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  • NT-3基因修饰OECs-NSCs-复合细胞支架自体移植治疗脑出血的实验研究

    作者:汪春娟;杨锦珊;林华伟;付佩彩;郭守刚;唐荣华

    目的 观察神经营养因子-3(NT-3)基因修饰嗅鞘细胞-神经干细胞(OECs-NSCs)复合细胞支架自体移植对脑出血大鼠运动功能的影响.方法 建立Wistar大鼠尾状核脑出血模型,完全随机化分为A组:NT-3基因修饰的OECs-NSCs-复合细胞支架移植组;B组:NT3-OECs-NSCs-复合细胞移植组;C组:支架移植组;D组:空白对照组.各组移植后第1、3、7、14和30天进行运动神经功能评分,并经免疫组织化学染色及荧光染色鉴定移植细胞在大鼠脑内的生存、分布及分化情况.结果 A、B组在移植后第7、14、30天神经功能评分分别为(2.12 ±0.12、1.50±0.11、0.52±0.08)、(2.10±0.16、1.79±0.09、0.91±0.10)明显低于C、D组;C组与D组间差异无统计学意义(P>0.05).在第14天和第30天,A组评分明显低于B组(P <0.05,P<0.01).免疫组织化学方法证实A组移植后存活的NSCs数量较多、向损伤区迁徙的细胞较多.结论 NT-3基因修饰OECs-NSCS-复合细胞支架移植治疗能显著改善脑出血大鼠的运动功能,且移植的NSCs具有较强的存活、迁移及分化能力.

  • NT-3基因修饰的嗅鞘细胞移植对自身免疫性脑脊髓炎大鼠神经修复及功能恢复的影响

    作者:郭守刚;汪春娟;董泗芹;丛琳;刘光云

    目的 探讨神经营养因子-3(NT-3)基因修饰的嗅鞘细胞(OECs)对自身免疫性脑脊髓炎(EAE)大鼠神经修复及运动功能恢复的促进作用.方法 构建Lewis大鼠EAE模型,采用完全随机化法分为对照组、OECs组及OECs-NT-3组,每组20只,分别将生理盐水、OECs、OECs-NT-3移植入大鼠侧脑室内,每日进行神经功能缺损评分(NDS)评估大鼠肢体功能恢复情况,应用免疫组织化学检测及辣根过氧化物酶(HRP)逆行示踪技术对EAE神经纤维修复进行形态学观察.结果 细胞移植后,OECs-NT-3组大鼠神经功能评分明显低于OECs组,差异有统计学意义(P<0.05);第28天,大鼠体内OECs-NT-3存活数量较多,可向病灶远端扩散、迁徙;OECs-NT-3组单位面积内的神经纤维数目[第28天,(38.8±3.4)个]明显高于OECs组[第28天,(32.5±2.8)个](P<0.05);OECs-NT-3组HRP标记的神经元数目多于OECs组,差异有统计学意义(P<0.01).结论 NT-3基因修饰的OECs可在EAE大鼠体内存活、迁移,并可促进神经纤维再生,减轻皮质神经元的逆行性损伤,改善EAE大鼠的运动功能.

  • 双拷贝逆转录病毒载体介导的NT-3基因在嗅鞘细胞中的表达及其生物学活性

    作者:郭守刚;屈传强;杜怡峰;靳峰;王公明

    嗅鞘细胞(OEC)作为一种新颖的神经胶质细胞,可促进髓鞘和轴突的再生[1].神经营养因子-3(NT-3)是神经营养素家族众多成员中有效的一种,具有强大的诱导神经再生作用[2].

  • 新生鼠嗅鞘细胞培养的几种纯化方法的比较

    作者:胡志俊;马迎辉;王拥军;舒冰;周重建

    目的 对文献报道的嗅鞘细胞(OEC)纯化方法进行比较,寻找一种较优化的纯化方法,为细胞移植修复脊髓损伤实验研究提供高纯度的种子细胞.方法 实验分别比较了3种纯化方法:差速贴壁法、差速贴壁法联合阿糖胞苷化学纯化法、差速贴壁法联合NGFRp75抗体纯化法纯化原代培养的新生SD大鼠的OEC,并对纯化的OEC的形态学和免疫学特性等进行观察.结果 与另两种纯化方法相比,差速贴壁法联合NGFRp75抗体纯化法得到的OEC不仅纯度高而且细胞活性好.结论 该实验找到了一种纯化OEC的较优化方法--差速贴壁法联合NGFRp75抗体纯化法,此法得到的细胞较符合细胞移植的要求,为下一步细胞移植修复脊髓损伤实验研究打下了细胞学基础.

  • 嗅鞘细胞移植联合督脉电针对大鼠脊髓损伤后水通道蛋白-4的影响

    作者:彭忠勇;孙萍;陈志斌;修波;敖强;孙朝晖;赵振强

    目的:探索大鼠嗅鞘细胞(olfactory ensheathing cells,OECs)移植联合督脉电针对大鼠脊髓损伤(spinal cord injury SCI)后水通道蛋白-4(AQP-4)和后肢功能的影响。方法:取Wistar大鼠150只,随机分为正常组(50只)、OECs移植组(50只)、OECs移植联合督脉电针组(50只),OECs移植联合督脉电针组和OECs移植组用改良的Allen法制成脊髓损伤模型,造模成功后, OECs移植组和OECs移植联合督脉电针在损伤处移植嗅鞘细胞。于术后1、3、7、14、21、28天进行BBB (Basso-Beattle-Bresnahan)运动功能评分,应用免疫组织化学技术检测脊髓组织AQP-4的表达,并用图像分析仪进行定量分析。结果:术后3~28天,OECs移植联合督脉电针组的BBB评分较OECs移植组明显提高,术后第1天,联合组和OECs移植组受损脊髓灰质、白质中AQP-4的表达明显增加;第3天时均达到高峰,但联合组低于O E C s移植组(P<0.05)。第7、14、21、28天,与O E C s移植组比较,联合组A Q P-4表达也较低(P<0.01)。结论:O E C s移植联合督脉电针使脊髓损伤后A Q P-4表达减少,这可能更有利于抑制脊髓水肿、消除脊髓继发性损伤,保存了残存正常脊髓组织并促进神经轴突再生,改善其肢体运动功能。

  • 嗅鞘细胞脑内移植治疗肌萎缩侧索硬化症病人的护理

    作者:刘慧军;陈琳

    肌萎缩侧索硬化症(amyotrophic lateral sclerosis,ALS)是一种运动神经元的变性疾病,临床症状和体征由脊髓前角细胞,脑干和额叶皮质运动神经元的进行性变性所致.立体定向微创颅内穿刺嗅鞘细胞脑内移植是治疗ALS的新方法.通过对88例病人行嗅鞘细胞脑内移植的护理分析,术前对病人进行心理评估,加强术前、术后及心理护理,消除病人过度期盼、紧张的心理,增强自信心,使病人能很好的配合治疗,术后加强病情观察,并发症护理及康复指导.

  • 截瘫病人嗅鞘细胞移植术后心理护理

    作者:孙艳杰;卢旺盛;王亚明;王锐;赵凤波

    随着交通事业的发展,交通事故增多,外伤性截瘫发病率增加,病人往往难以接受由正常人到截瘫病人的现实,常伴有严重的心理障碍[1].我科自2000年以来收治250例脊髓外伤后截瘫接受嗅鞘细胞移植治疗者,通过针对性的心理护理,使病人从悲观、失望、焦虑急躁等情绪中解脱出来,增强了生活信心.现将心理护理报告如下.

  • 嗅黏膜嗅鞘细胞与肌基膜管联合移植修复脊髓损伤的实验研究

    作者:贾彬;李杰;于金兰;赵尊进;贺西京

    嗅黏膜内的神经元可在出生后形成并在整个成年时期保持分化,嗅神经元的轴突之所以能从嗅黏膜长入嗅球,据认为有赖于一种特殊分化的胶质细胞--嗅鞘细胞(OECs)的帮助.

  • 嗅黏膜嗅鞘细胞与肌基膜管联合移植修复脊髓损伤的实验研究

    作者:贾彬;李杰;于金兰;赵尊进;贺西京

    嗅黏膜内的神经元可在出生后形成并在整个成年时期保持分化,嗅神经元的轴突之所以能从嗅黏膜长入嗅球,据认为有赖于一种特殊分化的胶质细胞--嗅鞘细胞(OECs)的帮助.

  • 嗅鞘细胞的培养纯化及形态学特征

    作者:杨浩;游思维;王春婷;鞠躬

    目的建立体外培养纯化嗅鞘细胞(Olfactory ensheathing cells, OECs)的模型,观察OECs生长状态和形态学变化,为研究神经再生获得丰富OECs来源奠定基础.方法以原代培养的方法分离、培养成年大鼠嗅球OECs,再用阿糖胞苷抑制,P75抗体吸附方法纯化及Forskolin和牛垂体提取液(bovine pituitary extract, BPE)营养物质综合作用.根据P75免疫组化学染色结果统计所得OECs的纯度,同时对不同培养时期的OECs的形态进行观察.结果 (1)此纯化方法所得的OECs纯度可达95%以上,细胞增殖速度较快,且细胞纯度不因培养时间的延长而明显下降.(2)未纯化前细胞形态多变,主要为巨噬细胞状、双极和多极状;纯化后2~4天,OECs多呈双极或多极状;突起短小;4天后,OECs以突起细长的双极和三极为主,细胞走向一致,呈平行排列.结论 P75抗体吸附方法纯化效率高,Forskolin和BPE能够促进细胞的增殖,并影响细胞的形态及排布.

  • 人胚嗅球嗅鞘细胞原代培养的实验研究

    作者:任玉水;闫军浩;王洪美;陈琳;黄红云;周长满;姜晓荣;田国忠

    目的 拟建立人胚胎嗅球嗅鞘细胞的培养方法并探讨这些细胞在活性、纯度方面是否具备临床应用水平.方法 用含有促进细胞生长的谷氨酰胺、转铁蛋白、生物素、硒酸纳的无血清纯化液纯化嗅鞘细胞,胰蛋白酶消化收集细胞,制成单细胞悬液.采用台盼蓝染色法进行活性测定,PTSNGFR和S-100双标免疫荧光染色鉴定,以Hoechst复染鉴定OECs的纯度.结果 可见比较典型的嗅鞘细胞:双极或梭形、多突起形和扁圆形,主要以梭形和多突起形细胞为主.细胞活性大于95%,纯度大于90%.结论 实验建立的人胚胎嗅球嗅鞘细胞原代培养的方法可行,细胞活性大于95%,纯度和均一性已达到临床应用水平.

  • 一种新颖的神经胶质细胞-嗅鞘细胞

    作者:钱雷敏;张志坚;姜平

    嗅鞘细胞(OECs)移植治疗脊髓损伤(SCI)已显示出良好的应用前景,不同来源的OECs体外培养时,在不同发育阶段和不同生长环境中具有不同的生物学特性.OECs具有特异性的标志蛋白,如S-100、p75NTR、GFAP等.体外培养的OECs分泌NGF、BDNF、NT-3/4、GDNF等多种促进神经细胞生长、分化和神经纤维再生的神经营养因子.将OECs植入脊髓损伤部位,该细胞能分裂增殖,并可抑制胶质瘢痕的形成,拮抗Nogo等神经再生抑制性因子的活性,包绕再生轴突形成髓鞘.由于OECs具有上述独特的生物学功能,被认为是继神经干细胞和雪旺氏细胞之后可用于移植治疗脊髓损伤的一种新颖的神经胶质细胞.

  • 不同来源嗅鞘细胞移植治疗脑出血的比较

    作者:吴卫江;陆华;葛风;徐杰;朱爱华

    背景:嗅鞘细胞是目前已知用于移植细胞中惟一可以跨越周围神经系统与中枢神经系统边界的细胞.在众多的国内外文献中,大多以嗅球来源嗅鞘细胞作为观察对象;但采用嗅黏膜嗅鞘细胞移植具有来源方便、损伤小、可自体取材等优势.目的:比较嗅球来源嗅鞘细胞和嗅黏膜嗅鞘细胞移植对脑出血后神经功能损伤恢复作用的差异.设计、时间及地点:免疫组织化学水平的随机对照动物实验,于2005-10/2007-10在无锡市第三人民医院细胞实验室完成.材料:选用健康雄性SD大鼠30只,按随机数字表法分为3组,对照组、嗅球来源嗅鞘细胞移植组及嗅黏膜嗅鞘细胞移植组各10只.方法:分别获取人鼻中隔黏膜、人胚嗅球,进行嗅鞘细胞的分离培养纯化,取培养10 d的细胞用作细胞移植.取SD大鼠制备尾状核出血模型.嗅球来源嗅鞘细胞移植组及嗅黏膜嗅鞘细胞移植组各取10 μL细胞悬液在立体定向下引导微量注射器向大鼠脑组织内匀速注射(1 μL/min),对照组注入等量培养基,注射点为右侧尾状核.主要观察指标:观察两种来源嗅鞘细胞的体外培养情况.嗅鞘细胞移植后对动物行定期行为学评定,功能损伤越重,得分越高;并观察组织切片靶区域免疫细胞化学分析结果.结果:从体外培养结果看,无论在形态上还是表型上,两者无明显区别.嗅球来源嗅鞘细胞移植组及嗅黏膜嗅鞘细胞移植组大鼠的Longa 5分制法及前肢放置试验评分在移植后第14,28,56天显著低于对照组(P<0.05),两移植组差异无显著性意义(P>0.05),移植组各时间段差异无显著性意义(P>0.05).结论:用于移植修复神经功能的两种嗅鞘细胞在细胞特性、移植效果方面均无明显差异.

  • 嗅鞘细胞移植脊髓损伤大鼠Sema3A及其受体NP-1基因的表达

    作者:朱振东;张林;周雪

    背景:嗅鞘细胞移植促进脊髓损伤修复机制中对神经生长抑制导向因子的研究较少.目的:观察嗅鞘细胞移植对脊髓半横断损伤后神经生长抑制导向因子Sema3A及其受体NP-1在RNA水平表达的变化.方法:17只SD大鼠随机分为嗅鞘细胞移植组、DMEM/F12 培养液移植组和正常对照组.制作T11~T12水平大鼠脊髓左侧半横断损伤模型,立刻分别注射嗅鞘细胞悬液或等量的DMEM/F12 培养液.结果与结论:6周后取横断水平前后两个脊髓节段,用RT-PCR的方法对Sema3A、NP-1的mRNA进行半定量分析.①嗅鞘细胞在大鼠脊髓内仍有大量存活.②Sema3A及NP-1 mRNA的量,DMEM/F12 培养液移植组明显多于正常对照组(P<0.05),嗅鞘细胞移植组与培养液移植组比较明显下调,且与正常对照组比较差异无显著性意义(P > 0.05).③提示嗅鞘细胞移植有效减少了神经生长抑制导向因子Sema3A及其受体NP-1 mRNA的表达.

  • 嗅黏膜嗅鞘细胞与肌基膜管联合移植修复脊髓损伤

    作者:贾彬;李杰;贺西京;于金兰;赵尊进

    目的:观察嗅黏膜来源的嗅鞘细胞与肌基膜管联合移植后对脊髓损伤的修复效果.方法:1只SD大鼠行背正中切口,顺椎旁肌纤维切除约1.5 cm×0.8 cm×0.6 cm的肌条,复温、漂洗并挤压肌条以排出肌浆,制成肌基膜管.4只SD大鼠麻醉后取出嗅黏膜,胶原酶消化法分离培养嗅鞘细胞,调整浓度至1011L-1.取SD大鼠50只,随机分成5组:嗅鞘细胞+肌基膜管联合组、嗅鞘细胞组、肌基膜管组、模犁组、正常组,10只/组.除正常组外,其余组均建立脊髓损伤模型,于 T10横断脊髓并切除约2 mm,将培养7 d的嗅鞘细胞与肌基膜管按组别分别植入脊髓断端,模型组用浸有DMEM的凝胶海绵桥接横断的脊髓.结果:移植后第8周,嗅鞘细胞+肌基膜管联合组、嗅鞘细胞组大鼠运动功能明显恢复,出现大关节大幅度运动,且前者运动功能BBB评分升高尤为显著(P<0.01):肌基膜管组大鼠仅见小关节轻微活动;模型组大鼠后肢挛缩重,无明显功能恢复.嗅鞘细胞+肌基膜管联合组后肢体感诱发电位及运动诱发电位的潜伏期显著低于其他各组(P<0.01).苏木精一伊红染色和核转录因子免疫组化染色结果显示,嗅鞘细胞+肌基膜管联合组、嗅鞘细胞组的移植物与损伤脊髓整合较好,未见明显空洞,有大量染色呈阳性的纤维,纤维较长,由近侧端长入远侧端:肌基膜管组有空洞形成,染色阳性的纤维数量少,纤维细小且排列紊乱;模型组端断间充满瘢痕组织,未见明显染色阳性纤维.结论:嗅鞘细胞移植可促进脊髓损伤后的轴突再生,肌基膜管作为一种生物管道,两者联合应用可明显促进脊髓损伤后的轴突再生及功能恢复.

  • 肌电图评价肌萎缩侧索硬化389例嗅鞘细胞脑内移植的效果

    作者:陈琳;黄红云;江昭;王援朝;王庆苗;郗海涛;包建玲;王洪美

    背景:肌萎缩侧索硬化尚缺乏有效治疗手段,细胞学治疗是研究的重要方向之一.目前研究表明,嗅鞘细胞、骨髓摹质细胞、脐血间质干细胞等具有一定临床疗效.目的:观察嗅鞘细胞脑内移植治疗肌萎缩侧索硬化的肌电图改变,分析肌电图检查对肌萎缩侧索硬化疗效的评定价值.设计、时间及地点:病例自身对照观察,于2003 09/2007-12在北京市虹天济神经科学研究院及北京康复中心神经外科完成.对象:选择389例接受胚胎嗅鞘细胞脑内移植治疗的肌萎缩侧索硬化患者.方法:局麻下作双额发际内2.0~3.0 cm,旁升中线2.5~2.9 cm,长约0.5 cm小切门2个,两侧共缓慢注射细胞数2×104/μ L嗅鞘细胞悬液100 μ L.移植前及移植后三四周分别采用丹麦Keypoint-4犁肌电,诱发电位仪检查患者肌电图.主要观察指标:每例患者检查8~12块肌肉,包括四肢近、远端肌肉以及舌肌、胸锁乳突肌.移植前后肌电图主要对比自发电位、运动单位电位以及大力收缩时募集波型的改变.结果:①389例患者中332例(85.3%)肌电图检查显示不同程度改善,主要有3类:a.自发电位减少:122例出现不同程度此项政变.b.300例出现数量不等的肌肉募集波犁由低级向高级转变,电位密度明显增加,如单纯相转变为混合相:混合相转变为十扰相.c.移植前未能测到运动单位电位而术后新出现者51例.②51例(13.2%)肌电图无变化,移植前后肌电图大致相同.③6例(1.5%)比移植前筹,丰要变化为自发电位增多或肌肉大力收缩时募集波型减弱.结论:嗅鞘细胞移植近期能改善肌萎缩侧索硬化患者的神经功能,延缓病情的进行性恶化.肌电图检测用于胚胎嗅鞘细胞移植治疗肌萎缩侧索硬化疗效评定具有较好的应用价值,通过移植前后肌电图改变可以较客观反映治疗的有效性.

  • 痿症方联合嗅鞘细胞移植对脊髓慢性压迫损伤后神经营养素3表达的影响

    作者:马迎辉;胡志俊;周重建;王拥军;施杞

    背景:中药痉证方、痿证方具有促进神经营养因子分泌的作用已经诸多实验结果证实,而脊髓功能恢复与神经营养素3的表达与分泌有密切的关系.目的:实验拟观察痿症方联合嗅鞘细胞移植对脊髓慢性压迫损伤后神经营养素3的影响.设计、时间及地点:对照动物实验,细胞学观察,于2005一11/2007 03在上海中医药大学脊柱病研究所完成.材料:新生SD雄性大鼠10g采用酶消化法培养嗅鞘细胞.3月龄雄性SD大鼠以螺钉持续性压迫大鼠C4脊髓的方法建立脊髓慢性压迫动物模型.痿症方由上海中医药大学脊柱病研究所提供,成分为炙黄芪、党参、炒白术、当归.方法:造模1个月后分为:模型组,后路椎板减压,继续喂养2个月:DF12培养液组:注入等剂量DMEM/Ham's F-12培养基,继续喂养2个月.嗅鞘细胞组:嗅鞘细胞移植,按1μL/点在距离脊髓压迫区域上下0.5 mm处取4点注射109 L-1嗅鞘细胞,注入速度为1μ L/min,继续喂养2个月.含药血清培养嗅鞘细胞组:进行经症方含约血清培养的嗅鞘细胞移植,按1μL/点脊髓内注射109 L-1嗅鞘细胞,注入速度为1μL/min,继续喂养2个月.中药灌胃组:瘘症方[l]约连续灌胃1个月,继续喂养1个月.设寺正常对照组.主要观察指标:应用ELISA抗原竞争法、PT-PCR疗法榆测各组大鼠神经营养素3蛋白及mRNA的变化.结果:与模犁组、DF一12培养液组比较.痿疗方和嗅鞘细胞移植治疗后脊髓组织中神终营养素3蛋f1及神经营养索3 mRNA表达均明显增加.痿症方含药血清培养的嗅鞘细胞移植与单纯嗅鞘细胞移植相比,脊髓组织中神经营养索3蛋F1及神经营养素3 mRNA表达增加明辊.与单纯瘘症方相比,痿症方含药血清培养的嗅鞘细胞移植脊髓组织中神经营养素3增加不明显,差异不显著,神经营养素3 mRNA表达差异显著(P<0.01).结论:痿症方和嗅鞘细胞移植均可促进脊髓组织中神经营养素3的表达,但痿症方含药血清培养的嗅鞘细胞与单纯痿症方治疗相比.结果未能在体现出差异.

  • 接受嗅鞘细胞移植脊髓损伤大鼠电生理及后肢功能变化

    作者:王广志;刘明娜

    背景:研究证实嗅鞘细胞有利于神经元存活,并可促进轴突再生.目的:探讨嗅鞘细胞移植治疗大鼠脊髓损伤的效果.方法:健康成年雌性SD大鼠40只,随机分为盐水对照组、细胞移植组,20只/组.另取10只SD大鼠用于嗅鞘细胞的分离培养.盐水对照组、细胞移植组大鼠均建立脊髓损伤模型,取双侧第8~10对肋间神经各2 cm,交叉植入脊髓缺损处(近端白质与远端灰质、远端白质与近端灰质),细胞移植组局部注射嗅鞘细胞2×10~6个,盐水对照组局部注射等量无菌生理盐水.通过体感诱发电位和运动诱发电位的检测,观察神经电生理恢复情况;BBB后肢运动功能评分结果;通过BDA顺行神经示踪,观察运动传导束恢复情况. 结果与结论:细胞移植组大鼠体感诱发电位及运动诱发电位的潜伏期、波幅明显优于盐水对照组(P < 0.01);细胞移植组大鼠BBB后肢运动功能评分较生理盐水组明显提高(P < 0.01);细胞移植组脊髓损伤区有较多BDA标记阳性神经纤维通过,其数量明显多于盐水对照组(P < 0.01).证实局部注射嗅鞘细胞可以较好地恢复大鼠脊髓损伤后的神经电生理及后肢运动功能.

  • 嗅鞘细胞和神经干细胞联合移植阿尔茨海默病大鼠脑内的增殖和定向分化

    作者:盛宝英;李洋;姜尧佳;魏春杰;李莹;任秀敏

    背景:阿尔茨海默病大鼠脑内神经元减少,神经干细胞移植后增殖和向神经元分化能力有限.目的:观察联合移植嗅鞘细胞和神经干细胞在阿尔茨海默病大鼠脑内,嗅鞘细胞对神经干细胞的增殖和向胆碱能神经元分化的影响.方法:体外培养嗅鞘细胞和神经干细胞,移植前用5-溴脱氧尿嘧啶核苷标记神经干细胞.将生理盐水,神经干细胞和神经干细胞+嗅鞘细胞分别移植入阿尔茨海默病模型大鼠海马.移植7,14,21,28 d后,进行大鼠脑组织切片免疫组织化学染色检测BrdU和ChAT阳性表达.结果与结论:联合移植组神经干细胞的增殖和分化情况明显优于其他两组,联合移植组BrdU阳性细胞数和ChAT阳性细胞数明显高于神经干细胞移植组和生理盐水组(P < 0.01).提示嗅鞘细胞能促进移植的神经干细胞在阿尔茨海默病大鼠脑内增殖和向胆碱能神经元的分化.

  • 嗅鞘细胞在脑梗死大鼠中的迁移与神经功能恢复

    作者:杨志华;盛文利;王敏健

    背景:嗅鞘细胞移植可促进脑梗死大鼠的神经功能恢复,而移植后嗅鞘细胞在脑梗死大鼠中的迁移规律及迁移到不同脑区与该脑区的町耀性上调及神经功能恢复之间的关系如何尚不清楚.目的:观察嗅鞘细胞移植在皮质脑梗死大鼠中的治疗价值及迁移规律.设计、时间及地点:随机对照观察细胞移植实验,于2002-06/2004-01在中山大学第一附属医院神经内科实验室及中山大学动物实验中心完成.材料:2.5月龄SD大鼠用于嗅鞘细胞的分离培养.60~90d龄SD大鼠150只,按双肾双夹方法复制易卒中型肾血管性高血压大鼠模型.方法:利用筹速贴擘方法纯化大鼠嗅鞘细胞,移植前以Hoechst 33342标记.将符合要求的易卒中型肾血管性高血压大鼠70只制作大脑中动脉梗死模型,随机选取造模后大鼠根据移植部位分组进行嗅鞘细胞移植:皮质梗死灶周围移植、梗死灶对侧皮质移植、两侧同时移植.主要观察指标:移植后第2,6周进行行为、触觉功能检奁观察运动、感觉功能恢复情况荧光显微镜F观察移植细胞体内存活与分布情况.结果:两侧同时移植嗅鞘细胞大鼠运动、感觉功能恢复情况明显好于皮质梗死灶周围移植、梗死灶埘侧皮质移植(P<0.01),梗死边缘区神经纤维数目、生长相关蛋白43阳性信号值明显多于皮质梗死灶周围移植、梗死灶对侧皮质移植.皮质梗死灶周围移植细胞沿肼胝体分别向梗死灶和梗死对侧皮质区迁徙,梗死灶对侧皮质移精细胞沿胼胝体分别向中线及梗死灶所在的对侧皮质区迁徙,两侧同时移植的细胞沿胼胝体迁徙.且双侧的皮质均可见移植细胞,梗死灶侧明显多于对侧皮质.结论:植入体内的嗅鞘细胞能长期存活,同时可以看到这些细胞并非局限于注射点,可沿胼胝体分别向梗死灶和梗死对侧的皮层区迁徙,并迁移至对侧,促进脑梗死大鼠神经功能恢复的作用,双侧移植效果更加明显.

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