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单核细胞增生李斯特菌的毒力因子
目的 单核细胞增生李斯特菌(Listeria monocytogenes,Lm)属于革兰阳性无芽孢杆菌李斯特菌属,主要通过食物传播.Lm的致病性与毒力因子密切相关,研究其毒力因子对认识致病机理有着重要意义.方法 对Lm重要的毒力因子(溶血素、磷脂酶、内化素、肌动蛋白、P60蛋白等)进行综述.结果 溶血素是一个多功能的毒力因子,对于Lm逃离吞噬细胞囊是必需的.Lm能产生两种磷脂酶C:磷脂酰肌醇磷脂酶C和磷脂酰胆碱磷脂酶C,协助细菌的细胞内复制.肌动蛋白使得Lm在宿主细胞间能够扩散.内化素与Lm的侵袭力有关.P60蛋白是Lm的主要免疫原性抗原.结论 Lm毒力因子研究的深入对李斯特菌病的防治将带来深远的影响.
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福建省2000年～2003年食品中单核细胞增生李斯特菌的监测与分析
为系统了解福建省食品中单核细胞增生李斯特菌的污染状况、分布特征以及血清型别,为评价和预警我省食品污染状况和制定相关食品卫生政策提供可靠的基础数据,根据福建省的不同地理位置和经济状况,选择福州、泉州、龙岩和尤溪4个市县为监测点,在夏季和冬季随机采集农贸市场的4大类样品.样品LB增菌后,采用科玛嘉单核细胞增生李斯特茵显色平板分离,做VITEK32全自动微生物鉴定系统和Listeria monocytogenes API试剂条生化试验、溶血试验、小鼠毒力试验和血清学试验.2000年～2003年对生肉、熟肉、水产品和生牛奶4大类共1 369份食品进行检测,单核细胞增生李斯特菌的总检出率为6.14%.不同种类食品的阳性率高低不一,阳性率高为生肉(12.44%),水产品和生牛奶中均未检出.生肉类中阳性率高为冻鸡肉(38.46%),鲜鸡肉中未检出.4个市县的检出率呈地区性差异,幅度介于7.55%～5.20%之间.夏季和冬季的检出率差异无显著性.30株单核细胞增生李斯特茵的血清型别以1/2a型为主.监测结果显示福建省市售生(冻)畜禽肉存在着不同程度的单核细胞增生李斯特菌污染,应加强畜、禽类屠宰、运输、加工过程的卫生管理和监测,提出预防单核细胞增生李斯特菌食物中毒和加强宣传教育的措施,减少食源性疾病的发生.
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2009—2010年山东省食品中单核细胞增生李斯特菌的耐药性和分子分型研究
目的 了解山东省单核细胞增生李斯特菌(单增李斯特菌)耐药及分子分型特点,并探讨耐药表型与PFGE基因组型之间的关系.方法 从2009-2010年山东省6个城市的生畜禽肉、熟肉制品、水产品等食品中采集80株单增李斯特菌,采用微量肉汤稀释法测定其抗生素敏感性,采用PFGE进行分子分型,并对耐药谱与PFGE型别关系进行分析.结果 16.25％(13/80)的菌株存在耐药,其中,业胺培南的耐药率高(12.50％,10/80),其次是四环素和强力霉素(3.75％,3/80；2.50％,2/80).耐药分型可将80株菌分为9个型别.PFGE将80株菌分为34个带型,以17型和29型为主.A型耐药谱分布范围较广,出现在79.41％ (27/34)的PFGE型别中.结论 2009-2010年山东省单增李斯特菌存在较为严重的耐药现象,单增李斯特菌的PFGE分型与其药敏分型无对应关系.
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熟肉制品和蔬菜沙拉中单核细胞增生李斯特菌的风险分级评估
估模型中对某些风险因素的选择可知,如在加工后采取必要的措施,两种产品组合的风险均可降低10倍.结论 熟肉制品是发生李斯特菌病的高危食品.
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马鞍山市食品中单核细胞增生李斯特菌污染调查及分子生物学特征
单核细胞增生李斯特菌(listerial monocytogenes,LM)在自然界分布广泛,主要以家畜、家禽为宿主,可引起人和动物脑膜炎、败血症、流产等症状,是人畜共患病的致病菌,病死率达20%～30%[1].近30年来,国外多次报道由LM引发的食物中毒事件.目前,国内虽没有LM引起食物中毒暴发的相关报道,但食品监测显示食品中LM污染情况较为严峻[2-3],同时我周也曾报道多起由该菌引起临床感染的病例报告[4-5].
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散装熟肉制品中单核细胞增生李斯特菌的定量风险评估
目的 对我国散装熟肉制品中单核细胞增生李斯特菌(简称单增李斯特菌)的风险进行定量评估.方法 单增李斯特菌污染熟肉制品资料来源于2009年全国食源性疾病监测网,共涉及841份样品,对所有的841份样品进行了定性检验,另对其中的97份样品进行了定量检测;熟肉制品摄入量资料来源于2002年中国居民营养与健康调查的结果;收集国家统计局2008年监测点地区人口资料,估算不同年龄人口构成,作为评估不同人群疾病概率的基数.采用@Risk软件,按照危害识别、危害特征描述、暴露评估、风险特征描述等4个步骤定量评估0-4、5～64及65岁以上人群消费散装熟肉制品患李斯特菌病的风险,同时进行敏感性分析.结果 96.08%(808/841)的样品中单增李斯特菌的量＜3 MPN/g(0.5 1g MPN/g),散装熟肉制品中单增李斯特菌浓度平均为-0.61 1g CFU/g,其90%可信区间为-1.22～0.46 1g CFU/g;推算我国0～4、5～64和65岁以上人群消费熟肉制品的份数分别为5.52×109、8.99×1010、1.01×1010;0～4、5～64及65岁以上人群消费散装熟肉制品每年引起每百万人患病的病例数的中位数分别为5.53×10-3、1.72×10-4、7.57×10-3.敏感性分析结果显示,零售时散装熟肉制品的污染情况、消费量、家庭贮存温度、家庭贮存时间及5℃的指数生长率与患病风险的关系均是正相关(r值分别为0.607、0.408、0.339、0.259、0.183,P值均＜0.05).结论 我国散装熟肉制品具有引起单增李斯特菌病的风险;零售时散装熟肉制品中单增李斯特菌的污染情况对风险的影响大.
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多重聚合酶链反应鉴别单核细胞增生李斯特菌的研究
目的建立一种快速有效地鉴定李斯特菌属和鉴别单核细胞增生李斯特菌(Lm)的方法. 方法以具有李斯特菌种、属特异性的iap基因和Lm特异的溶血素基因(hlyA)为靶目标,分别设计双重聚合酶链反应(PCR)和三重PCR鉴别李斯特菌,并比较2种PCR方法的特异性. 结果双重和三重PCR方法检测李斯特菌属和Lm标准株,均具有良好的特异性:进行三重PCR检测,可出现3个条带,其中2条为Lm的特征性条带(700,420 bp),另1条为其他李斯特菌的iap基因片段(1 200 bp),但是双重PCR不能鉴别部分Lm食品分离株,而三重PCR则可以鉴别. 结论建立的三重PCR法可用于李斯特菌属细菌特异性鉴定和混合培养物中Lm的特异性鉴别.
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成人产单核细胞李斯特菌脑膜炎五例临床分析
李斯特菌病主要是指由产单核细胞李斯特菌(Listeria monocytogenes,Lm)引起的食源性感染病,在欧美国家曾多次引起群体性食物中毒,好发于新生儿、老年人和免疫缺陷者.随着人类人均寿命延长,以及艾滋病、恶性肿瘤等患者生存期延长且数量逐年增加,近年全球李斯特菌病的发病率几乎达上世纪末的2倍[1].此外,我国居民饮食中生冷食品所占比重增加,也在一定程度上导致李斯特菌病的发病率上升.94％的李斯特菌病为胃肠炎、菌血症或者中枢神经系统感染[1],其中,产单核细胞李斯特菌脑膜炎(Lm-Acute bacterial meningitis,Lm-ABM)因临床表现及脑脊液检查均缺乏特异性,极易误诊和漏诊,且病死率高[1-2].本研究对本院收治的5例Lm-ABM患者的临床资料进行分析,探讨Lm-ABM的临床特点.
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妊娠期单核细胞增多性李斯特菌感染并文献复习
目的 探讨妊娠期孕妇单核细胞增多性李斯特菌(LM)感染的临床特征、围生结局及临床处理经验.方法 选择2016年11月1日与2017年2月28日,四川大学华西第二医院产科收治的2例LM感染孕妇为研究对象.采用回顾性分析方法,对这2例LM感染孕妇的临床病例资料进行分析,包括妊娠期情况、妊娠期LM感染诊治情况及围生期结局.同时,结合相关文献,对妊娠期LM感染的生物学及流行病学特征、诊断及处理、对母儿的影响,以及防治措施,进行复习、总结.结果 ①本组2例LM感染孕妇的妊娠期情况为:No.1孕妇于本院建卡,No.2孕妇于外院建卡,2例孕妇均于建卡医院接受正规产前检查,均有巴氏消毒牛奶食用史,入本院治疗前,均出现发热等上呼吸道感染症状,血常规检查结果均异常.②妊娠期LM感染诊治情况:No.1孕妇通过宫颈分泌物培养结果提示中量LM感染,确诊为妊娠期LM感染;No.2孕妇通过血培养及产时取宫颈分泌物培养结果提示LM呈阳性,确诊为妊娠期LM感染.2例孕妇均接受足够剂量美罗培南(1 g/次×3次/d×14 d)抗感染治疗后,预后良好,并出院.③围生期结局:No.1孕妇于晚孕期发生LM感染,因早产临产、胎儿宫内窘迫,进行急诊剖宫产分娩术,其分娩的新生儿血培养及痰培养结果均提示LM呈阳性.因该例新生儿并发症多、病情危重,家属放弃抢救,于出生后第9天死亡.No.2孕妇于中孕期发生LM感染,胎死宫内后难免流产.结论 孕妇LM感染临床症状无特异性,常伴有发热,表现为流感样症状,临床诊断较为困难,但是孕妇LM感染对胎儿及新生儿有致命危险.因此,临床提高对妊娠期LM感染的认识,早期诊断、早期积极有效治疗,可明显改善妊娠期LM感染母儿预后.
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李斯特菌败血症六例报告
目的 分析6例由血培养证实的新生儿李斯特菌病临床特征、治疗方法与转归,提高临床对本病的识别.方法 调查2004年1月1日至2006年6月30日我院分娩活产婴儿12 538例,其中6例检出李斯特菌.比较此6例中的早产儿与足月儿在发病时间、临床表现、病情严重程度、实验室指标变化、治疗措施、预后的差异.结果 李斯特菌病检出率为4.8%.6例均为早发型感染,由母亲孕期宫内感染所致.3例早产儿生后即有败血症多样临床表现,反应低下,肤色苍灰,呼吸窘迫,肝脏增大,皮疹,四肢肌张力低下;实验室指标明显异常,WBC(21.6～33.8×109)/L,N0.77～0.83;PLT(102～59×109)/L;CRP＞(160～118)mg/L.3例早产儿合并有肺部病变,需机械通气辅助呼吸,死亡1例,痊愈2例.3例足月儿发病时间较晚,分别在生后62、63、165h,仅表现为发热,精神反应欠活跃;实验室指标轻度异常,WBC(4.8～40.7×109)/L,N 0.72～0.80;PLT(202～192×109)/L;CRP(22～33)mg/L.治疗后痊愈.确诊必须依赖于细菌培养.氨苄青霉素或青霉素治疗有效.结论 我国存在成人李斯特菌病散发病例,并导致母婴传播的发生.早期发现和检测,针对性选择敏感抗生素治疗可有效降低死亡率.对孕妇进行食品安全性宣传教育,避免孕期感染,是防止新生儿李斯特菌病的重要措施.
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妊娠晚期单核细胞增生李斯特菌菌血症一例并文献复习
报道一例2017年1月中南医院确诊为妊娠晚期单核细胞增生李斯特菌菌血症患者的临床资料,结合国内万方数据库2000年1月至2017年3月报道的25例患者资料,分析其临床特点.本例患者确诊妊娠晚期单核细胞增生李斯特菌菌血症,经抗感染治疗后于39周+4自然分娩一男婴,产后患者恢复良好,婴儿存活. 26例患者年龄(30.2 ±4.7)岁,其中妊娠早、中、晚期分别为1例、13例、12例;临床表现为发热(92%,24/26)、血白细胞计数升高(75%,18/24)、腹痛(27%,7/26)、胎动减少或消失(23%,6/26)、阴道流血(15%,4/26)等;检出单核细胞增生李斯特菌的标本分别来源于患者的血液(11例)、宫腔试子(7例)、新生儿血液(3例)等;88%(22/25)患者出现不良妊娠结局;初始经验性抗感染药物未覆盖李斯特菌.提示妊娠期李斯特菌病起病急,主要临床表现为发热,妊娠不良结局发生率高,经验性抗菌药物覆盖率低,应提高临床医生对该病的认识,减少误诊、漏诊.
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单核细胞增生李斯特菌研究进展
单核细胞增生李斯特菌( Listeria monocyto -genes)是一种人畜共患病的病原菌.李斯特菌属内共有6种菌:单增李斯特菌(L.monocytogenes)、绵羊李斯特菌(L.ivanovii)、西尔李斯特菌(L.seeligeri)、英诺克李斯特菌(L.innocua)、威尔李斯特菌(L.welshim eri)和格式李斯特菌(L.gray i);其中单增李斯特菌和绵羊李斯特菌均有致病性.
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新生儿李斯特菌脑膜炎11例临床分析
目的 探讨新生儿李斯特菌脑膜炎的临床表现、治疗及转归.方法 对2013年3月至2016年6月山西省儿童医院收治的11例新生儿李斯特菌脑膜炎患儿的临床资料进行回顾性分析,并进行随访.结果 11例患儿中,早发型9例(82％),晚发型2例(18％).11例患儿中8例(73％)出现神经系统并发症,均为早发型患儿.5例患儿入院前曾应用头孢类抗生素,疗效差.明确病原菌后所有患儿均予青霉素/氨苄西林,其中6例联合美罗培南治疗.10例患儿获随访,随访时间为7～47个月,2例患儿(早发型)出现语言运动发育落后,其余8例正常.结论 新生儿李斯特菌脑膜炎临床表现缺乏特异性,早发型多见,且易出现神经系统并发症及后遗症.做好产前预防、早期诊断并及时应用敏感抗生素,可提高治愈率、改善预后.
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新生儿单增李斯特菌败血症1例报告
李斯特菌败血症是由单核细胞增多性李斯特菌(listeria monocytogenes,LM)感染所致的人畜共患疾病,新生儿感染多经宫内传播,引起败血症,是新生儿期较为严重的感染性疾病,病情重且病死率高.本病多为散发,在欧美国家曾有报道引起多次食源性爆发流行,且近年来发病呈上升趋势[1],但在国内报道尚属较少.由于新生儿用药的局限性,本病治疗常存在一定的困难.现将南通大学附属苏州吴江第一人民医院新生儿科收治的1例新生儿单增李斯特菌败血症的病例报告如下.
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单增李斯特菌作为疫苗载体的研究进展
单核细胞增生李斯特菌 (Listeria monocytohenes)简称单增李斯特菌(LM),是一种革兰氏阳性兼性厌氧、胞内寄生菌,对环境耐受性强,可在较高的盐浓度(可高达40%NaCl)以及宽泛的pH(pH3～12)和温度范围(0～45℃)内生长,并可形成夹膜,因而LM广泛存在于自然界的不同环境中(土壤、水源、植物及动物体内等),易污染各种食品(肉、奶、海产品及蔬菜等),属条件致病性人畜共患病原菌[1].
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PCR方法检测食品中单核细胞增生李斯特氏菌
目的:建立一种快速准确检验食品中单核细胞增生李斯特氏菌的方法.方法:采用聚合酶链反应(PCR)特异性扩增单核细胞增生李斯特氏菌溶血素基因(hlyA),用PCR方法检测80份长春地区的食品样品.结果:在706 bp处出现hlyA基因的目的片段,食品样品中单核细胞增生李斯特氏菌阳性检出12份,阳性率为15%,与吉林省疾病预防控制中心同步进行的国标法检测结果一致,二者符合率100%.结论:PCR方法检测食品中单核细胞增生李斯特氏菌更简便、快速、敏感、特异性高,适用于基层单位开展食品中单核细胞增生李斯特氏菌污染的调查及监测.
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不同方法检测食品中单核细胞增生李斯特菌比较
单核细胞增生李斯特菌广泛分布于自然界,污染肉禽类、乳类、鱼贝类及蔬菜等食品引发食物中毒.新生儿、高龄孕妇和免疫力低下者易感染,主要引起脑膜炎和败血症,死亡率较高.美国、英国、加拿大等国多次爆发由该菌污染空心菜、奶酪等引起食物中毒,病死率达30%以上[1].
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寡核苷酸芯片技术检测5种临床肠道病原菌的研究
背景:寡核苷酸芯片是一种检测病原菌的新技术,具有高通量、特异性等特点.目的:采用寡核苷酸芯片技术建立对5种临床常见肠道病原菌(霍乱弧菌、空肠弯曲杆菌、志贺菌、耶尔森菌、单核细胞增生利斯特菌)进行快速、准确鉴定和检测的方法.方法:选取16SrDNA作为检测靶基因,设计通用引物和寡核苷酸探针.病原菌基因组DNA通过16SrDNA通用引物行聚合酶链反应(PCR),扩增后与芯片上的探针杂交.结果:霍乱弧菌、空肠弯曲杆菌、志贺菌、耶尔森菌、单核细胞增生利斯特菌的杂交信号均很强,其他细菌无杂交信号.寡核苷酸芯片的检测时间约5h,其敏感性可达103CFU/ml.寡核苷酸芯片对23例临床腹泻样本的检测结果与传统细菌学培养结果完全一致.结论:寡核苷酸芯片的特异性、稳定性、重复性均较好,是检测临床肠道病原菌准确、可靠、实用性强的方法.
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携带MART-1基因的减毒单核细胞增多性李斯特菌抑制小鼠恶性黑素瘤的研究
目的 探讨携带黑素瘤分化抗原MART-1基因的减毒单核细胞增多性李斯特菌(LM)对恶性黑素瘤的抑制作用及其机制.方法 构建pERL3-MART-1载体,通过电转化建立携带MART-1基因的△inlB LM-MART-1和△actA/△inlB LM-MART-1重组李斯特菌.浓度梯度稀释法测定各减毒菌株半数致死量(LD50).C57BL/6小鼠随机分为磷酸盐缓冲液(PBS)组,△inlB LM-MART-1组和△actA/△inlB LM-MART-1组.首次免疫后第7天于小鼠腹部皮下接种B16F10细胞,第14天、21天重复免疫小鼠,观察并记录肿瘤大小及小鼠生存状态.应用实时定量PCR检测肿瘤组织中MART-1表达量.流式细胞术检测小鼠脾细胞中CD4+CD25+T细胞阳性率.结果 经鉴定成功构建△inlB LM-MART-1和△actA/△inlB LM-MART-1.减毒株△inlB LM和△actA/△inlB LM的LD50比LM-EGDe标准株毒力分别下降100倍和10 000倍.体内抑瘤试验显示,与PBS组比较,△inlB LM-MART-1组抑瘤率为46.95%,△actA/△inlB LM-MART-1抑瘤率为83.96%,差异均有统计学意义(P<0.05和0.01). PBS组、△inlB LM-MART-1组和△actA/△inlB LM-MART-1组肿瘤组织中MART-1表达量递增,以PBS组表达量为1,后两组为8.988±0.207和11.315±0.445,各组间差异均有统计学意义(P值均<0.05),且三组小鼠脾细胞中CD4+D25+T 细胞阳性率依次为(2.52±0.20)%、(1.14±0.13)%和(O.44±0.15)%,组间差异均有统计学意义(P值<0.01).结论 携带MART-1基因的减毒LM毒性明显低于LM标准株,而且可以有效抑制黑素瘤生长,延长小鼠生存期.
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嵊州市2010年食品中食源性致病菌监测结果
致病性微生物污染引起的食源性疾病是全球的公共卫生问题,也是影响食品安全的主要原因[l].为科学指导食品安全监督管理工作,为食源性疾病的预防控制提供科学依据.根据国家食品安全风险监测方案,作者于2010年在嵊州市农贸市场、超市、餐饮店采集各类食品149份,开展了沙门菌、副溶血性弧菌、单核细胞增生李斯特菌、大肠埃希菌O157:H7、金黄色葡萄球菌、空肠弯曲菌6种食源性致病菌监测.现将结果报告如下.
