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  • 金黄色葡萄球菌毒力基因检测及Spa分型研究

    作者:袁梦;袁月明;罗锦雁;陈宏彬;胡鹏威;段永翔

    目的 研究深圳市南山区2009-2015年医院内患者临床检测标本、医院台面与医护人员双手涂抹样以及食物中毒样本中金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,SA)蛋白A基因多态性分型(single locus DNA-sequencing of the repeat region of the Staphylococcus protein A gene,Spa)的特征及毒力基因分布情况.方法 采用多重PCR方法检测SA的mecA与femA基因,PCR方法检测24个毒力基因以及SA蛋白A基因,PCR产物测序后序列上传数据库进行比对.结果 87株SA共检出48株耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistantS.aureus,MRSA),检出率为55.2%.共检出21种毒力基因,检出率>60%的毒力基因有LUKDE(65.5%)、SHE(67.8%)、mpHLG2 (85.1%)、HLD(93.1%)和HLA(100.0%).94.3%菌株携带5个以上毒力基因.三类样本中有11种毒力基因检出率差异有统计学意义,分别是SEB、rnpSEC、mpSEJ、mpSEO、TST、HLB、HLD、mpHLG1、mpHLG2,mpETB和PVL.其中mpETB与PVL仅在患者中检出,肠毒素基因在食物中毒株中携带率较高.MRSA与甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(methicillin-sensitiveS.aureus,MSSA)的3种毒力基因检出率差异有统计学意义,分别是mpETA、PVL及mpHLG2;MRSA的毒力基因mpETA与PVL检出率明显高于MSSA(P=0.033,P=0.030),而mpHLG2检出率明显低于MSSA(P =0.021).87株SA分为24种Spa型,患者优势型别为t030(30.0%)与t437 (36.7%),医院其他样本优势型别为t091 (50.0%),食物中毒优势型别为t127 (36.8%)与t091 (21.1%).结论 三类样本部分毒力基因检出差异有统计学意义.MRSA与MSSA携带毒力基因差异无统计学意义.三类样本中均存在优势的Spa型别.

  • 南湖菱壳抗菌活性研究

    作者:张伟;薛志平;黄嬛;康文艺

    目的:研究南湖菱壳不同提取部位的体外抗菌活性.方法:采用K-B法测定MIC(低抑菌浓度)和液体培养法测定南湖菱壳不同提取部位对金黄色葡萄球菌(SA)、耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌(MRSA)和β-内酰胺酶阳性金黄色葡萄球菌(ESBLs-SA)的IC50(半数抑菌浓度).结果:南湖菱壳的石油醚部位、乙酸乙酷部位和正丁醇部位对SA,MRSA和ESBLs-SA均有抑制作用,其中石油醚部位对SA(IC50=0.82 g·L-1),MRSA(IC50=0.62 g·L-1),ESBLs-SA(IC50=0.34 g·L-1)的抑制作用好.结论:南湖菱壳不同部位的提取物对3种菌均有较好抑菌活性.

  • 9种蓼科植物抗菌活性

    作者:王培卿;张橡楠;刘瑜新;李昌勤;康文艺

    目的:研究9种蓼科植物的体外抗菌活性.方法:采用纸片扩散法和多孔板法研究9种蓼科植物的不同提取物对金黄色葡萄球菌(SA)、耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌(MRSA)和β-内酰胺酶阳性的金黄色葡萄球菌(ESBLs-SA)的抑制活性.结果:四季红甲醇提取物和四季红乙酸乙酯提取物质量浓度在50 g·L-1对SA,MRSA和ESBLs-SA的抑菌圈直径较大,其中四季红乙酸乙酯提取物对3种菌均有抑制作用,MIC全部为0.062 5 g·L-1;多孔板法中,辣蓼乙酸乙酯提取物(IC50 0.45 g·L-1)活性好.结论:实验证明蓼科植物提取物对SA,MRSA,ESBLs-SA有较好的抑制作用,尤其是四季红和辣蓼的抗菌活性较显著.

  • 2078份尿及痰标本的细菌分布及耐药情况分析

    作者:白小刚;张西安

    材料与方法1 菌株来源本院2010年6月1日至2012年5月31日,2078份临床送检的中段尿及痰标本,分离出菌株908株,其中尿(316株),痰(592株).药敏试验质控菌株为大肠埃希菌ATCC25922、铜绿假单胞菌ATCC27853,两种质控菌株均来自卫生部临床检验中心.2仪器与试剂VITEK 2-compact全自动细菌鉴定及药敏分析仪以及配套试剂购自法国生物梅里埃公司,药敏纸片购自英国OXOID公司.3细菌鉴定均采用全自动细菌鉴定及药敏分析仪鉴定.4纸片扩散法药敏试验测定临床常用的19种抗菌药物的抑菌圈直径.并参照新的CLSI判读标准.

  • 重症监护室耐甲氧西林金黄色葡萄球菌感染的控制

    作者:尹春元

    重症监护室(ICU)的患者病情危重、复杂,自身抵抗力低下,抗药性细菌增加,加上各种创伤性治疗、监测,患者易感性增加,所以ICU患者院内感染率比其他院内患者高出3倍[1].革兰阳性球菌20世纪90年代以后已成为监护室重要的致病菌之一,耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)高达93.3%[2].

  • 耐甲氧西林与甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌血流感染的临床特征与耐药性分析

    作者:吴珍;王莉洁;喻航;杜明梅;粱志欣;陈良安

    目的 探究耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌(methicillin resistant Staphylococcus aureus,MRSA)和甲氧西林敏感的金黄色葡萄球菌(methicillin-sensitive Staphylococcus aureus,MSSA)血流感染的临床特征及药敏情况.方法 收集解放军总医院2010年1月-2014年12月所有确诊为金黄色葡萄球菌血流感染的患者资料,分析耐甲氧西林金黄色葡萄球菌血流感染与甲氧西林敏感的金黄色葡萄球菌血流感染的临床特征与药敏之间的差异.结果 共纳入183例患者,其中男性118例,女性65例;平均年龄(49.94±15.73)岁.金黄色葡萄球菌血流感染的致病菌以MRSA为主(59.6%),其中社区获得性金黄色葡萄球菌血流感染的致病菌50.8%仍为MRSA.MRSA和MSSA血流感染在性别、既往脑梗死病史、感染部位、住院期间手术史、感染性休克发生率、科室分布及死亡率等临床特征方面的差异有统计学意义(P<0.05).氨苄西林/舒巴坦,左氧氟沙星、利福平对MSSA的抗菌作用明显强于MRSA(P<0.05).结论 金黄色葡萄球菌血流感染中MRSA占比较高,且MRSA和MSSA血流感染在临床特征及耐药性方面差异明显,在临床诊治上应区别对待.

  • 开封肉猪沙门菌和耐甲氧西林金葡菌污染状况分析

    作者:黄淑华;陈磊;刘杰;张春艳

    目的 了解开封地区肉猪养殖及屠宰环节食源性致病菌的污染状况.方法 对肉猪养殖环境和生猪屠宰过程随机采样,应用细菌的分离培养、生化鉴定和血清学鉴定,针对沙门氏菌和耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌等致病菌进行跟踪监测.结果 264份样品中,共检出阳性菌株72株,其中沙门氏菌44株,阳性率为23.5%;耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌28株,阳性率为36.4%.结论 肉猪养殖和屠宰环节存在较为严重的致病菌污染,应引起足够重视.

  • 1654株金黄色葡萄球菌耐药性及pvl、qacA/B基因分析

    作者:林茹;魏军;殷国民;董辉;贾伟;赵志军

    目的 了解宁夏医科大学总医院金黄色葡萄球菌临床耐药及p以、qacA/B基因携带情况,为MRSA防治提供数据支持.方法 用VITEK-2全自动细菌鉴定仪和K-B纸片扩散法对临床分离的1 654株金黄色葡萄球菌进行细菌鉴定及药敏试验,PCR检测MRSA菌株vl和qacA/B基因,用WHONET 5.6和SPSS 17.0软件进行统计分析.结果 本院金黄色葡萄球菌主要来源于脓液(42.5%)和痰液(32.0%);检出率较高的科室为烧伤科(29.8%)、骨科(11.0%)、脑外科(10.0%)和ICU(9.8%);MRSA平均检出率为50.1%,不同年份间MRSA检出率差异有统计学意义;MRSA对多种抗生素耐药性较高,耐药率明显高于MSSA,尚未发现呋喃妥因、利奈唑胺、万古霉素、替考拉宁的MRSA耐药菌株;MRSA基因检测结果显示pvl和qacA/B基因携带率分别为1.23%和0.55%.结论 医院应加强对金黄色葡萄球菌感染高发病区的防治工作,同时完善对耐药菌株pvl和qacA/B基因的监测,规范抗生素使用,降低耐药菌株的发生率.

  • 化脓性乳腺炎病原菌分型对比分析

    作者:罗强;林敏;徐宁;屈平华

    目的:以不同类型化脓性乳腺炎病原菌分布的对比性研究,来探讨化脓性乳腺感染的预防和经验治疗策略。方法收集从乳腺炎患者组织块、脓液、分泌物、乳汁等标本中分离鉴定的病原菌,结合患者临床资料和影像学资料进行归类,对比分析不同类型乳腺炎病原菌的分布特点。结果179例标本阳性率为49.16%,以急性乳腺炎、哺乳期乳腺炎和积乳型乳腺炎阳性率较高,阳性率分别为71.43%、84.31%、75.00%。88例阳性的标本中,急性乳腺炎、哺乳期乳腺炎和积乳型乳腺炎以革兰阳性球菌为主,尤其是金黄色葡萄球菌;慢性、非哺乳期乳腺炎和肉芽肿型乳腺炎以革兰阳性杆菌为主,尤其是亲脂性棒状杆菌。41株金黄色葡萄球菌中MRSA检出率为41.46%,不同分型间差异无统计学意义。结论不同类型化脓性乳腺炎的病原菌种类对比分析结果可以作为临床经验治疗的依据。

  • 金黄色葡萄球菌抗生素耐药相关基因检测

    作者:许艳子;袁梦;袁月明

    目的 检测医院及环境样中金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,SA)耐药基因,了解耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌(Methicillin Resistant Staphylococcus aureus,MRSA)和甲氧西林耐药凝固酶阴性葡萄球菌(Methicillin Resistant coagulase Staphylococcus aureus,MRCNS)检出率以及金黄色葡萄球菌耐药基因分布情况.方法 应用多重聚合酶链反应(Multiplex polymeras chain reaction,multiplex PCR)检测医院及环境样中金黄色葡萄球菌的mec A、femA基因.采用聚合酶链反应(Polymeras chain reaction,PCR)技术检测金黄色葡萄球菌的11种耐药基因,分别是β-内酰胺类耐药基因bla/TEM,氨基糖苷类耐药基因Aac(6′)/aph(2”) 、aph(3′)-Ⅲ、ant(3”)-Ⅰ、ant(4′,4”)与ant(6)-Ⅰ,四环素耐药基因tetM,红霉素耐药基因erm,万古霉素耐药基因vanA、vanB,耐消毒基因qacA.结果 44株菌分离自医院病人样本,检出12株MRSA,3株MRCNS.其中29株菌携带1种以上耐药基因,14株携带tetM基因,5株携带vanB基因,7株携带Aac(6′)/ph(2”)基因,9株携带aph(3′)-Ⅲ基因,7株携带ant(4′,4”)基因,5株携带ant(6)-Ⅰ基因.29株菌分离自环境样本,未检出MRSA与MRCNS.仅1株检出Aac(6′)/aph(2”)基因,16株检出ant(4′,4”)基因,其余10种耐药基因未检出.结论 院内样本中,不同样本分离菌株携带耐药基因存在差异,未检出携带qacA基因的菌株.环境样本携带ant(4′,4”)基因较高.检测耐药基因分布情况,为指导临床用药、控制院内感染及监测环境中菌株耐药情况提供依据.

  • 109株金黄色葡萄球菌培养及药敏结果分析

    作者:马瑛

    目的:了解该院金黄色葡萄球菌感染分布的特征及耐药性,为临床合理用药提供依据。方法对该院2010年6月至2013年6月临床分离到的109株金黄色葡萄球菌进行鉴定及药敏试验,并对其标本来源、耐药率进行统计分析。结果该院分离的金黄色葡萄球菌标本来源主要为痰、伤口分泌物和脓液、血液;患者主要分布在颅脑外科、断指再植科和呼吸内科及糖尿病专科;耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌(M RS A )检出率为56.0%(61/109),对青霉素的耐药率高达92.6%,对红霉素、克林霉素、庆大霉素、诺氟沙星耐药率大于50%,对万古霉素、替考拉宁、夫西地酸、呋喃妥因、喹奴普汀/达福普汀高度敏感。结论金黄色葡萄球菌为重要的条件致病菌且 M RS A的检出呈上升趋势,因此应重视病原学检测,正确选用抗菌药物。

  • 168株金黄色葡萄球菌的临床分布与耐药分析

    作者:张和平;王萍;甘强;李杨;武春秀

    目的 了解该院金黄色葡萄球菌的临床分布特点及耐药情况,指导临床合理用药,减少耐药菌株的产生.方法 对临床送检的合格标本进行细菌培养,采用VITEK-2 Compact全自动微生物分析系统进行鉴定和药物敏感试验.结果 从各类标本中分离出金黄色葡萄球菌168株,其中耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌(MRSA)59株,检出率为35.1%(59/168),分离的金黄色葡萄球菌标本主要来源于分泌物51.2%(86/168)、痰液22.0%(37/168)、全血5.4%(9/168)、置管液5.4%(9/168).MRSA分布的科室以神经科(30.5%)、普外泌尿科(22.0%)、骨科(15.2%)、心胸外科(8.5%)、呼吸科(8.5%)多见.对MRSA和非耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌(MSSA)耐药率为0的抗菌药物有万古霉素、利奈唑胺、替考拉宁、奎努普汀/达福普汀、呋喃妥因,青霉素、复方磺胺甲噁唑对MRSA的耐药率分别为100%、6.8%,对MSSA的耐药率分别为91.7%、12.8%,其余9种抗菌药物对MRSA的耐药率均高于MSSA.结论 加强耐药菌株的监测,规范临床用药,有利于控制感染.

  • 莫匹罗星对鼻腔内耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的去定植效果分析

    作者:刘金萍;董宏亮

    目的 观察通过对高危人群进行鼻前庭涂抹莫匹罗星对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌( MRSA )去定植的效果.方法 采用回顾性对照试验,选取医院2014年住院患者中的高危人群采用每日2次、共5 d的莫匹罗星鼻前庭涂抹,同时选取2011年至2013年住院患者中的高危人群作为对照组.结果 2011年、2012年、2013年、2014年医院共发生多重耐药菌96,125,167,183例,其中MRSA分别为19,25,55,35例,构成比分别为19. 79%,20. 00%,32. 93%,19. 13%.多重耐药菌检出标本类型以痰标本为主,构成比达50. 00%以上;这4年中MRSA在痰液中的检出率分别为47. 37%,52. 00%,52. 73%,28. 57%.结论 MRSA在医院高危人群中的定植现象较常见,鼻腔涂抹莫匹罗星能有效去定植,减少MRSA的检出.

  • 静脉留置针持续引流在MRSA感染性乳腺脓肿中的应用

    作者:张彦武;吕以东;牛耀东;严文君;冯爱强

    目的 观察和评价静脉留置针持续引流法治疗耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin resistant staphylococcus aureus,MRSA)感染性乳腺脓肿的有效性,探讨佳治疗方法.方法 对60例MRSA感染性乳腺脓肿患者进行回顾性分析,依据治疗方法分为持续引流组(n=36)和穿刺引流组(n=24),2组分别采用14 G静脉留置针持续引流法或20 mL注射器间歇穿刺抽吸法处理乳腺脓肿,同时根据药敏结果使用敏感抗生素,比较2组的治疗效果.结果 持续引流组和穿刺引流组基线资料比较差异均无统计学意义(P>0.05),具有可比性.2组的治愈率差异无统计学意义(P=0.717),持续引流组的平均治愈时间(P=0.001)及平均疼痛控制时间均较穿刺引流组短(P=0.038),2组的平均发热控制时间差异无统计学意义(P=0.127),持续引流组的平均穿刺次数较穿刺引流组少(P<0.001),持续引流组的日均引流量较穿刺引流组多(P<0.001).结论 与间歇穿刺抽吸法相比,静脉留置针持续引流法治疗MRSA感染性乳腺脓肿的疗效较好,可以缩短病程,减少患者痛苦,降低院感防控难度,是治疗MRSA感染性乳腺脓肿的理想选择.

  • 鼻腔内MRSA去定植治疗对严重创伤患者医院感染的影响

    作者:杨梦雅;陈彩花;庄海燕;陈兴旺;梁振裕;刘会红

    目的 观察鼻腔内耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)定植的严重创伤患者去定植治疗后对院内感染的影响.方法 选取我院2015年11月-2016年11月重症监护室(ICU)的严重创伤患者,入院后行鼻腔拭子细菌学检测,对有MRSA定植的86例患者随机分为观察组和对照组,每组43例.对照组给予常规治疗与隔离,观察组给予莫匹罗星擦拭鼻腔去定植治疗5d,两组于治疗后第5天复查鼻腔拭子,并观察患者院内感染情况,分析鼻腔MRSA定植与患者院内感染的关系,比较两组患者细菌清除率以及院内感染发生率.结果 观察组细菌清除率显著高于对照组(P<0.05);观察组鼻腔MRSA去定植治疗后其院内感染发生率显著低于对照组(P<0.05).结论 严重创伤患儿鼻腔MRSA的去定植治疗可以降低其院内感染的发生率.

  • 抗MRSA-PBP2a转肽酶区蛋白单克隆抗体的制备、鉴定及初步应用

    作者:徐霞;唐晓华;谢闺娥

    目的: 制备和鉴定抗MRSA-PBP2a转肽酶区蛋白单克隆抗体(mAb), 初步建立检测PBP2a的乳胶凝集方法.方法: 以基因工程重组PBP2a转肽酶区蛋白为抗原, 免疫BALB/c小鼠, 制备鼠源性mAb, 间接ELISA鉴定IgG亚类、腹水效价及亲和常数, Western blot检测mAb的特异性, 用所得mAb致敏聚苯乙烯乳胶, 建立检测PBP2a的乳胶凝集方法.结果: 筛选出2 株能稳定分泌抗PBP2a mAb的杂交瘤细胞株F1和F2, 免疫球蛋白亚类均为IgG1类; 腹水效价为0.5×106 ~1×106, 亲和力常数分别为1.57×108 M-1和5.43×109 M-1.Western blot显示F1、F2抗体均能有效识别重组PBP2a转肽酶区蛋白及MRSA临床分离株中的天然PBP2a, 用 mAb F2建立了乳胶凝集法, 敏感性达1 mg/L.结论: 获得2株特异性好、亲和力高、能稳定分泌抗PBP2a mAb的杂交瘤细胞株, 为研制MRSA快速鉴定试剂盒奠定了良好的基础.

  • 金黄色葡萄球菌抗生素耐药相关基因检测及蛋白A基因多态性分型研究

    作者:袁梦;袁月明;俞慕华

    目的 检测2011~2012年深圳市南山区某医院及环境样本中金黄色葡萄球菌(staphylococcus aureus,SA)耐药基因,对SA进行蛋白A基因多态性分型(single locus DNA-sequencing of the repeat region of the Staphylococcus protein Agene,Spa)研究.了解SA耐药基因分布情况以及Spa分型特点.方法 采用PCR技术检测SA的12种耐药基因,对SA蛋白A基因进行扩增,PCR产物测序,序列上传数据库进行比对.结果 27株菌分离自院内病人样本,13株检出mecA基因.其中15株菌检出2种以上耐药基因,3株菌未检出任何耐药基因.16株菌分离自环境样本,未检出mecA基因.15株菌检出ant(4',4")基因,仅1株菌检出Aac(6')/aph(2")基因,其余耐药基因未检出.43株SA分为15种Spa型,t091型为优势型别,检出率为27.9%(12/43),此型别在所有类型的样本中均有检出.结论 院内样本中,不同样本分离菌株携带耐药基因存在差异,院内病人样本分离菌株呈多重耐药.Spa分型,利于深圳市SA分子分型数据库的建立,对于疾病溯源有着重要意义.

  • 黄芩水提物中黄酮类化合物对耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌体外抑菌作用观察

    作者:归巧娣;任健康;李巧茹;苍金荣;刘文康

    目的 评价黄芩水提物中黄酮类化合物对耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌(MRSA)抑菌效果.方法 采用高效液相色谱分析法检测黄芩水提物中主要黄酮类化合物含量;体外配置与水提物含量相同的各主要黄酮类物质和其混合物;采用微量半固体琼脂稀释法检测各成分对30株MRSA的MIC值;联合抑菌试验采用棋盘稀释法检测各组分间的FIC值,分析其相互作用关系.结果 ①微量半固体琼脂稀释法检测黄芩苷对30株MRSA的MIC值为1.39 mg/ml~5.56 mg/ml,黄芩素对MRSA的MIC值为0.145 mg/ml;黄芩素作用强于黄芩苷,差异具有统计学意义(P<0.05);汉黄芩苷和汉黄芩素均无抑菌作用.②体外配置四种黄酮类化合物的混合物,混合物对MRSA的MIC稀释比例为1/8~ 1/16,水提物对MRSA的MIC稀释比例为1/16~1/32,水提物作用强于混合物差异具有统计学意义(P<0.05).③黄芩苷与黄芩素对MRSA的FIC值为3~4,具有相互拮抗作用.结论 黄芩水提物中黄芩苷和黄芩素对MRSA有抑菌作用,且黄芩素作用强于黄芩苷;黄芩苷和黄芩素间为相互拮抗作用;汉黄芩苷和汉黄芩素无抑菌作用.

  • 2014年-2016年宿迁市中医院临床分离病原菌的分布及耐药性分析

    作者:胡成侠;庞敏;胡梦梦

    目的 了解我院临床分离菌的分布及其耐药情况.方法 对2014年1月-2016年12月临床送检标本的阳性菌分布及药敏情况进行回顾性分析.结果 这3年期间临床共送检标本数3,670份,标本类型主要是痰、全血和尿液标本等.结论 这3年期间,该院所分离的病原菌主要以革兰阴性菌为主.

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