
通关藤提取物体外对Jurkat、Raji、RPMI8226细胞的抑制作用研究
目的 探讨通关藤提取物对Jurkat、Raji、RPMI8226细胞的抑制作用及可能机制.方法 以不同浓度通关藤提取物处理Jurkat、Raji、RPMI8226细胞,MTT法检测其对3种细胞的抑制作用,Annexin V/PI双染法观察细胞形态并检测细胞的凋亡率,JC-1染色法检测细胞线粒体跨膜电位(△ψm)水平.结果 通关藤提取物对Jurkat细胞的抑制作用强,对RPMI8226细胞不敏感.25,50 μL/mL的通关藤提取物能降低Jurkat、Raji细胞内△ψm,并促进其凋亡.100 μL/mL的通关藤提取物也可降低RPMI8226细胞△ψm而诱导其凋亡.结论 通关藤提取物体外对部分淋巴细胞白血病细胞株和骨髓瘤细胞株有不同程度的诱导凋亡作用,可能是通过降低△ψm途径触发这些细胞凋亡.
关键词： 通关藤提取物 Jurkat细胞 Raji细胞 RPMI8226细胞 凋亡 -
姜黄素抑制 RPMI8226细胞增殖时丝裂原活化蛋白激酶及基质金属蛋白酶的表达
目的：姜黄素（Curcumin， Cur）对多种肿瘤细胞均具有明确的抑制增殖、诱导凋亡与部分分化、抑制迁移等方面作用。文中研究Cur体外抑制人多发性骨髓瘤细胞RPMI8226增殖时丝裂原活化蛋白激酶（ mitogen actived protein kinase ， MAPKs）及基质金属蛋白酶（ matrix metalloproteinases ， MMPs）家族成员的表达，探讨Cur的抗肿瘤分子机制。方法以不同浓度Cur 作用 RPMI8226细胞不同时间， MTT检测细胞增殖抑制率，流式细胞术检测细胞周期变化， Western blot 检测MAPKs家族成员的表达，明胶酶谱法检测细胞培养上清中MMPs的活性。结果 Cur呈时间-剂量依赖性抑制RPMI8226细胞增殖，使细胞阻滞于G2/M期[（12．72±0．68）％vs （4．79±0．15）％]。以6．25μmol/L、12．50μmol/L及25．00μmol/L Cur分别处理RPMI8226细胞，细胞内JNK和p-JNK的表达均呈药物浓度依赖性上升（P＜0．01），而ERK1/2及P38 MAPK的表达与阴性对照组相比无明显改变（ P＞0．05）。另各Cur处理组的细胞培养上清中MMP-2及MMP-9的活性，随着Cur药物浓度的上升而逐渐下降（P＜0．01）。结论一定浓度的Cur不仅可能激活MAPKs家族中的JNK信号通路，体外诱导RPMI8226细胞的凋亡，且还可能通过抑制MMPs的活性，影响RPMI8226细胞的浸润与转移。
-
苦参碱诱导RPMI8226细胞凋亡及其对Bcl-2、增殖细胞核抗原蛋白表达的影响
目的:研究苦参碱是否具有诱导RPMI8226细胞凋亡的生物学活性,探讨苦参碱对RPMI8226细胞Bcl-2及增殖细胞核抗原(PCNA)表达水平的影响及其作用的分子机制.方法:CCK-8法检测一定浓度的苦参碱对RPMI8226细胞的体外增殖抑制作用;AnnexinV/PI双染色法检测细胞凋亡;PI单染色法检测细胞周期改变;同时应用流式细胞术检测Bcl-2及PCNA蛋白表达的变化.结果:苦参碱对RPMI8226细胞生长具有明显的抑制作用,呈量效和时效关系;苦参碱能诱导RPMI8226细胞凋亡,呈量效关系;细胞周期分析,G0/G1期细胞相对增多、S期相对减少、G2/M期无明显变化.苦参碱处理组RPMI8226细胞中Bcl-2及PCNA蛋白的表达跟未加药组相比阳性表达率均降低.结论:苦参碱对RPMI8226细胞生长具有明显抑制作用,其作用主要通过诱导RPMI8226细胞产生细胞周期阻滞和凋亡,降低PCNA的表达.苦参碱诱导RPMI8226细胞凋亡过程中,Bcl-2蛋白表达下调对调控细胞凋亡有重要作用.
关键词： 苦参碱 RPMI8226细胞 细胞凋亡 细胞周期 Bcl-2 -
sFlt-1基因转染多发性骨髓瘤细胞的体外实验研究
背景与目的:血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)是多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)重要的促血管形成因子.本研究探讨人可溶性VEGF受体sFlt-1基因转染MM细胞株RPMl8226后对其生长的影响.方法:采用已构建的真核表达载体pcDNA3-sFlt-1,使用脂质体介导的方法转染RPMI8226细胞,RT-PCR及ELISA法检测sFlt-1的表达,MTT及ELISA法检测转染前后RPMI8226细胞生长及VEGF含量变化.结果:真核表达载体pcDNA3-sFlt-1成功转染RPMI8226细胞.转染后的RPMI8226细胞培养上清液中可检测到sFlt-1蛋白的表达,转染组RPMI8226细胞的生长受抑制,培养上清中VEGF的含量减少.结论:sFlt-1基因转染RPMI8226细胞后可表达具有生物活性的sFlt-1蛋白,抑制RPMI8226细胞的生长.
关键词： 血管内皮生长因子受体 转染 多发性骨髓瘤 RPMI8226细胞
