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转基因番茄口服疫苗的研究进展
第1例转基因烟草表达链球菌变异株SpaA(surfaceprotein antigenA)蛋白疫苗的成功研制~([1]),开启了利用植物表达动物病原抗原蛋白的新纪元.1992年,Mason等~([2])提出了"转基因植物疫苗"的概念,标志着植物口服疫苗成为新药研发新途径的全面展开.
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尘螨变应原Der f1植物表达载体的构建及表达
目的:构建尘螨变应原Der f1植物表达载体并侵染烟草叶片表达.方法:从保存的含pET28a(+)-Der f1的甘油菌株中扩增Der f1基因,并克隆到质粒载体中,提取质粒,进行测序;以ClaⅠ、SalⅠ双酶切,将Der f1基因克隆到马铃薯X病毒(PVX)载体中,构建植物病毒表达载体;将PVX-Der f1转化脓杆菌,挑取Kan、Tet抗性阳性的菌株侵染烟草叶片进行蛋白表达,采用SDS-PAGE和Western blot对表达蛋白进行鉴定和分析.结果:经SDS-PAGE分析,有4株烟草叶片蛋白提取物在34Mr处有特异性蛋白条带;经Western blot进一步验证其变应原,结果显示,烟草叶片中获得的重组蛋白在34M_r处与阳性血清发生特异性结合,而与阴性血清并不发生结合.结论:成功构建了植物病毒表达载体PVX-Der f1并获得表达,为尘螨变应原Der f1的研究提供新思路.
关键词: 尘螨 Der f1 马铃薯X病毒(PVX) 植物表达 -
疟疾植物口服疫苗的研制
转基因植物已用于表达多种病原体的抗原蛋白.动物实验证实转基因植物表达的抗原蛋白经纯化后仍保留其免疫学活性,注入动物体内能诱生特异性抗体;用转基因植物组织饲喂动物,抗原蛋白在植物细胞壁的保护下能通过胃的酸性环境到达肠相关淋巴组织,被其表面特异受体所识别,诱导产生黏膜免疫和系统免疫应答.该文在综述疟疾口服疫苗研究进展的基础上,探讨了用转基因植物生产疟疾口服疫苗的可行性.
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M-CSF受体配基结合区基因克隆及其在烟草中的表达
巨噬细胞集落刺激因子(macrophage colony-stimu-lating factor,M-CSF)是一种多功能细胞因子,具有促进单核-巨噬细胞生长、增殖、分化等功能.