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p38 MAPK与心肌缺血/再灌注损伤的研究进展
p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)是丝裂原活化蛋白激酶家族中的重要成员,可以激活一系列发挥重要作用的细胞反应,如炎症反应及细胞的增殖、分化、 凋亡和侵袭.心肌缺血/再灌注损伤(MIRI)是体外循环术后心肌损伤的重要原因,其发生不仅与氧化应激、细胞凋亡等因素有关,而且与心肌胰岛素抵抗(MIR)有关.p38MAPK不仅与心肌的氧化应激、细胞凋亡有密切的关系,在MIR中也通过影响葡萄糖转运蛋白4的表达和转位而发挥重要作用.目前,针对MIRI的发病机制采取的治疗措施均不能发挥较好的保护作用.故对p38 MAPK在MIRI中的作用进一步研究,可能为p38MAPK作为预防和治疗MIRI理想的靶点提供更合理的依据.
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p38MAPK信号转导通路在人工关节置换术后假体周围骨溶解中的作用研究
人工关节置换术后无菌性松动的重要原因之一是磨损颗粒诱导的假体周围骨溶解.目前,国内外关于p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)信号转导通路在磨损颗粒诱导的假体周围骨溶解中作用机制的研究颇多.这些研究表明,p38MAPK信号转导通路在破骨细胞的分化及增殖过程中直接或者间接地发挥了重要的调节作用,通过促进破骨细胞的活化和增殖进而使骨代谢平衡被打破,终导致骨吸收作用增强,人工关节假体周围骨组织丢失,引起假体周围骨溶解和无菌性松动的发生.
关键词： p38丝裂原活化蛋白激酶 人工关节置换术 骨溶解 破骨细胞 骨代谢 -
p38丝裂原活化蛋白激酶信号通路在丙泊酚器官保护中的作用
丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)在对细胞外刺激因素进行应答时发挥着重要作用,介导多种细胞行为的变化.其中,p38信号通路是MAPK家族中关键通路之一,其介导细胞生长、发育、分化及死亡的全过程.丙泊酚除具有麻醉作用外,还可作用于一些MAPK,包括细胞外信号调节激酶、c-Jun氨基末端激酶和p38MAPK,从而发挥抗肿瘤、抗炎、抗氧化和抗凋亡等积极作用.该文通过总结p38MAPK信号通路在丙泊酚对器官保护中所发挥的作用,为丙泊酚的临床器官保护作用机制提供一种新的研究思路.
关键词： 丙泊酚 p38丝裂原活化蛋白激酶 器官保护 -
p38丝裂原活化蛋白激酶与高血压血管重构
高血压时,血管平滑肌细胞的增殖、细胞外基质的改变、内皮细胞损伤等因素均可引起血管的重构.p38丝裂原活化蛋白激酶主要介导细胞的发生、分化、增殖、凋亡等多种病理生理过程.本文简要介绍了p38丝裂原活化蛋白激酶信号转导通路与高血压血管重构的关系.
关键词： 高血压 p38丝裂原活化蛋白激酶 血管重构 -
缺血后处理对大鼠肾缺血／再灌注损伤及p38 MAPK活性的影响
目的：研究缺血后处理（ IPO）对大鼠肾缺血／再灌注损伤（ IRI）及 p38丝裂原活化蛋白激酶（p38MAPK）活性的影响。方法将24只SD大鼠依据随机数字表法分为3组，各8只。对照（S）组：仅结扎右侧肾蒂，左肾蒂游离；缺血／再灌注（ IR）组：结扎右侧肾蒂，夹闭左侧肾蒂60 min 后，开放灌注24 h；IPO组：肾脏缺血60 min后，进行10 s灌注、10 s阻断，共6个循环的IPO，然后开放灌注24 h，余同IR组。检测血尿素氮（ BUN）、肌酐，酶联免疫吸附试验法检测肾组织肿瘤坏死因子α（ TNF－α）、白细胞介素1（ IL－1）水平，Western blot法检测肾组织磷酸化p38MAPK蛋白表达，观察肾组织的病理学变化。结果与S组比较，IR组和IPO组血BUN、肌酐，肾TNF－α、IL－1、p38MAPK蛋白表达量及组织病理评分显著增加（ P＜0.05）；IPO 组各指标较 IR组显著下降（ P＜0.05）。结论 IPO能减轻肾IRI，其机制与抑制p38MAPK活化，进而抑制炎性因子释放有关。
关键词： 缺血/再灌注损伤 肾脏 缺血后处理 p38丝裂原活化蛋白激酶 -
p38丝裂原活化蛋白激酶在糖尿病肾脏疾病中的研究进展
p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)是MAPK信号通路中重要的信号转导分子,是细胞信号传递的交汇点或共同通路,可被磷酸化为p-p38MAPK而激活,参与细胞增殖、生长、分化及凋亡等多种细胞行为的调控.近的研究显示,p38MAPK信号转导通路可能通过调节转化生长因子p1的转录与合成,调节炎性因子的表达,活化环腺苷酸反应原件结合蛋白等转录因子,加重肾脏的炎症和纤维化进程,从而加速糖尿病肾病进程.
关键词： 糖尿病肾病 p38丝裂原活化蛋白激酶 炎性因子 -
p38 MAPK及其在糖尿病肾病中的作用研究进展
糖尿病肾病( DN)是糖尿病的主要并发症之一，也是引起终末期肾病和糖尿病患者死亡的常见原因。多种机制参与DN的发生、发展，如糖、脂代谢紊乱、血流动力学异常、细胞因子、氧化应激等。 p38丝裂原活化蛋白激酶( MAPK)是MAPKs超家族的重要成员，是细胞信号通路的交汇点，在调节细胞代谢、分化、增殖、凋亡等方面具有重要作用。该通路在DN时被激活，通过影响细胞外基质形成、促进细胞凋亡、影响细胞因子的产生等促进DN的发生和发展。因此，明确p38 MAPK在DN中的作用具有重要的临床意义。
关键词： 糖尿病肾病 p38丝裂原活化蛋白激酶 信号通路 凋亡 -
化橘红有效成分柚皮苷对高糖诱导CMECs凋亡的抑制作用
目的 观察化橘红有效成分柚皮苷(Naringin)对高糖诱导心肌微血管内皮细胞(CMECs)凋亡的影响,探讨Naringin对CMECs损伤的保护作用及可能的机制.方法 CMECs系分为正常糖组、高糖组、高糖+Naringin (50、100、200 μmol/L)处理组.Western印迹法检测CMECs p38丝裂原激活蛋白激酶(MAPK)(p38)、凋亡相关蛋白Caspase9的表达及其活性;荧光探针JC-1观察线粒体膜电位.结果 ①高糖刺激CMECs p38 MAPK信号通路的激活,p38蛋白表达明显上调,正常糖对照组仅有少量p38蛋白表达;高糖+Naringin(50、100、200μg/ml)组p38蛋白表达量较高糖组明显下降(P＜0.05).②高糖培养诱导CMECs48h后可见Caspase9的表达及其活性明显增加,与正常糖组比较差异有统计学意义(P＜0.05),相应CMECs线粒体膜电位降低;naringin(50、100、200 μmol/L)预处理CMECs,明显抑制高糖诱导的CMECs Caspase 9表达及其活性,差异均有统计学意义(P＜0.05),抑制率分别是50％、64％、68％和54％、65％、68％;CMECs线粒体膜电位也不同程度降低.结论 化橘红有效成分Naringin(50、100、200 μmol/L)能够减少高糖诱导的CMECs凋亡,可能与其抑制p38 MAPK活化相关,并呈一定浓度依赖性.
关键词： 心肌微血管内皮细胞 凋亡 p38丝裂原活化蛋白激酶 柚皮苷 高糖 -
铁过载催化的氧化应激对骨髓间充质干细胞的影响及其作用机制
目的 探讨铁过载催化的活性氧(ROS)生成对骨髓间充质干细胞(MSCs)增殖和凋亡的影响及其可能的作用机制.方法 体外培养MSCs,加入不同浓度(100、200、400 μmol/L)的枸橼酸铁铵(FAC),培养12、24、48 h,建立铁过载模型,测定铁过载前后细胞内的不稳定铁池(LIP)和ROS水平,并采用群体倍增时间(DT)检测MSCs的细胞增殖能力,采用Annexin V-PI双标法检测细胞凋亡率,进行蛋白质印迹实验检测磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶(P-p38 MAPK)、p38MAPK、蛋白激酶B(AKT)及p53蛋白的表达情况.结果 铁过载组MSCs的LIP水平明显高于对照组(平均荧光强度482.49±20.96比303.88±23.37,P＜0.05)；ROS的水平随FAC浓度增加而升高,在加入FAC浓度为400 μmol/L时高(P＜0.05).用400 μmol/L的FAC分别处理12、24、48 h的MSCs DT分别为(1.47±0.11)、(1.80±0.13)、(2.04±0.14)d,均明显长于对照组的(1.20±0.05)d(P均＜0.05).铁过载组MSCs的凋亡率也明显高于对照组[(3.51±1.17)％比(0.66-±0.62)％,P＜0.05].与对照组比较,铁过载组P-p38MAPK、p38MAPK、p53蛋白的表达增加,而AKT的表达无明显差异.结论 铁过载可通过提高骨髓MSCs的ROS水平来抑制其增殖、诱导其凋亡,此过程可能与p38MAPK-p53信号通路的激活有关.
关键词： 铁过载 间充质干细胞 活性氧 p38丝裂原活化蛋白激酶 P53 -
糖尿病大鼠肾小管Bcl-2蛋白家族的动态变化
目的 动态观察糖尿病(DM)病程中肾小管p38MAPK 和Bcl-2 蛋白家族表达的变化及相互关系.方法 SD 大鼠随机分为对照组和糖尿病组,注射链脲佐菌素(STZ)诱导糖尿病,分别于DM2、4、8、16 和24 周处死动物.生化方法测血糖和尿蛋白;免疫组织化学检测Bcl-2 和Bax 蛋白;Western blot 检测p38MAPK 和p-p38MAPK 蛋白水平.结果与对照组相比,DM 大鼠出现明显高血糖并且持续于高水平;DM2 周24h 尿蛋白量开始增多并随病情进展而加重.免疫组织化学结果显示,DM2 周大鼠肾小管Bcl-2 和Bax 蛋白均明显高于对照组,然而DM8 周 Bcl-2 蛋白表达开始减少,Bax 蛋白则随DM 进展而增多,Bax/Bcl-2 比值增高.Western Blot 结果显示,对照组和DM2 周肾皮质有少量p38MAPK 蛋白表达,DM4 周开始p38MAPK 和p-p38MAPK 蛋白明显增加.p-p38MAPK 水平与Bax/Bcl-2 比值呈显著正相关.结论糖尿病病程中,p38MAPK 蛋白活性增高可能介导了肾小管Bax/Bcl-2 比值上调.
关键词： 糖尿病 肾小管 p38丝裂原活化蛋白激酶 Bcl-2 家族 -
骨癌痛大鼠脊髓趋化因子受体2与P38丝裂原活化蛋白激酶信号通路的关系
目的 探讨骨癌痛大鼠脊髓趋化因子受体2(CCR2)与P38丝裂原活化蛋白激酶(P38MAPK)信号通路的关系,进一步明确骨癌痛的发生机制.方法 健康雌性SD大鼠共92只,其中60只利用纤毛机械刺激针方法用于行为学试验,采用随机数字表法分为以下6组(n=10):假手术组(S组)、骨癌痛组(B组)、假手术+二甲亚砜(DMSO)溶剂组(SD组)、骨癌痛+DMSO组(BD组)、假手术+RS102895 CCR2抑制剂组(SR组)、骨癌痛+RS102895 CCR2抑制剂组(BR组).另外32只SD大鼠采用随机数字表法分为以下8组(n=4):假手术组(S组)、骨癌痛5 d组(B5组)、骨癌痛9 d组(B9组)、骨癌痛14 d组(B14组)、骨癌痛+DMSO溶剂组(BD组)、骨癌痛+RS102895 CCR2抑制剂后0.5 h组(BR0.5 h组)、骨癌痛+RS102895 CCR2抑制剂后4 h组(BR4h组)、骨癌痛+RS102895 CCR2抑制剂后12 h组(BR12 h组),通过蛋白质印迹法(Western Blot)检测大鼠脊髓P38蛋白、磷酸化的P38(p-P38)和CCR2的表达水平.结果 S组造模后5、7、9、14、21 d的机械缩足反应阈值分别为(30.9±1.5)、(31.9±1.2)、(32.0±1.1)、(31.6±1.5)、(32.2±1.4)g,B组分别为(26.4±0.7)、(24.4±0.8)、(21.4±0.8)、(13.5±0.4)、(9.9±0.2)g,与S组比较,B组造模后5、7、9、14、21 d时机械痛阈值降低,差异均有统计学意义(t=-13.177、-16.660、-23.778、-35.574、-48.401,均P<0.01).造模后第9天,SD组、BD组、SR组和BR组给药后4 h机械缩足反应阈值分别为(32.4±1.7)、(19.4±1.1)、(32.1±1.3)、(26.3±1.0)g,差异有统计学意义(F=224.681,P<0.01);与SD组比较,BD组机械痛阈值降低;与BD组比较,BR组机械痛阈值升高.S组、B5组、B9组、B14组大鼠脊髓p-P38表达水平分别为(0.08±0.03)、(0.20±0.05)、(0.40±0.17)、(0.65±0.14),CCR2表达水平分别为(0.08±0.04)、(0.18±0.05)、(0.30±0.09)、(0.58±0.07),差异均有统计学意义(F=19.123、40.746,均P<0.01);与S组比较,B9组大鼠脊髓p-P38和CCR2表达上调.造模后第9天,BD组、BR0.5 h组、BR4 h组和BR12 h组大鼠脊髓p-P38表达水平分别为(0.57±0.06)、(0.17±0.11)、(0.03±0.01)、(0.25±0.11),差异有统计学意义(F=29.582,P<0.01);与BD组比较,BR0.5 h组、BR4 h组、BR12 h组大鼠脊髓p-P38表达明显下调.结论 脊髓CCR2可能通过激活P38MAPK信号通路参与了大鼠骨癌痛痛觉过敏的发生.
关键词： 受体 趋化因子 p38丝裂原活化蛋白激酶 疼痛 -
P2Y12受体抑制剂对骨癌痛大鼠痛阈及脊髓p38丝裂原活化蛋白激酶表达的影响
目的 研究脊髓P2Y12受体在大鼠骨癌痛中的作用及其对p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)表达的影响.方法 雌性SD大鼠40只,用随机数字表法分为5组(n=8):正常组(N)、假手术组(S)、DMSO溶剂骨癌痛组(DA)、骨癌痛组(A)、骨癌痛镇痛组(MA).大鼠左胫骨上段注入经腹水培养的Walker256癌细胞建立骨癌痛模型.建模后第9～12天分别行鞘内注药,S组、A组注射0.9％生理盐水,DA组注射5％二甲基亚砜(DMSO)溶剂,MA组注射MRS2395(400 pmol/μl,溶于5％ DMSO溶液),容量各15μl.注药前后测试大鼠左后足机械痛阈值,术后第12天测完痛阈后取L4～6脊髓,采用免疫组化及免疫荧光法测定脊髓背角磷酸化p38MAPK(p-p38MAPK)表达水平.结果 建模后第9天,与N组(36.1 ±4.0)g、S组(38.9±5.2)g比较,MA组机械性痛阈值下降为(19.8±5.0) g(P＜0.01),第12天p-p38MAPK表达增加(P＜0.01).与DA组(17.7±3.0)g、A组(19.1 ±2.5)g比较,MA组鞘内给药后大鼠机械痛阈值增高,峰值为(26.5±4.7)g(P＜0.05);与DA组(细胞数:43.4±3.8、IOD值:569 ±27)、A组(细胞数:45.0±2.6、IOD值:594±22)比较,MA组(细胞数:20.9±2.2、IOD值:246±25)第12天脊髓p-p38MAPK表达减少(P＜0.01)；但与N组、S组比较,MA组机械痛阈值仍低于正常(P＜0.01),脊髓p-p38MAPK蛋白表达高于N组(细胞数:9.9±2.4、IOD值:82±28)、S组(细胞数:10.9±2.2、IOD值:109 ±25)(P＜0.01).免疫荧光双标显示脊髓背角p-p38 MAPK与小胶质细胞共表达.结论 鞘内注射P2Y12受体抑制剂MRS2395可能通过抑制脊髓背角的p38MAPK磷酸化程度部分减轻大鼠骨癌疼痛.
关键词： 骨癌痛 P2Y12受体 p38丝裂原活化蛋白激酶 脊髓 -
光甘草定抑制p38MAPK/ERK信号通路减轻脂多糖致大鼠肺损伤的实验观察
目的 探讨中药光甘草定(Glabridin,GLA)对脂多糖(LPS)致急性呼吸窘迫综合征(ARDS)大鼠的保护作用及可能机制.方法 32只Wistar大鼠按随机数字表法分为对照组、模型组(LPS组)、光甘草定(GLA)组、乌司他丁(UTI)组,每组8只.采用腹腔注射LPS(10 mg/kg)的方法制备大鼠ARDS模型,对照组注射同等剂量的生理盐水,GLA组将光甘草定灌胃(30 mg/kg),UTI组腹腔注射乌司他丁(20000U/kg),12 h后各组大鼠留肺组织及血浆标本.计算肺组织湿/干质量(Wet/Dry,W/D)比值;光镜下观察肺组织病理改变;用酶联免疫吸附法(ELISA)法检测各组血浆中肿瘤坏死因子-α (TNF-α)、白细胞介素-18(IL-18)含量,检测各组肺匀浆中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和一氧化氮(N0)含量;免疫组织化学法检测p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)、细胞外信号调节蛋白激酶(ERK)蛋白表达情况;Western印迹法检测肺组织中磷酸化p38MAPK(p-p38MAPK)及磷酸化ERK(pERK)蛋白表达的变化.结果 光镜下观察对照组肺组织结构完整,肺泡腔清晰;LPS组肺泡壁增厚,渗出明显,肺组织出现损伤性变化,GLA组及UTI组病理改变较LPS组明显减轻.与对照组比较,LPS组肺组织W/D比值,血浆TNF-α、IL-18含量,肺匀浆MDA、NO含量均明显升高(P＜0.05),而血浆SOD含量明显降低;与LPS组比较,GLA组肺组织W/D比值,血浆TNF-α、IL-18含量,肺匀浆MDA、NO含量均明显降低,而血浆SOD含量明显增高[(TNF-α(μg/L):51.7±10.3比105.7±30.5,IL-18(μg/L):37.9±13.9比49.2±14.5,MDA(nmol/mg蛋白(prot):2.87±0.62比3.81±0.42,NO(μmol/L):18.96±0.79比28.58±2.51,SOD (U/mgprot):115.5±15.2比75.9±14.0)];免疫组化结果显示:与对照组比较,LPS组p-p38MAPK、pERK蛋白在胞核表达均明显增加,而GLA组与UTI组较LPS组表达明显减少;Western印迹检测结果显示:与对照组比较,LPS组肺组织p-p38MAPK蛋白表达明显增高,而GLA及UTI干预组蛋白表达明显受抑制.结论 传统中药光甘草定通过抑制p38MAPK/ERK信号通路、抗氧化作用而减轻炎症,发挥对LPS致大鼠ARDS的保护作用.
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补阳还五汤预先干预对大鼠脑死亡后心肺炎症细胞因子表达的抑制作用
目的 观察补阳还五汤预先干预大鼠抑制其脑死亡后心、肺炎症细胞因子表达.方法 雄性Wistar大鼠30只,体质量180～200 g,随机分3组.对照组:正常大鼠麻醉后取心和肺;脑死亡模型组:诱导大鼠脑死亡;补阳还五汤组:脑死亡诱导前7 d,连续每天1次给大鼠ig补阳还五汤水煎剂(1.8 mL/100 g,12.6 g/kg).大鼠脑死亡诱导成功,机械呼吸6 h,若平均动脉压大于80 mmHg,则取其心和肺.RT-PCR检测心、肺组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-1β(IL-1β)mRNA表达,Western blotting检测心、肺组织TNF-α和IL-1β蛋白及磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶(p-p38MAPK)蛋白表达.结果 模型组心肺TNF-α、IL-1α mRNA和蛋白表达及p-p38MAPK蛋白表达比对照组显著增加(P<0.01).补阳还五汤组各指标比模型组显著降低(P<0.05),但仍比对照组显著增加(P<0.01).结论 补阳还五汤预先干预大鼠能显著抑制其脑死亡后心肺炎症细胞因子表达,可能与其在不同层面阻断p38MAPK信号通路关键靶点有关.
关键词： 补阳还五汤 脑死亡 炎症细胞因子 p38丝裂原活化蛋白激酶 -
天山雪莲愈伤组织提取物对人成骨肉瘤细胞MG-63增殖及分化的影响
目的 研究天山雪莲愈伤组织提取物(extract from callus of Saussurea involucrate,ESI)对人成骨肉瘤细胞MG-63增殖及分化的影响,探讨ESI抗骨质疏松的作用及机制.方法 以MG-63为研究对象,采用MTT法和乳酸脱氢酶(LDH)法检测ESI对成骨细胞增殖的影响,相关试剂盒检测碱性磷酸酶(ALP)活性和羟脯氨酸(Hyp)水平,茜素红染色法观察对矿化骨结节形成的影响;实时荧光定量PCR (RT-PCR)检测骨保护素(OPG)和核因子-κB活化因子受体配体(RANKL)基因表达水平;Western blotting法检测OPG/RANKL蛋白水平;检测p38特异性抑制剂SB203580对ESI作用于成骨细胞增殖、分化、矿化以及OPG/RANKL表达的影响.结果 ESI低于125 μg/mL对成骨细胞无细胞毒性,31.25、62.5 μg/mL对成骨细胞生长有促进作用;ESI显著提高ALP活性、Hyp水平以及矿化骨结节形成;显著上调MG-63细胞OPG mRNA水平,下调RANKL mRNA水平,上调OPG/RANKL蛋白水平;SB203580显著抑制ESI对成骨细胞增殖、ALP活性、矿化结节形成的促进作用以及对胶原蛋白积累量和OPG/RANKL值的提高作用.结论 ESI能够促进成骨细胞增殖、分化和矿化,其机制可能与调节OPG和RANKL基因表达有关,并且可能通过p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)通路进行信号转导.
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人参皂苷Rb1改善术后疲劳综合征大鼠中枢炎症反应的机制研究
目的 研究术后疲劳综合征(POFS)大鼠海马内炎症因子及经典炎症通路变化,探讨POFS的中枢发生机制,并考察人参皂苷Rb1对中枢疲劳的干预作用.方法 将96只SD大鼠随机分为对照组、POFS模型组(POFS组)和人参皂苷Rb1干预组(人参皂苷Rb1组),每组再按时间点分为术后1、3、5、7d4个亚组.术后对应时间点进行旷场实验,实时荧光定量PCR检测大鼠海马炎症因子的mRNA表达;Western blotting检测磷酸化p38 (p-p38)、核因子κB/p65 (NF-κB/p65)蛋白表达;免疫组化法检测海马内p-p38蛋白表达;免疫荧光法检测海马内NF-rB/p65蛋白核内外分布.结果 术后1、3d,与对照组比较,POFS组大鼠运动距离减少(P＜0.01),休息时间增加(P＜0.05);中枢内炎症因子水平升高(P＜0.05);p-p38蛋白表达也增加(P＜0.05),(NF-κB/p65胞核)/(NF-κB/p65胞浆)增加(P＜0.05);人参皂苷Rb1组与POFS组比较,术后1、5d,大鼠休息时间明显缩短(P＜0.05);术后1、3d,大鼠运动距离增加(P＜0.01),炎症因子表达下降(P＜0.05),(NF-κB/p65胞核)/(NF-κB/p65胞浆)明显减少(P＜0.05);术后3、5、7 d p-p38蛋白表达也降低(P＜0.05).免疫组化、免疫荧光结果与Western blotting结果相同.结论 POFS大鼠海马内炎症因子表达升高,经典炎症通路激活,人参皂苷Rb1可通过抗炎作用来改善POFS大鼠的中枢疲劳.
关键词： 术后疲劳综合征 人参皂苷Rb1 p38丝裂原活化蛋白激酶 核转录因子κB 抗炎 -
p38丝裂原活化蛋白激酶通路在非对称性二甲基精氨酸诱导内皮细胞通透性增高中的作用
目的 探讨非对称性二甲基精氰酸(ADMA)对单层内皮细胞通透性的影响,以及氧化应激、p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)通路在此过程中的作用.方法 利用Transwell小室建立单层内皮细胞屏障结构,设立实验组和对照组,实验组经浓度25、50、100、200μmol/LADMA作用24 h和100μmol/LADMA分别刺激细胞4、8、16、24 h,或分别经烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)氧化酶抑制剂、p38 MAPK抑制剂预处理细胞后再加入ADMA刺激.随后用异硫氰酸荧光素(FITC)标记的右旋糖酐漏出法测定单层内皮细胞的通透系数Pa值,并用免疫荧光染色显示细胞骨架及细胞间连接的形态学改变.结果 ADMA呈剂量及时间依赖性的增加单层内皮细胞的通透性,同时促进内皮细胞中应力纤维的形成并破坏细胞间连接.NADPH氧化酶抑制剂和p38 MAPK抑制剂均可对抗ADMA的上述作用.结论 ADMA通过引起氧化应激,激活p38 MAPK通路,改变细胞骨架及细胞间连接的结构,使单层内皮细胞通透性增高.
关键词： 非对称性二甲基精氨酸 p38丝裂原活化蛋白激酶 氧化应激 细胞骨架 -
慢性间歇低氧对幼鼠脑区p38MAPK的影响
目的:研究慢性间歇低氧对幼鼠部分脑区p38MAPK的影响.方法:SPF级健康雄性SD幼鼠(3～4周龄)50只,随机分为5组(n=10):间歇低氧2周组(2IH组)、间歇低氧4周组(4IH组)、间歇低氧4周后恢复组(4F组)、对照2周组(2C组)和对照4周组(4C组).建立慢性间歇低氧幼鼠模型,以RT-PCR法和Western blot法分别测幼鼠海马及前额叶皮层p38MAPK mRNA和磷酸化p38MAPK(p-p38)蛋白的表达.结果:2IH、4IH和4F组幼鼠海马、前额叶皮层的p38MAPK mRNA及p-p38蛋白均明显高于相应对照组(P均＜0.05).结论:慢性间歇低氧可激活幼鼠部分脑区p38MAPK.
关键词： 慢性间歇低氧 p38丝裂原活化蛋白激酶 海马 前额叶皮层 -
p38丝裂原活化蛋白激酶抑制剂对脓毒症大鼠多器官损伤的保护作用研究
目的探讨脓毒症致多器官损伤的原因,以及p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)抑制剂的保护作用和机制.方法采用盲肠结扎穿刺术(CLP)制备脓毒症大鼠模型,治疗组采用术前给予p38MAPK抑制剂SB203580灌胃.在不同时间点观察大鼠血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-1β(IL1β)以及生化指标如丙氨酸转氨酶(ALT)、尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)、肌酸磷酸激酶-同工酶(CPK-MB)浓度的变化.结果 CLP术后大鼠血清TNF-α、IL-1β显著升高,ALT、BUN、Cr、CPK-MB也进行性升高;血清ALT、BUN、Cr、CPKMB变化与TNF-α、IL-1β呈显著正相关.应用SB203580后,血清TNF-α、IL-1浓度显著降低,同时ALT、BUN、Cr、CPKMB也降低.结论 TNF-α、IL-1β的大量释放是脓毒症致多器官损伤的原因之一,通过调控p38MAPK信号转导通路可对脓毒症所致多器官损伤起保护作用.
关键词： 脓毒症 p38丝裂原活化蛋白激酶 肿瘤坏死因子-α 白细胞介素1β -
p38丝裂原活化蛋白激酶/胞浆型磷脂酶A2途径介导炎症细胞模型中白细胞介素的生成
目的 探讨p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)对白细胞介素-1β (IL-1β)、IL-6的调节作用,进一步明确可能涉及的下游信号分子.方法 以脂多糖(LPS)诱导的HeLa细胞为炎症模型,分别利用p38 MAPK、胞浆型磷脂酶A2(cPLA2)及环氧化酶-2(COX-2)特异性抑制剂SB203580、AACOCF3和NS-398以及cPLA2反义寡核苷酸(SK7111),通过检测HeLa细胞中LPS诱导的磷酸化p38 MAPK、cPLA2及COX-2活性或表达的改变,观察其与上清液中IL-1β、IL-6含量变化的关系.结果 SB203580可以明显抑制p38 MAPK、cPLA2的活性以及IL-1β、IL-6的产生;AACOCF3也可下调cPLA2活性以及IL-1β和IL-6的生成,且呈剂量依赖关系;而在HeLa细胞中几乎检测不到cPLA2下游信号分子COX-2的表达,也未观察到NS-398对IL-1β、IL-6表达的作用.结论 在HeLa细胞中,p38 MAPK/cPLA2途径介导LPS诱导细胞因子IL1β和IL-6,而作为cPLA2下游酶之一的COX-2并没有参与此调节过程.
关键词： p38丝裂原活化蛋白激酶 磷脂酶A2 脂多糖 白细胞介素-1β 白细胞介素-6
