尘螨特异性免疫治疗哮喘合并变应性鼻炎患儿早期疗效及影响因素研究

目的 了解哮喘合并变应性鼻炎患儿经尘螨特异性免疫治疗后早期临床疗效的动态变化,并探讨疗效影响因素.方法 收集2012年2月至11月于北京儿童医院确诊的尘螨致敏的轻中度哮喘合并变应性鼻炎患儿70例,对其进行尘螨特异性免疫治疗联合哮喘和鼻炎的药物治疗,并进行病例自身对照研究.结果 54例患儿完成了1年的随访,治疗后3、6、9和12个月的治疗有效率分别为72.2％、75.9％、81.5％和87.0％;治疗后1年SMS较基线期显著降低[(5.28±2.28)vs.(2.87±1.96),P＜0.05],VAS较基线期显著降低[(5.59±3.35)vs.(4.04±3.68),P＜0.05],肺功能呼气流量峰值(PEF％ pred)较基线期显著升高[(95.41±15.18) vs.(99.24±16.24),P＜0.05].结论 尘螨特异性免疫治疗联合控制药物治疗哮喘合并变应性鼻炎患儿的早期有效率随治疗时间延长而升高,哮喘病程短、基线期PEF％pred低、基线期症状用药计分高的患儿特异性免疫治疗的早期临床疗效更为显著.

哮喘患儿对标准化尘螨特异性免疫治疗剂量递增阶段的耐受性

目的了解哮喘患儿对尘螨特异性免疫治疗剂量递增阶段的耐受性.方法 对2005-06-2005-09北京儿童医院哮喘专业门诊24例临床诊断哮喘的患儿,应用标准化屋尘螨提取液皮下注射,对24例尘螨过敏的哮喘患儿进行特异性免疫治疗.观察剂量递增阶段每次免疫注射后速发和迟发不良反应发生情况,同时在每次变应原注射前和注射30min后测定肺功能.结果 剂量递增阶段24例患儿免疫注射总次数为370例次.14例(58.33%,14/24)发生27例次(7.3%,27/370)速发不良反应,其中26例次(96.3%,26/27)为轻度局部反应(肿胀直径小于5cm),1例次为轻度哮喘.21例(87.5%,21/24)发生38例次(10.27%)迟发不良反应,其中9例次为轻度全身反应(23.68%,9/27),包括哮喘、过敏性鼻炎、过敏性结膜炎、过敏性皮炎,1例次局部反应中度(肿胀直径5cm),其余均为轻度局部反应.各次免疫注射前后肺功能各参数变化率的差异无统计学意义.结论 哮喘患儿对标准化屋尘螨提取液特异性免疫治疗耐受性良好,绝大多数局部不良反应为轻度,全身不良反应均为轻度,经及时调整剂量递增方案,可减少可控性不良反应的发生.各次免疫注射对肺通气功能无显著性影响.

沈阳市儿童尘螨过敏家庭环境调查

目的 调查分析沈阳市尘螨过敏患儿与家庭环境的关系,为预防和治疗提供依据.方法 调查对象为2011年6月至2014年9月在沈阳市儿童医院门诊就诊的尘螨过敏患儿400例,其中哮喘290例,鼻炎85例,荨麻疹25例.采用统一问卷调查家庭环境,用Logistic多元回归分析尘螨过敏的危险因素.结果 室内地毯、布艺沙发、毛绒玩具3个因素的回归系数均为正值,分别为2.432、1.347、1.289,其OR值均＞1,分别为4.112、3.896、3.652,是增加尘螨变应性疾病的危险因素(P＜0.05).结论 室内地毯、布艺沙发和毛绒玩具是尘螨过敏患儿的危险因素,建议尘螨过敏患儿家庭不用地毯、布艺沙发和毛绒玩具.

Foxp3-924基因多态性与变应性结膜炎关系探讨

目的 对尘螨诱导引起变应性结膜炎的患者行Foxp3-924 (rs2232365)基因分型,探讨Foxp3-924 (rs2232365)基因与尘螨变应性结膜炎遗传易感性的相关性.方法 临床对照研究.对2007～2011年在广州医科大学附属第二医院眼科应用PCR-SSP技术为80例无亲缘关系的尘螨变应性结膜炎患者和103名无血缘关系的健康汉族人行Foxp3-924 (rs2232365)基因分型.结果 Foxp3-924位点AA基因型频率在变应性结膜炎患者与正常对照组相比差异无统计学意义[32.5％ (26/80) vs.23.3％ (24/103),x 2=1.92,P＞0.05);GA基因型在变应性结膜炎患者中的频率显著高于正常对照组,差异有统计学意义(x2=4.82,P＜0.05).GG基因型在变应性结膜炎患者中的频率显著低于正常对照组,差异有统计学意义(x2=11.78,P＜0.01).与正常人相比,Foxp3-924 A等位基因频率显著上升,G等位基因下降,差异有统计学意义(x2=9.77,P＜0.01).结论 Foxp3-924位点基因多态性与变应性结膜炎显著相关.

粉尘螨滴剂治疗尘螨过敏性哮喘231例的疗效及安全性分析

目的 评价舌下免疫疗法(SLIT)治疗尘螨过敏性哮喘的疗效及安全性.方法 对231例尘螨过敏的哮喘患者应用粉尘螨滴剂进行2年脱敏治疗,比较治疗前、后的变化及用药过程中的局部和全身不良反应情况.结果 治疗后过敏性哮喘患者的鼻炎症状及哮喘症状评分等多项指标均比治疗前有显著改善(P＜0.05)；应急用药量较治疗前明显减少(P＜0.05).治疗期间未发生严重不良事件.结论 粉尘螨滴剂治疗尘螨引起的过敏性哮喘有很好的疗效及安全性,值得临床推广使用.

东北地区10年螨变应原诱发的过敏性疾病调查分析

目的 了解东北地区十年螨变应原诱发的过敏性疾病病种及特征,为东北地区过敏性疾病的防治提供依据.方法 本研究采用我科信息系统数据库,统计自2001年1月-2010年12月共10年的过敏性疾病人数,并结合数据库中皮肤点刺试验(SPT)结果,对尘螨变应原诱发的过敏性疾病的病种、性别、年龄、职业、环境等进行统计及分析研究.结果 10年中来我科就诊的总人数为156 800人次,就诊病种主要为哮喘、鼻炎、荨麻疹、皮炎、湿疹、结膜炎、过敏性结肠炎等.由尘螨变应原引起的过敏性疾病多的是过敏性哮喘,其次是变应性鼻炎、荨麻疹、皮炎.结论 东北地区尘螨孳生多见,易引起过敏,且患者四季均可发病.加强居室环境尘螨类控制,是减轻尘螨病症状和减少过敏发作的重要预防措施.

尘螨引起的变态反应性疾病及其防治进展

综述尘螨引起的各种变态反应性疾病,以及环境干预措施和特异性免疫治疗对防治尘螨疾病的重要性.认为有必要对较新的治疗药物DNA疫苗、IgE单克隆抗体进行深入研究.

尘螨变应原Derf 6/pET32a（+）重组质粒构建、表达、纯化及其产物血清IgE结合率

目的：：获得尘螨变应原第6组分Der f 6原核表达产物并检测其与尘螨过敏性哮喘患儿血清抗体IgE结合率。方法：酶切质粒pET28a(+)-Der f 6获得目的基因Der f 6,将其与pET32a(+)载体连接成质粒pET32a (+)-Der f 6,转化BL21细菌后,用异丙基硫代半乳糖苷( IPTG)诱导表达,用Ni+离子亲和层析柱纯化表达产物,用十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳( SDS-PAGE)、免疫印迹实验( Western blot)和蛋白质串联质谱( MALDI-TOF/TOF)鉴定纯化产物。以纯化获得的产物为包被抗原建立间接ELISA法检测尘螨过敏性哮喘患儿血清抗体反应情况。结果：成功构建了原核表达质粒pET32a (+)-Der f 6,将该质粒转化E. coli BL21诱导表达,亲和层析纯化后,SDS-PAGE显示获得目的蛋白,Western blot验证其能够与载体的组氨酸标签结合,质谱鉴定其Der f 6结构一致。以此产物为包被抗原建立间接ELISA检测尘螨过敏性哮喘患儿血清,阳性率为41.3%(19/46)。结论：成功构建了原核表达质粒pET32a (+)-Der f 6,亲和纯化获得的目的蛋白具有良好的反应原性。

尘螨变应原Der f1植物表达载体的构建及表达

目的:构建尘螨变应原Der f1植物表达载体并侵染烟草叶片表达.方法:从保存的含pET28a(+)-Der f1的甘油菌株中扩增Der f1基因,并克隆到质粒载体中,提取质粒,进行测序;以ClaⅠ、SalⅠ双酶切,将Der f1基因克隆到马铃薯X病毒(PVX)载体中,构建植物病毒表达载体;将PVX-Der f1转化脓杆菌,挑取Kan、Tet抗性阳性的菌株侵染烟草叶片进行蛋白表达,采用SDS-PAGE和Western blot对表达蛋白进行鉴定和分析.结果:经SDS-PAGE分析,有4株烟草叶片蛋白提取物在34Mr处有特异性蛋白条带;经Western blot进一步验证其变应原,结果显示,烟草叶片中获得的重组蛋白在34M_r处与阳性血清发生特异性结合,而与阴性血清并不发生结合.结论:成功构建了植物病毒表达载体PVX-Der f1并获得表达,为尘螨变应原Der f1的研究提供新思路.

尘螨变应原Derf3、Derp3和Eurm3结构和功能的比较研究

目的：比较尘螨变应原Der f 3、Der p 3和Eur m 3的结构及功能异同。方法：用ProtParam、PROSITE、Jpred、Modeller 9.12和ABCpred等生物信息学工具来预测、比较Der f 3、Der p 3和Eur m 3的一级、二级、三级结构及抗原表位。结果： Der f 3、Der p 3和Eur m 3氨基酸序列一致性为88.51％，都含有3个胰蛋白酶活性位点氨基酸及2个功能结构区特异性序列；二级和三级结构中都由α-螺旋、β-折叠和无规卷曲组成；活性位点氨基酸在三级结构中完全重合，并相互靠近构成蛋白酶的活性中心；主要潜在抗原表位区域都为5个，并在第79-81 aa、129-135 aa和172-174 aa区域出现了重合，但表位重合区的氨基酸种类不完全相同。结论：应用生物信息方法预测和比较了Der f 3、Der p 3和Eur m 3结构与抗原方面的信息，为进一步研究变应原功能、疫苗研制奠定了基础。

皮下免疫治疗尘螨变应性鼻炎患者的不依从原因调查及随访研究

本研究将探讨患者提前终止免疫治疗的原因,对其病情转归进行随访以进一步提高免疫治疗效率,将有助于今后的临床工作中提高变应性鼻炎的免疫治疗的依从性.

冬季谨防过敏性哮喘

过敏性哮喘不同于一般的普通哮喘,它是免疫系统发生变态反应导致气道突变狭窄,从而引发的哮喘病.在冬季,冷空气、花粉、尘螨等吸入性物质是引发过敏性哮喘的主要过敏原.

尘螨变应原治疗性产品鉴别试验解吸附方法的建立

目的 建立尘螨变应原治疗性产品鉴别试验的解吸附方法.方法 选取两个厂家的尘螨变应原治疗性产品,分别用1 ml 20％柠檬酸溶液、0.4 mol/L磷酸盐溶液和0.5 mol/L EDTA-Na溶液解吸附后,进行SDS-PAGE和Western blot鉴别试验.将两个厂家各3批尘螨变应原治疗性产品于常温及37℃下分别解吸附16和24 h,进行Western blot鉴别试验.结果 两个厂家的制品经3种溶液解吸附后,SDS-PAGE结果均可见相对分子质量约28 000及15 000的组分Ⅰ丝氨酸蛋白酶和组分ⅡNPC家族蛋白目的条带,Western blot结果可见同样大小的与鼠抗螨变应原组分Ⅰ、Ⅱ单克隆抗体特异性结合的蛋白条带,而未解吸附的制品未检测到以上目的条带.3批制品的Western blot鉴定结果相近,表明两种解吸附温度及时间对鉴别试验的结果影响不大.结论 尘螨变应原治疗性产品需经解吸附后才能进行鉴别试验,本研究建立的解吸附方法可有效稳定地对制品进行解吸附.

新型尘螨过敏原疫苗的研究进展

尘螨是导致过敏性哮喘、鼻炎和皮炎等过敏性疾病重要的过敏原来源.脱敏治疗是目前治疗过敏性疾病为有效的手段.随着对过敏原研究的日益深入,过敏原疫苗的研究越来越得到重视.本文对预防治疗尘螨过敏原相关疾病的DNA疫苗、重组活菌疫苗、重组蛋白疫苗及细菌性疫苗等新型疫苗的研究进展作一简要综述,旨在为过敏原相关疾病的防控提供参考.

尘螨制品抗原活性检定用血清国家标准品的建立

目的 建立尘螨制品抗原活性检定用血清国家标准品.方法 根据过敏患者临床症状和血清学检测筛选并确认尘螨过敏患者,收集符合入选标准的患者血清并混合,采用ImmunoCAP实验检测该混合血清中针对屋尘螨和粉尘螨特异性IgE抗体含量,经协作标定终确定混合血清的特异性IgE数值.将血清标准品和企业内参血清分别与该企业样品混合并孵育过夜,经ImmunoCAP实验检测屋尘螨和粉尘螨变应原制剂活性.结果 该血清国家标准品中,针对屋尘螨的特异性IgE含量为247.4 KUA/L,针对粉尘螨的特异性IgE含量为243.4 KUA/L.血清国家标准品与企业内参血清在检测结果上具有较高的一致率.结论 建立了我国第1批尘螨制品抗原活性检定用血清国家标准品,已被国家药品标准物质委员会批准正式使用,批号为290002-201601.

居家切忌『螨』不在乎

螨虫是继跳蚤、苍蝇之后，为猖獗的人类居室害虫，它专靠刺吸人的皮肤组织细胞、皮肤腺分泌的油脂等为生。螨虫一般长0．1～0．2毫米，种类很多，差不多有50万种。其中，隐藏在居室并与人类健康密切相关的主要有：尘螨、疥螨、蠕形螨、粉螨、蒲螨、果螨、食甜螨等，居室的阴暗角落、地毯、床垫、枕头、沙发、空调等处，都是螨虫滋生的地方。

湿疹的药物治疗

湿疹是皮肤科常见的变态反应性皮肤病,约占皮肤科门诊量的15%～30%.湿疹一般认为与变态反应密切相关,有些患者对食物(如鱼、虾、牛羊肉)或吸入物(如药粉、尘螨、羽毛等)敏感,也可能与遗传、某些全身性疾病所引起的机体变化有关.急性湿疹如果得不到及时正确的治疗,常常转变为亚急性和慢性湿疹,使病情反复发作,经久难治,给患者带来很大痛苦.为此,探讨湿疹有效的治疗方法非常必要.

133羊水与脐血中家庭尘螨变态反应原的检测

尘螨变应原Der p1浓度与哮喘患者血清螨特异性抗体的季节消长

目的:探讨哮喘患者血清抗体及患者室内尘螨抗原浓度的季节变化规律.方法:2005年9月、2005年12月、2006年3月、2006年6月用ELISA法检测哮喘患者卧室尘样中DerP 1浓度,同步检测患者外周血总IgE、s-IgE、s-IgG1、s-IgG2和s-IgG4.结果:哮喘患者血清总IgE、s-IgE、s-IgG1、s-IgG2和s-IgG4均高于正常对照组,差异均具显著性(P＜0.01);比较患者血清总IgE、s-IgE及s-IgG1、s-IgG2、s-IgG4四次检测值,差异均具显著性(P＜0.01),患者血清总IgE、s-IgE在12月份检测值高、6月份检测值低,s-IgG1以6月份高、3月份低,s-IgG4在3月份高、6月份低.统计表明,患者卧室DerP1浓度四次检测值差异具有显著性(P＜0.01),以2006年3月和2005年12月为高.结论:哮喘患者血清总IgE、s-IgE、s-IgG1、s-IgG2和s-IgG4和卧室尘螨抗原浓度呈季节变化,IgG1的变化与尘螨抗原浓度的变化趋势相反,IgG4的变化与尘螨抗原浓度的变化趋势一致.

粉尘螨变应原第7组分全长基因序列测定与分析

目的:获得粉尘螨变应原第7组分编码基因并了解其分子特征.方法:根据GenBank已公布的Der f7核酸序列设计引物,用RT-PCR扩增获得其编码基因,插入pMD19-T载体进行序列测定和生物信息学分析.结果:获得Der f7全长基因约642 bp,与参考序列(GenBank AY 283292)同源性达99.7%%,仅在249位"A→G"和439位"C→T"发生点突变,含1个完整的开放读码框.推测编码蛋白由213个氨基酸组成,信号肽序列位于1-17aa,亲水性指数为0.031,跨膜区域位于171-190aa,二级结构由-螺旋(57.28%)、延伸主链(6.57%)和无规卷曲(36.15%)组成;亚细胞定位于细胞质,含有N-糖基化位点1个(151-154aa),蛋白激酶C磷酸化位点1个(193-195aa),酪蛋白激酶Ⅱ磷酸化位点2个(155-158aa and 173-176aa),N端酰基化位点1个(97-102aa).粉尘螨和屋尘螨变应原第7组分氨基酸序列相似度为86%,二者在螨类第7组分氨基酸序列构建出的分子进化树中聚成一簇.结论:获得了Der f7全长基因,为进一步获得其基因工程制品用于临床和实验研究奠定了基础.