首页 > 文献资料
-
马归液对腺性膀胱炎大鼠模型Survivin、PTEN表达的影响
目的 观察马归液对腺性膀胱炎大鼠模型膀胱组织Survivin、PTEN表达水平的影响.方法 将40只腺性膀胱炎模型大鼠随机分成4组:生理盐水组、吡柔比星组、马归液1组、马归液2组,每组10只.分别灌注0.2 mL生理盐水、吡柔比星、马归液(每周1次)、马归液(每周2次),连续膀胱灌注8周.取各组大鼠膀胱组织进行病理学检查、透射电镜观察,并采用免疫组化和Real-time PCR方法检测Survivin、PTEN表达情况.结果 病理和透射电镜的结果显示,马归液可以抑制炎症细胞和修复细胞的损伤.与生理盐水组比较,吡柔比星组和马归液1、2组的PTEN平均灰度值及mRNA表达升高(P＜0.01),Survivin平均灰度值及mRNA表达降低(P＜0.01).与吡柔比星组比较,马归液1组PTEN平均灰度值及mRNA表达降低(P＜0.05),Survivin平均灰度值及mRNA表达升高(P＜0.05);与马归液1组比较,马归液2组的PTEN平均灰度值及mRNA表达升高(P＜0.05),Survivin平均灰度值及mRNA表达降低(P＜0.05).结论 马归液可提高PTEN并抑制Survivin表达,作用与吡柔比星相近,膀胱灌注每周2次效果更佳.
-
乳腺癌术后辅助化疗对外周血Caspase-3、Survivin表达的影响
目的 探讨乳腺癌术后辅助化疗对Caspase-3、存活素(Survivin) mRNA表达的影响及辅助化疗的意义.方法 接受乳腺癌切除术的患者52例,随机数字表法分为化疗组(30例)和未化疗组(22例).其中化疗组化疗方案为4EC-4T(环磷酰胺+表柔比星;序贯多西紫杉醇,各4个周期).比较两组患者外周血中Caspase-3、Survivin mRNA在术前1d和术后190 d的表达水平.结果 术前外周血中Caspase-3、Survivin表达水平差异无统计学意义(P＞0.05).术后化疗结束后,Survivin表达水平较术前明显下降(P＜0.05),且化疗组下降更显著(P＜0.05);Caspase-3表达水平较术前明显升高(P＜0.05),且化疗组升高更显著(P＜0.05).结论 乳腺癌术后辅助化疗可增加Caspase-3和降低Survivin表达水平,提示术后化疗抗肿瘤机制可能与特异性促进癌细胞凋亡,抑制肿瘤细胞微转移有关,外周血Caspase-3、Survivin表达水平可能在一定程度上反映乳腺癌细胞活动状态及患者预后情况.
-
PIK3CA、CCL5、Survivin基因与甲状腺癌相关性的新发现
三种基因PIK3CA、CCL5、Survivin参与多种疾病过程,尤其与癌症关系密切.研究表明,PIK3CA、CCL5、Survivin基因多态性在甲状腺癌的发生、浸润、转移、治疗和预后方面发挥重要作用.
-
Survivin特异小干扰RNA表达载体构建及对肺腺癌细胞增殖和凋亡的影响
目的 测定Survivin特异小干扰RNA(siRRA)表达载体对肺腺癌细胞A549 Survivin基因表达的抑制及对增殖和凋亡的影响.方法 构建Survivin特异性小干扰RNA表达载体,转染A549细胞,筛选出稳定表达的细胞株.用荧光实时定量反转录聚合酶链反应法、Western blot和免疫组化法检测Survivin基因mRNA和蛋白的表达水平,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞活性,流式细胞仪测定细胞凋亡率.结果 经测序鉴定证实成功构建Survivin-siRRA表达载体.Survivin基因mRNA表达量下降76.4%,Western blot显示蛋白表达下降84.5%,免疫组化法也显示Survivin蛋白表达下降.MTT法测定细胞增殖较对照组减慢(P＜0.01),细胞凋亡率较对照组增加8.95%(P＜0.01).结论 Survivin特异siRRA表达载体下调Survivin基因表达,抑制A549细胞的增殖,促进凋亡.
-
hTERT和survivin双靶点RNAi表达载体的构建及对人结肠癌SW480细胞的抑制作用
目的 构建人端粒酶反转录酶(hTERT)和生存素(survivin)基因表达的RNA共干扰载体,并检测其对人结肠癌SW480细胞中hTERT基因和survivin基因的干扰作用.方法 根据Genbank提供的hTERT和survivin cDNA序列,设计、筛选出高效、特异性强的干扰序列,构建特异性干扰hTERT基因和survivin基因的重组体pGenesil-1.1-survivin、pGenesil-1.2-hTERT,酶切、测序鉴定正确后,两个重组体均用HindⅢ和BamHⅠ双酶切,将pGenesil-1.1-survivin回收大片段,pGenesil-1.2-hTERT回收小片段,将回收大、小片段用T4 DNA连接酶定向连接,即构建成重组体pGenesil1.1-survivin-h TERT.将3个重组体分别转染SW480细胞,RT-PCR检测细胞中hTERT和survivin基因表达水平,MTT检测对SW480细胞增殖的影响.结果 构建的各质粒经限制性酶切及DNA测序均证明其质粒构建正确,RT-PCR检测hTERT和survivin基因表达水平明显降低(P＜0.05),各干扰质粒重组体对细胞增殖有明显的抑制作用(P＜0.05).结论 靶向survivin和hTERT基因的双干扰载体构建成功,为后续的结肠癌基因治疗研究奠定理论基础.
-
维生素E琥珀酸酯诱导人食管癌Eca-109细胞凋亡
目的 研究维生素E琥珀酸酯(VES)对人食管癌Eca-109细胞系增殖、凋亡及相关蛋白表达的影响.方法 实验组为不同浓度VES,对照组为同等体积RPMI-1640培养基,分别作用24、48和72 h后,MTT测细胞增殖；电镜观察细胞凋亡的形态学；流式细胞术(FCM)测凋亡率及survivin、caspase-3蛋白表达.结果 各实验组抑制率随VES处理浓度的增加、作用时间的延长而逐渐升高(P＜0.01).实验组细胞呈现不同程度凋亡改变,且随VES浓度增加,凋亡率逐渐升高(P＜0.05).各实验组survivin蛋白表达减少(P＜0.05),caspase-3蛋白表达增加(P＜0.05).Survivin与caspase-3表达呈负相关(r=-0.95,P＜0.05).结论 VES可抑制Eca-109细胞增殖、诱导凋亡,可能与下调survivin蛋白和上调caspase-3蛋白表达有关.
-
RNAi双沉默Survivin和hTERT基因抑制人结肠癌SW480细胞增殖促进凋亡
目的：探讨双向沉默Survivin和hTERT基因对结肠癌SW480细胞增殖和凋亡的影响，为结肠癌的基因治疗提供实验依据。方法设计并构建能够稳定转录shRNA并可分别及联合干扰Survivin和hTERT分子表达的质粒，将其转染结肠癌SW480细胞后，分阴性对照组、空白质粒对照组、 Survivin RNAi 组、hTERT RNAi 组和Survivin-hTERT RNAi组。转染48h后TRAP-PCR-ELISA法检测端粒酶活性，RT-PCR法检测Survivin和hTERT mRNA的表达，Western blot检测Survivin和hTERT蛋白的表达，流式细胞仪及cck-8法分别检测细胞凋亡和细胞增殖的变化。结果 Survivin-hTERT RNAi组SW480细胞端粒酶活性明显下降（ P ＜0.01）， Survivin-hTERT RNAi 组Survivin及hTERT的mRNA水平较正常对照组分别减低82.8％和73.6％（ P ＜0.01），蛋白表达抑制率分别为79.2％和66.7％（ P＜0.01）。实验各组中Survivin-hTERT RNAi组细胞增殖抑制率和凋亡率高，分别为43.6％±0.1％和39.2％±2.3％（ P＜0.01）。结论 Survivin和hTERT双干扰质粒可明显下调Survivin和hTERT蛋白的表达，抑制结肠癌SW480细胞的增殖，促进其凋亡。
-
TBB通过WNT/β-catenin通路抑制甲状腺滤泡状癌细胞FTC133的增殖与迁移
目的 观察四溴苯三唑(TBB)对甲状腺滤泡状癌细胞系FTC133的CK2α、β-catemn和SURVIVIN的mRNA和蛋白表达的影响,探讨TBB抗甲状腺癌的作用机制.方法 体外培养FTC133细胞,分对照组(DMSO组)和TBB组(终浓度为12.5、25和50 μmol/L),MTT法测定细胞增殖抑制率;划痕实验测定细胞迁移;RT-PCR和Western blot法分别检测FTC133细胞CK2α、β-catenin和SURVIVIN的mRNA和蛋白表达.结果 与对照组比较,TBB呈剂量依赖性抑制FTC133细胞的增殖和迁移.各TBB处理组CK2α mRNA表达水平明显降低(P ＜0.01);TBB组随着浓度的逐渐加大,CK2α、β-catenin和SURVIVIN蛋白表达下降(P＜0.01).结论 TBB在一定浓度范围内抑制甲状腺滤泡状癌细胞系FTC133的增殖和迁移,其机制可能与TBB下调CK2α表达进而抑制WNT/β-catemn信号通路有关.
-
左炔诺孕酮下调survivin基因促进人子宫肌瘤细胞凋亡
目的 探讨左炔诺孕酮(LNG)诱导人子宫肌瘤细胞(UtLMC)凋亡过程中survivin的表达变化.方法 原代培养人子宫肌瘤细胞传代后,加入不同浓度LNG,以AO/EB双染法区分早、晚期凋亡细胞和坏死细胞；RT-PCR检测抑凋亡基因survivin mRNA的表达,Western blot测定survivin蛋白的表达.结果 10 mg/L LNG作用UtLMC后早期凋亡细胞多于阴性对照组,随着LNG剂量的增加,晚期凋亡细胞也逐渐增多,核浓聚、偏位,被染成桔红色；在10 mg/L以上LNG诱导的UtLMC凋亡中,survivin mRNA表达显著下降,蛋白表达由对照组的33.82±0.02下降至10.37±0.03 (P ＜0.05).结论 一定浓度的左炔诺孕酮所诱导的人子宫肌瘤细胞凋亡,可能与抑制survivin抗凋亡活性相关.
-
Survivin在塞来昔布诱导非小细胞肺癌细胞株凋亡中的作用
目的 观察survivin在塞来昔布诱导非小细胞肺癌(NSCLC)细胞株凋亡中的作用.方法 用MTT法检测细胞株的增殖,用流式细胞学、透射电镜检测细胞株的凋亡,用RT-PCR、Western blot检测survivin的mRNA及蛋白表达.结果 ①塞来昔布对NSCLC有明显的剂量依赖性和时间依赖性抑制作用,塞来昔布对鳞癌细胞株NCI-H520的抑制率明显高于对腺癌细胞株A549的抑制率;②塞来昔布诱导NSCLC凋亡,凋亡随剂量的增加而增加;③塞来昔布作用后survivin的mRNA及蛋白表达减少.结论 塞来昔布可能是通过降低survivin的mRNA及蛋白表达水平,诱导NSCLC细胞凋亡.
-
结直肠腺癌组织survivin和Ki-67的表达及其与预后的关系
目的 探究存活蛋白(survivin)和Ki-67在结直肠腺癌中的表达及与预后的关系.方法 用免疫组化SP法和原位杂交法检测survivin和Ki-67蛋白在30例正常结直肠组织、60例结直肠腺癌中的表达水平,分析survivin和Ki-67与病理参数及结直肠癌预后的关系.结果 60例结直肠癌组织中survivin和Ki-67蛋白阳性表达分别为73.34％ (44/60)和80.00％(48/60),显著高于30例癌旁正常组织中的10.00％(3/30)和6.67％ (2/30),(P＜0.01);survivin mRNA在结直肠癌组织、癌旁正常组织中阳性表达分别为76.67％、6.67％;survivin和Ki-67在结直肠癌组织中的表达呈正相关(P＜0.05).Survivin、Ki-67的表达与结直肠癌的TNM分期、肠壁侵润深度、淋巴结转移、肝转移和腹腔微转移均呈正相关(P＜0.05).survivin和Ki-67阳性表达患者1、3和5年生存率较低.survivin、Ki-67、TNM分期、淋巴结转移、肝转移和腹腔微转移是结肠癌患者预后的独立危险因素.结论 Survivin和Ki-67的异常表达与结直肠腺癌发生、发展及预后密切相关,其有望成为结直肠癌诊疗的新靶点.
-
在SW480细胞中沉默survivin基因抑制细胞增殖及hTERT表达
目的 观察生存素(survivin)基因干扰对SW480细胞增殖的影响,探讨其干扰对hTERT基因表达的影响及机制.方法 构建携带survivin小发夹干扰RNA的重组表达载体pGenesil-1.1-survivin,转染结肠癌SW480细胞,MTT检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞增殖周期;荧光定量PCR和Western blot检测survivin、h TERT和Sp1的mRNA和蛋白表达,TRAP-ELISE法检测端粒酶活性.构建靶向Sp1基因的RNA干扰载体转染SW480细胞,检测hTERT基因mRNA和蛋白水平及端粒酶活性.结果 Survivin基因干扰后,SW480细胞增殖受到明显抑制,增殖抑制率为34.44％ (P ＜0.05),G0/G1期细胞增加,S期和G2/M期细胞减少(P＜0.01).hTERT和Sp1基因的mRNA和蛋白表达水平显著降低,端粒酶活性降低(P＜0.01).Sp1基因干扰后,hTERT基因的mRNA和蛋白表达水平及端粒酶活性下降(P＜0.01).结论 靶向沉默survivin基因对SW480细胞增殖有明显的抑制作用;同时下调hTERT基因表达,其机制可能与Sp1基因表达下调有关.
-
宫颈癌组织中survivin与BCL-X表达及其相关性
目的 研究宫颈癌组织中 survivin、BCL-X的表达及其相关性.方法 用免疫组化SP法检测survivin、BCL-X在10例正常宫颈组织及51例宫颈癌组织中的表达.结果 Survivin在正常宫颈组织中不表达,在宫颈癌组织中表达阳性率为64.71%,Survivin表达阳性率与宫颈癌病理分级与临床分期呈正相关.Survivin表达阳性率与宫颈癌组织中 BCL-X表达正相关.结论 Survivin异常表达引起的凋亡抑制在宫颈癌发生、发展中起一定作用,其过表达提示宫颈癌预后不良.宫颈癌组织中survivin的表达与BCL-X的表达呈正相关.
-
RNAi下调survivin表达诱导成人神经细胞瘤细胞凋亡
目的利用RNA干扰技术下调凋亡抑制因子survivin在人成神经细胞瘤细胞系SH-SY5Y中的表达,并评价其对肿瘤细胞凋亡的影响.方法将设计合成的寡核苷酸片段退火后连入pBSHH1构建survivin的短发夹RNA表达质粒pBSHH1-survivin;通过RT-PCR和Western印迹评价其对SH-SY5Y细胞内源性survivin表达的抑制作用;运用Hoechst33258核染色、DNA凝胶电泳以及Annexin FITC染色检测survivin表达下调对SH-SY5Y细胞凋亡的影响.结果酶切和DNA测序证实survivin的短发夹RNA表达质粒构建成功;RT-PCR和Western印迹表明质粒转染SH-SY5Y细胞后能明显下调survivin的表达;Hoechst33258核染色、DNA凝胶电泳以及Annexin V FITC染色显示下调survivin的表达能诱导SH-SY5Y细胞凋亡.结论成功构建了有效针对survivin的短发夹RNA表达质粒;下调survivin的表达能诱导SH-SY5Y细胞凋亡.
-
RNAi抑制Survivin基因表达增加细胞凋亡
能有效抑制SURVIVIN基因的表达,caspase 3/7的活性明显增强.
关键词： RNA干涉 survivin 半胱氨酸蛋白酶3/7 -
Ki-67抗原和Survivin基因在上皮性卵巢癌中表达增强且相关
目的探讨卵巢上皮性肿瘤中Ki-67抗原和Survivin的表达及其相关性.方法用免疫组织化学技术二步法检测47例上皮性卵巢癌和24例良性上皮性卵巢肿瘤中Ki-67抗原和Survivin的表达.结果Ki-67阳性染色位于细胞核,良性肿瘤中Ki-67指数为0.17±0.20,显著低于恶性的19.59±16.48(P＜0.01).Survivin在良性卵巢肿瘤中的表达率为33.33%,显著低于恶性的70.21%(P＜0.01).Ki-67和Survivin在上皮性卵巢癌中的表达均与组织学类型无关,而与临床分期及病理学分级密切相关(P＜0.01).Ki-67和Survivin的表达有相关性.结论Ki-67和Sur-vivin基因在卵巢癌中表达增强且相关.
-
宫颈癌组织中survivin和CD44v6的表达及其与HPV16/18感染的相关性
目的 研究survivin、CD44v6在宫颈癌组织中的表达及其与HPV16/18感染的相关性,以探讨宫颈癌的发生机制. 方法 用免疫组化方法进行survivin和CD44v6的检测,用PCR检测HPV16/18感染情况. 结果 survivin和CD44v6的阳性率在宫颈癌组织中远高于CIN和正常宫颈组织,差异显著(均P＜0.01),其表达率与淋巴结转移有关(均P＜0.05).CD44v6随着临床分期、病例分级的升高阳性率升高(P＜0.05),survivin的阳性率则随着病例分级的升高而增加(P＜0.05).HPV16/18在正常宫颈组织、CIN和宫颈癌中的阳性率逐渐升高(P＜0.01),但与临床分期、病理分级、淋巴转移无关.survivin与HPV16/18感染有相关性(P＜0.05). 结论 宫颈癌组织中survivin的异常表达与HPV16/18感染有关.survivin和CD44v6与宫颈癌的恶变程度有关,可作为宫颈癌筛查预后判断的有利指标.
关键词： survivin CD44V6 人乳头瘤病毒(HPV) 宫颈癌 -
VEGF上调不同类型细胞Survivin的表达
目的 探讨血管内皮生长因子(VEGF)对结肠癌细胞(LOVO、HCT116)、人脐静脉血管内皮细胞(HUVECs)Survivin表达的影响和存在的差异.方法 VEGF刺激体外培养的LOVO、HCT116、HUVECs并检测细胞周期和凋亡的变化,用RT-PCR测定mRNA表达,Western blot测定蛋白表达,用免疫细胞化学测定Survivin蛋白表达和部位.结果 VEGF可促进肿瘤细胞增殖,在结肠癌细胞中Survivin表达水平较高,在VEGF诱导后表达上调(P<0.05),主要分布在细胞质;在HUVECs中,Survivin表达不明显,VEGF诱导后表达明显上调(P<0.05),在细胞质和细胞核中均有较高表达.结论 VEGF上调3种细胞Survivin mRNA和蛋白表达,但在肿瘤和非肿瘤细胞Survivin上调的程度和分布存在差异.
关键词： 血管内皮细胞生长因子 survivin 结肠癌 诱导 -
shRNA抑制人肺癌细胞A549 SURVIVIN基因表达
目的 构建存活素(SURVIVIN)基因的短发夹RNA(shRNA)表达质粒,为肺癌RNA干扰(RNAi)途径的基因治疗打下基础.方法 设计并合成SURVIVIN短发夹结构模板序列,与穿梭载体重组质粒后转染人肺癌细胞A549,通过RT-PCR法筛选出抑制效果强的质粒;MTT和Western blot法检测该质粒对细胞增殖和SURVIVOIN表达的影响.结果 构建和筛选出抑制作用强的质粒;该质粒能明显抑制A549细胞的增殖和SURVIVIN的表达.结论 在RNAi的介导下,SURVIVIN的表达被下调,为肺癌的基因治疗提供实验依据.
-
骨肉瘤中survivin与核殷子-κB的表达及临床意义
目的:探讨凋亡抑制基因survivin与核因子-κB(nuclearfactor kappa B,NF-kB)在骨肿瘤中的表达及临床意义.方法:采用免疫组化染色方法检测了105例骨肿瘤(其中骨肉瘤85例、骨软骨瘤20例)中survivin与NF-κBp65蛋白的表达,并对骨肉瘤主要临床资料和病理分级参数进行比较,用χ2检验进行统计学处理.结果:在骨肉瘤中survivin与NF-κB65蛋白阳性表达率分别为75.3%、63.5%,而在骨软骨瘤中的阳性表达率均为0.0%.survivin与NF-κBp65蛋白在骨肉瘤临床分期中Ⅱb期、Ⅲ期的表达率明显高于Ⅰ、Ⅱa期(P＜0.001).病理分级survivin与NF-κBp65蛋白阳性表达率分别为Ⅰ级45.0%、35.0%,Ⅱ级73.5%、58.8%,Ⅲ级96.8%、87.1%,随着恶性程度增高而显著增加(P＜0.001).有软组织浸润和转移者survivin与NF-κBp65蛋白阳性表达率明显高于非浸润和非转移组(P＜0.001～0.005).NF-κB p65和survivin同时表达者87.0%(47/54),明显高于NF-κB P65阴性表达中survivin阳性表达54.8%(17/31),两组有明显差异(P＜0.05).结论:凋亡抑制基因survivin与NF-κB p65蛋白在骨肉瘤中不同程度异常表达与肿瘤的临床分期、病理分级和浸润、转移呈正相关,提示survivin与NF-κB p65蛋白的高表达可能与骨肉瘤的发生发展和转移密切相关.
