首页 > 文献资料
-
3,5-二硝基水杨醛缩甘氨酸铜(Ⅱ)配合物的合成、表征及其抗O-.2活性
在水杨醛苯环上引入吸电子基并与甘氨酸缩合,设计合成了3,5-二硝基水杨醛缩甘氨酸席夫碱及其铜(Ⅱ)配合物,对配合物进行了元素分析、摩尔电导、红外光谱、紫外光谱等系列表征,讨论了配合物中金属配体键合作用以及配合物的结构,并用黄嘌呤-黄嘌呤氧化酶-鲁米诺化学发光法测定了其歧化超氧阴离子的活性,与超氧化物歧化酶(SOD)作了对照,发现该配合物有较强的清除O-.2作用,显示较强的SOD样活性,在一定程度上具有模拟SOD酶的作用.
-
生物样品中4种邻苯二酚结构物质固相萃取技术的应用
目的：建立并优化SPE‐HPLC联用技术测定生物样品中4种邻苯二酚结构物质的含量。方法采用Oasis HLB和BCX固相萃取小柱对生物样品进行检测前处理。色谱柱为Agilent 5 HC‐C18（250 mm ×4．6 mm ，5μm）；以甲醇‐1 mL · L －1甲酸（3∶97）为流动相，等度洗脱；流速为0．6 mL · min－1；柱温为30℃；检测电压为0．9 mV ；检测电流为50 nA。结果在该实验条件下，左旋多巴（L‐Dopa）及其体内代谢产物多巴胺（DA ）、3，4‐二羟基苯丙酮酸和3，4‐二羟基苯基乳酸（DSS ）4种物质分离度良好。L‐Dopa和DA进样量在0．250～5.000μg · mL －1范围内线性关系良好，3，4‐二羟基苯丙酮酸和DSS进样量分别在0．025～7.500和0.025～5．400μg · mL －1范围内线性关系良好。L‐Dopa、DA、3，4‐二羟基苯丙酮酸和 DSS 的平均回收率分别为81.5％，90．8％，80．1％和83．7％。结论该方法操作简便、省时，能有效排除样本中复杂基质的干扰，为检测生物样品中邻苯二酚类物质提供了参考依据。
-
生物样品中4种邻苯二酚结构物质固相萃取技术的应用
目的：建立并优化SPE‐HPLC联用技术测定生物样品中4种邻苯二酚结构物质的含量。方法采用Oasis HLB和BCX固相萃取小柱对生物样品进行检测前处理。色谱柱为Agilent 5 HC‐C18（250 mm ×4．6 mm ，5μm）；以甲醇‐1 mL · L －1甲酸（3∶97）为流动相，等度洗脱；流速为0．6 mL · min－1；柱温为30℃；检测电压为0．9 mV ；检测电流为50 nA。结果在该实验条件下，左旋多巴（L‐Dopa）及其体内代谢产物多巴胺（DA ）、3，4‐二羟基苯丙酮酸和3，4‐二羟基苯基乳酸（DSS ）4种物质分离度良好。L‐Dopa和DA进样量在0．250～5.000μg · mL －1范围内线性关系良好，3，4‐二羟基苯丙酮酸和DSS进样量分别在0．025～7.500和0.025～5．400μg · mL －1范围内线性关系良好。L‐Dopa、DA、3，4‐二羟基苯丙酮酸和 DSS 的平均回收率分别为81.5％，90．8％，80．1％和83．7％。结论该方法操作简便、省时，能有效排除样本中复杂基质的干扰，为检测生物样品中邻苯二酚类物质提供了参考依据。
-
高效液相色谱衍生化法测定脑脉康中冰片含量
目的: 建立一种测定脑脉康中冰片含量的新方法. 方法: 柱前衍生化在乙腈中反应,以3, 5-二硝基苯甲酰氯为衍生化试剂(与冰片的摩尔比为20倍),4-二甲氨基吡啶为催化剂(与冰片的摩尔比为40倍). 然后在ODS柱上,以甲醇∶水(88∶12)为流动相,检测波长225 nm,高效液相色谱测定脑脉康中冰片含量. 结果: 冰片在1～10 nmol范围内,色谱峰面积与进样量呈线性关系(R2=0.9996, P<0.01). 两批脑脉康中冰片的含量分别为7.9%和7.1%, RSD分别为1.0%和1.5%(n=5). 平均回收率为99.9%,RSD为1.8%(n=4). 结论: 高效液相色谱衍生化法用于测定脑脉康中的冰片含量方法简便、准确、可行.
关键词： 冰片 高效液相色谱法 衍生化 3 5-二硝基苯甲酸冰片酯 -
帕金森病小鼠黑质calbindin-D28k mRNA的表达
目的 研究钙结合素D28k（CaBP）在帕金森病（PD）发病机制中的作用.方法 给C57BL小鼠ip 1-甲基-4-苯基-1，2，3，6-四氢吡啶 (MPTP)，30 mg*kg-1MPTP每24 h注射1次，连续应用3 d以建立PD鼠模型.用原位杂交法检测CaBP mRNA在PD鼠和对照鼠黑质神经元中的表达变化.结果 CaBP mRNA阳性神经元主要分布于黑质致密部（SNC）.在MPTP处理鼠的SNC神经元，CaBP mRNA的表达水平明显降低.模型鼠和对照鼠的SNC中CaBP mRNA阳性神经元的数量有差异(144±15) vs (88±10)，(P<0.05).与对照相比，MPTP处理组小鼠SNC中表达CaBP mRNA神经元的杂交信号强度也有降低.结论 CaBP可能通过对黑质多巴胺能神经元的保护作用来抵御PD的发生.
-
肌苷对帕金森病小鼠模型的神经保护作用
目的: 观察肌苷对MPTP致帕金森病(PD)小鼠模型的神经保护作用.方法: 用MPTP建立C57BL小鼠PD模型,在MPTP前给予肌苷,通过行为学检测(自主活动计数、Rotarod检测、游泳实验)、免疫组织化学和荧光分光光度法,观察肌苷对PD小鼠模型的行为学表现、黑质多巴胺(DA)神经元和纹状体酪氨酸羟化酶免疫反应阳性(TH-ir)神经纤维以及纹状体DA水平的影响.结果: 给予MPTP后,小鼠行为学计数降低,自主活动计数、Rotarod检测、游泳实验分别降低约45%、43%和22%,黑质DA神经元数目减少约58%,纹状体TH-ir神经纤维密度减低,纹状体DA水平明显降低约88%,提前给予肌苷后降低程度减轻,自主活动计数、Rotarod检测、游泳实验降低程度分别约为5%、11%和12%,黑质DA神经元数目减少约43%,纹状体DA水平降低约71%,两组相比有显著性差异(P＜0.01).结论: 肌苷对MPTP所致的C57BL小鼠的神经损伤具有保护作用.
-
3,6-(二甲氨基)-二苯并碘杂六环葡萄糖酸盐对大鼠缺血再灌注心肌的保护作用
目的观察3,6-(二甲氨基)-二苯并碘杂六环葡萄糖酸盐(IHC-93)对大鼠缺血再灌注的保护作用.方法选用健康SD大鼠,结扎和松解冠状动脉制备心肌缺血再灌注模型.结果 IHC-93 0.125、0.25、0.5mgkg-1能明显缩小缺血再灌注心肌梗死范围;可不同程度地减少心肌CK和CK-MB的释放;减少心肌ET-1的产生;IHC-93 0.25、0.5mg*kg-1明显降低心肌肿胀度.结论 IHC-93对大鼠心肌缺血再灌注损伤具有保护作用.
-
3,6-[二甲氨基]-二苯骈碘杂六环葡萄糖酸盐对豚鼠心肌电生理特性的影响
目的研究3,6-[二甲氨基]-二苯骈碘杂六环葡萄糖酸盐对豚鼠乳头肌动作电位的影响.方法采用玻璃微电极细胞内记录技术.结果 IHC-93低浓度(≤30 μmol/L)时对快反应动作电位的动作电位幅度(APA)、0相大除极速率(Vmax)无影响,但可缩短动作电位时程(APD);高浓度(90 μmol/L)时使快反应动作电位的APA、Vmax降低,APD进一步缩短.三相时程APD50-90(APD50-90=APD90-APD50)在用药前后变化不大.IHC-93对异丙肾上腺素诱发的豚鼠左心房早期后除极有明显抑制作用,可完全或部分消除哇巴因诱发的延迟后除极和触发激动.结论 IHC-93为一钙通道阻滞剂,具有IV类抗心律失常药物的特性.
-
HPLC测定阿胶益寿口服液中2,3,5,4'-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷的含量
目的:建立阿胶益寿口服液中2,3,5,4'-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷含量测定的HPLC方法.方法:用AE.Kromasil-C18柱(150mm×4.6mm,5μm),乙腈-水(15.8:84.2)为流动相,检测波长:320nm,柱温28℃,流速1.0ml· min-1.结果:在0.0956～0.382μg,进样量与峰面积线性关系良好,r=0.9996(n=5).平均回收率98.8％,RSD为1.5％.结论:本法准确度高,专属性好,简便快捷,可作为该成分含测定的方法.
-
PI对肿瘤细胞抑制作用的研究
目的 通过研究3,4,6,7,12,12b-六氢吡嗪[1',2':1,2]吡啶并[3,4-b]吲哚-1(2H)-酮(PI)的细胞毒抗肿瘤作用,探究PI是否可作为具可修饰性的新型抗肿瘤先导化合物.方法 采用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT法)研究PI和Fascaplysin (F)对人肝癌细胞(Bel-7402)、人宫颈癌细胞(Hela)、人乳腺癌细胞(T47D)和小鼠红白血病细胞(MEL)等肿瘤细胞的增殖抑制作用并进行对比,并选取Hela细胞观察PI处理Hela细胞后的形态学变化.结果 PI和F药理活性有相似性,在低质量浓度时,PI对HeLa细胞生长的抑制作用比F的抑制作用显著,同时PI对Hela细胞的抑制作用具有量效关系;PI处理HeLa细胞后的形态学变化具有典型细胞凋亡的形态学特征.结论 PI通过诱导肿瘤细胞凋亡产生细胞毒抗肿瘤作用.
-
HPLC测定安尔眠胶囊中2,3,5,4'-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷
目的 建立安尔眠胶囊中2,3,5,4'-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷(C20H2209)的含量测定方法.方法 采用高效液相色谱(HPLC)法,以Dionex Acclaim 120(@)C18色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm)为分离柱,以乙腈-1％甲酸溶液(23∶77)为流动相,体积流量1.0 mL/min,检测波长320 nm,柱温25℃.结果 2,3,5,4'-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷在0.010～0.200 μg呈现良好的线性关系(r=0.999 6),平均回收率为97.35％,RSD为2.07％.结论 该方法准确可靠,适用于安尔眠胶囊中2,3,5,4'-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷的含量测定.
-
HPLC法测定通乐颗粒中2,3,5,4'-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷
目的 建立测定通乐颗粒中2,3,5,4'-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷的方法.方法 采用HPLC法,色谱柱为Phenomenex C18柱,检测波长为320 nm,流动相为乙腈-水(20:80),体积流量为1.0 mL/min.结果 2,3,5,4'-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷在10～100 μg/mL与峰面积呈良好线性关系(r=0.999 7),平均回收率为99.74％.结论 本方法准确、简便、重复性好,可用于通乐颗粒中2,3,5,4'-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷的含量测定.
-
壳寡糖含量的测定方法比较
目的:寻找一种简便有效测定壳寡糖的方法.方法:采用Elson - Morgan法、苯酚-硫酸法和3,5-二硝基水杨酸(DNS)法测定壳寡糖含量并进行比较.结果:Elson - Morgan法不适用于壳寡糖含量的测定；苯酚-硫酸法中盐酸氨基葡萄糖在200～3000 μg范围与吸光度也有很好的线性关系,但苯酚-硫酸法对壳寡糖的测定值较实际值偏大；DNS法测定壳寡糖与实际值接近,平均回收率为96.1％,RSD为2.9％(n=6).结论:DNS法操作简单、快速,重现性好,可直接用于壳寡糖含量的测定.
-
HPLC波长切换法同时测定白芍饮片中9个成分的含量
目的:建立高效液相色谱波长切换法对白芍中9个成分(没食子酸、氧化芍药苷、儿茶素、芍药内酯苷、芍药苷、苯甲酸、1,2,3,4,6-五没食子酰葡萄糖、苯甲酰芍药苷、丹皮酚)进行分析.方法:采用Phenomsil ODS(250 mm ×4.6 mm,5μm)色谱柱,以乙腈(A)-0.1％磷酸水(B)为流动相,梯度洗脱,流速1.0 mL·min-1,检测波长为267 nm(0～ 12 min,测定没食子酸)、258 nm( 12 ～30 min,测定氧化芍药苷、儿茶素)、230 nm(30～38 min,测定芍药内酯苷、芍药苷)、223 nm(38 ～42 min,测定苯甲酸)、275 nm(42 ～ 56 min,测定1,2,3,4,6-五没食子酰葡萄糖)、230 nm(56～ 70 min,测定苯甲酰芍药苷、丹皮酚).结果:白芍中9个成分没食子酸、氧化芍药苷、儿茶素、芍药内酯苷、芍药苷、苯甲酸、1,2,3,4,6-五没食子酰葡萄糖、苯甲酰芍药苷、丹皮酚进样量分别在0.13 ～0.87 μg(r =0.9991),0.13 ～0.85 μg(r =0.9991),2.50×10-3 ～ 17.50×10-3 μg(r =0.9993),0.26～1.78 μg(r =0.9995),0.46～3.20 μg(r=0.9991),0.83 ×10-3 ～5.77 ×10-3 μg(r =0.9997),0.28～1.92 μg(r =0.9994),11.00 ×10-3 ～77.00×10-3 μg(r =0.9994),5.88×10-3 ～41.12×10-3(r =0.9994)μg 范围内呈良好线性关系；平均回收率(n=5)分别为98.7％,96.7％,98.0％,97.8％,98.9％,98.3％,97.6％,96.7％,96.7％.结论:该方法准确可靠、重复性好,可用于白芍的质量控制.
-
HPLC法同时测定远志中2种活性成分的含量
目的:建立同时测定中药远志中有效成分远志(口山)酮Ⅲ和3,6'-二芥子酰基蔗糖的HPLC含量测定方法.方法:采用Kromasil C18(250 mm×4.6 nm,5 μm)色谱柱,以乙腈-0.05%磷酸水溶液(18:82)为流动相,流速1.0 mL·min-1,检测波长320 nm,柱温30℃.结果:远志(口山)酮Ⅲ及3,6'-二芥子酰基蔗糖的线性范围分别为0.5～4.0μg(r=0.9996)和0.5～8.0μg(r=0.9996),其平均回收率(n=6)分别为97.1%(RSD=0.87%)和99.4%(RSD=1.5%).结论:该方法准确,重复性好,能够同时对远志中2种有效成分进行含测定,为远志药材的质量控制提供了有效的方法.
关键词： 远志 远志(口山)酮Ⅲ 3 6'-二芥子酰基蔗糖 高效液相色谱法 -
3,4-O-异亚丙基莽草酸在昆明种小鼠体内组织分布的研究
目的:建立3,4-O-异亚丙基莽草酸(ISA)在小鼠血浆及组织样品中的RP-HPLC分析方法;对ISA静注给药在小鼠体内分布的行为进行研究.方法:小鼠组织匀浆液(或血浆)采用酸性甲醇沉淀蛋白质并提取药物,采用RP-HPLC法测定.大连依利特Hypersil ODS2柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:甲醇-0.3%醋酸(50:100);榆测波长:220 nm;柱温:室温;流速:1.0 mL·min-1.动物实验使用昆明种小鼠40只,尾静脉注射ISA 200 mg·kg-1,给药后按时间点分为10组,分别于0,5,10,15,20,25,30,60,90,120 min取各组织样品,处理后测定.测得的数据采用DAS软件进行统计,计算并分析.结果:小鼠尾静脉给药ISA 200 mg·kg-1后,该药可很快在体内分布,大多数组织在5 min即达到较高浓度;药物在体内分布较广,主要在血液及血流丰富的组织中;药物代谢较快,给药后20 min后,大部分组织中药物浓度大幅下降.结论:本文建立的分析方法准确、灵敏度较高.通过研究,为ISA临床使用治疗范围的确定、用药剂量的确定以及临床用药监测提供参考和依据.
关键词： 3 4-O-异亚丙基莽草酸(ISA) 组织分布 -
HPLC法测定杏香兔耳风中绿原酸和3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸的含量
目的:建立杏香兔耳风药材中绿原酸和3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸的含量测定方法.方法:采用HPLC法,使用Discovery C18柱(250 mm ×4.6 mm,5μm),以乙腈-0.05%甲酸水溶液为流动相,流速1.0 mL·min-1,梯度洗脱,检测波长为328 nm.结果:绿原酸进样量在0.60～3.00μg范围内呈线性关系(r=0.9996,n=5),平均同收率为100.8%;3,5-O-二咖啡酰基垒宁酸进样量在1.30～6.52μg范围内呈线性关系(r=0.9997,n=5),平均回收率为99.4%.结论:本方法操作简便、可靠,重复性好,专属性强,可作为杏香兔耳风药材质量控制方法.
关键词： 杏香兔耳风 绿原酸 3 5-O-二咖啡酰基奎宁酸 HPLC -
HPLC法同时测定陈皮饮片中5种黄酮类化合物的含量
目的:建立高效液相色谱法同时测定陈皮药材中5种黄酮类化合物柚皮芸香苷、橙皮苷、川陈皮素、3,5,6,7,8,3',4'-七甲氧基黄酮及红橘素的含量,并对结果进行聚类分析.方法:采用Waters Synunetry 18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm);流动相为0.1%甲酸水溶液-乙腈,梯度洗脱;检测波长为300 nm;流速1.0 mL·min-1.结果:柚皮芸香苷、橙皮苷、川陈皮素、3,5,6,7,8,3',4'-七甲氧基黄酮及红橘素的线性范围分别为1.00～9.00 μg·mL-1(r=0.9998)、1.00～9.00 μg·mL-1(r=0.9999)、0.10～0.90 μg·mL-1(r=0.9997)、0.10～0.90 μg·mL-1(r=0.9999)、0.10～0.90 μg·mL-1(r=0.9994);加样回收率(n=5)分别为96.8%,99.4%,93.3%,94.4%,95.8%.结论:该方法准确、简便,具有良好的重复性和稳定性.试验结果显示,全国不同省市、不同产地陈皮饮片的含量存在差异.同时也说明多指标成分定量分析比单一指标成分定量分析能更伞面地反映陈皮饮片的内在质量.
-
大鼠血浆中白藜芦醇衍生物(BTM-0512)药代动力学研究
目的:建立RP-HPLC法测定大鼠血浆中自藜芦醇衍生物3,5,4'-O-三甲基白藜芦醇(BTM-0512)浓度的方法并进行药代动力学研究,为该化合物的进一步开发提供实验依据.方法:取血浆样品,以乙腈沉淀蛋白,用Hypersil C18柱(5 μm,250 mm×4.6 mm)分离,己烯雌酚为内标,乙腈-水(65∶35)为流动相,流速1.0 mL·min-1,检测波长319 nm.结果:BTM-0512的线性范围为0.01～10.0 μg·mL-1,r＞0.999;日内、日间精密度RSD小于10.0%;相对回收率在98.2%～101.3%之间,低检出限为0.005 μg·mL-1,低定量限为0.01μg·mL-1.结论:本方法灵敏度高,操作简便、准确,经方法学确证和稳定性评价,可用于大鼠血浆中BTM-0512的测定及药代动力学研究.
-
3,4-O-异亚丙基莽草酸(ISA)在Beagle犬体内的药代动力学研究
目的:建立Beagle犬血浆中3,4-O-异亚丙基莽草酸(ISA)的RP-HPLC分析方法,并对ISA原料药静注给药在犬体内药动学过程进行分析研究.方法:犬血浆样品中加入内标物芦丁,采用酸性甲醇沉淀蛋白质并提取药物,采用RP-HPLC法测定.大连依利特Hypersil ODS 2柱(250 mm×4.6 mm,5 μm);流动相:甲醇-0.3%醋酸(50∶65);检测波长:220 nm;柱温:室温;流速:1.0 mL·min-1.动物实验使用Beagle犬6只,采用静脉注射给药(200 mg·kg-1),进行血药浓度测定.结果:犬血浆样品中ISA无干扰,以芦丁为内标,测定血药浓度低检测限3 ng·mL-1;ISA浓度在0.01～600 μg·mL-1范围内对ISA峰面积和内标峰面积的比有较好的线性关系,r=0.9996,绝对回收率大于70%,方法回收率在98.5%～103.3%之间;日内精密度、日间精密度RSD分别小于5%和15%.ISA原料药静脉注射在犬体内过程符合二室模型.结论:本法准确、灵敏度较高,可用于ISA体内过程的研究.
关键词： 3 4-O-异亚丙基莽草酸(ISA) 药代动力学
