首页 > 文献资料
-
LRG-1在舌癌组织及舌癌细胞系Tca8113中的表达及意义
目的：探讨富亮氨酸α2糖蛋白1（LRG-1）在舌癌及舌癌细胞系Tca8113中的表达及其与舌癌临床病理参数的关系并分析LRG-1的临床意义。方法采用S-P免疫组织化学方法检测我院40例浸润性舌癌患者的病灶及癌旁正常组织、20例舌部不典型性增生组织、20例舌原位癌中LRG-1的表达，分析LRG-1表达与舌癌临床病理参数的相关性；流式细胞技术检测舌癌细胞系（Tca8113）中LRG-1的表达；Western blotting法检测舌癌组织及细胞系Tca8113中LRG-1的表达；MTT法检测LRG-1对人血管内皮细胞生长的影响；体外小管形成实验观察LRG-1对血管生成的影响。结果 LRG-1阳性表达率在舌癌组织中（85%，34/40）显著高于癌旁正常组织（10%，4/40），亦显著高于舌部不典型性增生组织（30%，6/20）及舌原位癌（50%，10/20），差异均有统计学意义（P<0.05）。LRG-1在舌癌组织中的表达与患者年龄、性别等不相关，而与组织分化程度、临床分期及淋巴结转移有相关性（P<0.05）。LRG-1能够促进血管内皮细胞的增殖和小管形成。结论 LRG-1在舌癌组织及细胞系中表达异常，且能够促进血管内皮细胞的生长和小管形成，提示其可能与肿瘤血管生成有关。
关键词： 富亮氨酸α2糖蛋白1 舌鳞癌 TCA8113 血管生成 -
长链非编码RNA在舌鳞癌中的表达谱特征
[目的]观察长链非编码RNA (lncRNA)在正常舌组织和舌鳞癌组织中表达谱的变化.[方法]利用lncRNA表达谱芯片检测技术,筛查3例舌鳞癌组织及3例正常舌组织中lncRNA表达谱的变异,通过对原始数据进行预处理达到均一化后,确定舌鳞癌组织中2倍以上变化并有显著差异(P＜0.05)的lncRNA为差异表达lncRNA,筛选出差异表达的lncRNA;分别在scc-9、cal-27、um-1和um-2共4种人舌鳞癌细胞和1种人正常舌细胞以及在35例舌鳞癌组织和12例正常舌组织中,利用实时荧光定量逆转录-多聚酶链反应(qRT-PCR)对芯片结果进行验证;对筛选所得的部分差异表达的lncRNA,利用lncRNA与mRNA特异性表达的标准化信号强度,构建基因共表达网络,并进行分析.[结果]芯片共筛选差异表达lncRNA 3590条,其中上调的共1785条,降低的共1805条;选取其中部分lncRNA,qRT-PCR进一步证实了芯片结果的准确性;共表达网络构建提示某些lncRNA可能在参与舌鳞癌发生发展过程中发挥重要调控作用.[结论]与正常舌组织比较,舌鳞癌组织lncRNA表达谱发生显著变化,提示差异表达的lncRNA可能与舌鳞癌的多种恶性表型有着密切联系.
-
舌鳞癌组织中血管内皮生长因子－D 的表达与淋巴管生成的关系及意义
目的：检测血管内皮生长因子－D（ VEGF－D）在舌鳞癌组织中的表达情况及舌鳞癌癌内和癌周淋巴管密度，并探讨VEGF－D与舌鳞癌淋巴管密度（ LVD）的关系及其临床意义。方法采用免疫组化染色法检测60例舌鳞癌组织（观察组）和12例正常舌黏膜组织（对照组）中VEGF－D和LVD的表达情况，统计分析VEGF－D与癌内、癌周LVD之间的相关性及临床意义。结果观察组的 VEGF －D高表达率为60.00％，对照组为25.00％，两组差异有统计学意义（ P＝0.026）。对照组的LVD高表达率为20％，观察组的癌周LVD高表达率为58.33％、癌内LVD高表达率为48.33％，与对照组比较，差异均有统计学意义（P＝0.008，0.043）。 VEGF－D和癌周LVD的高表达与淋巴结转移、临床分期、生存状态及预后之间有关（ P＜0.05）。癌内LVD的高表达仅与肿瘤T分类有关（P＝0.039）。 VEGF－D与癌周LVD在舌鳞癌中呈正相关（r＝0.966， P＜0.001）。结论 VEGF－D和淋巴管生成与肿瘤的侵袭、转移及预后密切相关，可作为指导舌鳞癌诊治及判断预后的重要指标。
-
舌鳞癌患者外周血髓样来源抑制细胞的表达及意义
目的：鉴定舌鳞癌患者外周血中血样业源抑制细胞（ MDSC）的表型，探讨影响舌鳞癌患者外周血中MDSC表达的相关因素。方法选择未接受过治疗的舌鳞癌患者27例和健康志愿者16例，分别记录患者的性别、年龄、吸烟史、TNM分期、病理分型。流式细胞学技术分析患者和健康志愿者外周血中CD14－CD33＋CD11b＋MDSC细胞的表达。结果舌鳞癌患者与健康志愿者间性别和年龄差异无统计学意义。患者外周血中MDSC细胞比例高于健康志愿者（ P＜0.001）。舌癌患者中吸烟者与非吸烟者间外周血MDSC细胞差异无统计学意义（ P＞0.05）。晚期舌癌患者MDSC细胞比例高于早期舌癌患者（P＜0.05）。舌癌高分化者与中分化者，中分化者与低分化者间MDSC细胞比例差异均无统计学意义（P＞0.05）；而高分化者MDSC细胞比例高于低分化者（P＜0.05）；三者外周血中MDSC细胞比例均高于健康志愿者（P＜0.05）。患者TNM分期和病理分级与外周血中MDSC细胞比例有明显相关性（P＜0.05）。结论舌鳞癌患者外周血中CD14－CD33＋CD11b＋MDSC比例较健康人明显升高，升高的程度与临床分期和病理分级相关。
-
舌癌患者 p16基因启动子 CpG 岛甲基化及其与临床病理的关系
目的：研究舌癌与 p16基因启动子区域的 CpG 岛甲基化的潜在关系，并了解 p16基因甲基化与临床病理的关系。方法观察组舌癌标本及对照组正常舌组织标本所提取的 DNA，经亚硫酸氢钠处理改变甲基化碱基，设计相应引物（p16－M、p16－U）Q －MSP 扩增，检测样本中的甲基化比例。结果观察组甲基化阳性率为64．58％（31／48），对照组阳性率仅2．08％（1／48），差异有统计学意义（P ＜0．05）；舌癌个体中 pl6基因甲基化比例与病理分期、发生淋巴转移、组织学分化程度相关，与年龄、性别无关。结论p16基因启动子 CpG 岛甲基化现象与舌鳞癌的发生发展关系密切；癌症发展越晚期、肿瘤浸润更深、发生转移、更低分化者 p16基因启动子 CpG 岛甲基化的频率更高，但与患者年龄、性别等因素无关。
-
FRMD4A在舌鳞状细胞癌中的表达及意义
目的 观察FRMD4A在口腔舌鳞状细胞癌(简称鳞癌)中的表达情况,探讨其在舌鳞癌发生发展中的作用.方法 实时定量qRT-PCR检测10例舌鳞癌组织和相应10例癌旁正常舌组织中 FRMD4A mRNA的表达;免疫组化检测FRMD4A 蛋白在78例舌鳞癌、15例舌白斑和15例癌旁正常组织中的表达情况;t检验分析FRMD4A mRNA 表达差异,2检验分析FRMD4A蛋白表达情况与临床病理特征之间的关系.结果 FRMD4A mRNA的表达在舌鳞癌组织中显著高于癌旁正常舌组织;FRMD4A蛋白的表达在舌鳞癌组织中明显高于舌白斑组织和癌旁正常组织;阳性表达主要在基底层,随肿瘤恶性程度增加,有向棘层扩散的趋势;FRMD4A蛋白高表达多出现于发生淋巴结转移和TNM分期晚的患者,差异有统计学意义(P<0.05).FRMD4A蛋白在舌鳞癌组织中的高表达,但与肿瘤分化程度、患者性别和年龄无关.结论 FRMD4A高表达与舌鳞癌的发展及转移有关,可作为临床预后危险因素和潜在治疗靶点.
-
31例舌鳞癌回顾性临床分析
目的探讨舌鳞癌治疗的疗效和影响预后的因素.方法回顾性分析我科1990年12月-2000年10月收治的经病理证实的舌鳞癌31例,单纯放疗14例,加用平阳霉素增敏放疗17例.结果全组总的5年生存率为24%,Ⅰ、Ⅱ、Ⅱ、Ⅳ期5年生存率分别为100%、3 3.3%、16.7%、0%,疗终肿瘤残余者5年生存率为0%,而肿瘤全部消失者则为46.2%,单纯放疗组5年生存率为16.7%,加用平阳霉素增敏组5年生存率为30.8%.结论影响舌鳞癌的预后因素为临床分期、治疗方法及疗终时肿瘤消失情况.
-
全反式维甲酸减少舌癌小鼠髓样来源抑制细胞
目的:观察全反式维甲酸(ATRA)治疗后对机体肿瘤免疫应答内环境的改变的影响.方法:选取C57BL/6小鼠,分为3组:空白对照组10只;ATRA治疗组10只,4-硝基喹啉-1-氧化物(4NQO)水饮用16周后,腹腔给药ATRA,每周1次,连续12周;PBS组10只,4NQO水饮用16周后,腹腔注射PBS,每周1次,连续12周.第28周取全舌标本,肉眼观察大体损害,流式细胞学分析外周血中髓样来源抑制细胞(MDSC)及成熟树突状细胞(DC)的变化.结果:整个实验期间,所有小鼠均存活.ATRA治疗显著减少了4NQO诱导小鼠舌黏膜病变发生的个数(P＜0.05).使4NQO诱导小鼠外周血中MDSC比例降低(P=0.048),成熟DC细胞比例升高,但未达到显著性意义(P=0.595).结论:ATRA在一定程度上可以减少舌癌小鼠体内MDSC的比例,可能增加成熟DC的比例,有助于提高机体的抗肿瘤免疫应答.
-
8－OHdG 与 p－EGFR 在舌鳞癌中的表达及两者的相关性
目的探讨舌鳞状细胞癌组织中活性氧的标志物8－羟基脱氧鸟苷（8－OHdG ）和磷酸化表皮生长因子受体（ p－EGFR）的表达水平，并分析二者的相互关系。方法应用免疫组化法检测30例舌鳞癌组织及其癌旁组织中8－OHdG和p－EGFR表达，通过相关性分析探讨两者之间的关系。结果8－OHdG和p－EGFR在舌癌组织中高表达，阳性表达率分别为80．0％、56．7％；两者在癌旁组织中呈低表达，阳性表达率分别为16．7％、6．7％，它们在癌组织中的阳性表达率均显著高于癌旁组织（ P＜0．05），8－OHdG的表达与p－EGFR的表达具有显著相关性（ P＜0．05）。结论该研究初步确定活性氧在口腔癌中的表达和作用，以及其与磷酸化EGFR的正相关性。
关键词： 活性氧 磷酸化表皮生长因子受体 舌鳞癌 免疫组化 -
舌鳞癌原发灶及其淋巴结转移灶中CD44v3的表达
目的:研究细胞黏附分子变异体CD44v3在舌鳞癌(TSCC)原发灶和淋巴结转移灶的表达.方法:应用免疫组织化学SP法检测59例TSCC标本原发灶癌组织和其中21例发生淋巴结转移的转移灶中CD44v3蛋白的表达,并分析其与临床病理参数的关系.结果:59例原发灶标本中CD44v3蛋白表达强度,有淋巴结转移组与无淋巴结转移组之间差异无统计学意义(P>0.05).而在21例发生淋巴结转移的病例中,其转移灶癌细胞CD44v3的表达强度高于原发灶,且差异有统计学意义(P<0.01).CD44v3蛋白表达与患者的年龄、性别、组织学分级、临床分期、肿瘤大小等因素均无相关性.结论:CD44v3蛋白高表达的TSCC细胞更容易发生转移.
-
人舌鳞状细胞癌耐放疗细胞系的构建及多药耐药基因和蛋白的表达
目的:建立人舌鳞状细胞癌耐放疗细胞系并检测多药耐药基因和蛋白的表达.方法:利用人舌鳞癌细胞株Tca8113, 采用单次剂量1 Gy,每周2次的60Co照射,诱导其耐放疗性,建立一株耐放疗的人舌鳞癌细胞系.并用免疫组化以及RT-PCR检测多药耐药基因的表达.结果:耐放疗的Tca8113细胞大耐受剂量为20 Gy,多药耐药基因和蛋白表达水平明显增高. 结论:成功建立耐放疗细胞系,为口腔癌放疗耐药研究提供了细胞模型.
-
基质金属蛋白酶-9表达与舌鳞癌浸润转移的关系
目的探讨基质金属蛋白酶-9(MMP-9)在舌鳞癌中的表达及其肿瘤分化程度和淋巴结转移的关系.方法应用免疫组织化学法检测59例舌鳞癌组织中MMP-9的表达.结果 59例舌鳞癌原发灶均有MMP-9蛋白表达,随细胞分化程度增加呈递增趋势,但无统计学意义(P>0.05),TNM分期Ⅰ～Ⅱ与Ⅲ～Ⅳ相比有显著性差异(P<0.001),原发灶MMP-9表达强度与颈淋巴结转移无关(P<0.001). 结论舌鳞癌原发灶中MMP-9表达与临床分期及颈淋巴结转移有关,可作为舌癌颈淋巴结转移的预测指标.
-
舌鳞癌组织中VEGFR-3和淋巴管密度的表达及其临床病理意义
目的：检测舌鳞癌组织中血管内皮生长因子受体3(VEGFR-3)和淋巴管密度(LVD)的表达水平，探讨其与患者临床病理指标的关系。方法选取2006年1月至2014年5月搜集的舌鳞癌标本60例和正常舌体标本12例，采用免疫组化染色法检测组织中VEGFR-3和LVD的表达水平，运用SPSS19.0软件处理实验数据，统计分析VEGFR-3与肿瘤LVD之间的相关性及临床病理意义。结果 VEGFR-3在舌鳞癌组织中的高表达率为56.67%，对照组为25.00%；LVD在舌鳞癌组织中的高表达率为58.33%，对照组为16.67%；舌鳞癌中VEGFR-3和LVD的表达明显高于正常舌组织，差异均具有统计学意义(P<0.05)。VEGFR-3和LVD的高表达与淋巴结转移(PVEGFR-3=0.043，PLVD=0.019)、临床分期(PVEGFR-3=0.006，PLVD=0.015）及生存状态(PVEGFR-3=0.028，PLVD=0.015)之间均具有相关性；VEGFR-3和LVD在舌鳞癌中具有正相关性(r=0.916，P<0.001)。结论 VEGFR-3和淋巴管密度与肿瘤的侵袭、转移及预后密切相关，可作为指导舌鳞癌诊治及判断预后的重要指标。
关键词： 舌鳞癌 血管内皮生长因子受体3 淋巴管密度 淋巴结转移 -
RNAi沉默c-erb、B-2、c-raf-1表达对人舌鳞癌Tca8113细胞的干预作用
目的:探讨应用RNA干扰技术沉默c-erbB-2、c-raf-1基因表达,研究其对人舌鳞癌Tca8113细胞增殖的抑制作用及其分子机制.方法:实验分成3组:空白对照组、正常对照组、c-erbB-2、c-raf-1dsRNA联合干扰组.脂质体转染后不同时间分别进行MTT试验、电镜检测、RT-PCR,以观察不同条件处理后各组细胞的增殖、凋亡、细胞周期、mRNA及蛋白质表达有无差别.结果:c-erbB-2、c-raf-1dsRNA联合干扰组,转染72h的OD值为0.073(P＜0.005),增殖抑制率达到了94.5%,凋亡率为76.5%(P＜0.01),明显地下调c-erbB-2与c-raf-1基因mRNA及其蛋白质的表达水平.结论:在舌癌Tca8113细胞株增殖的抑制作用研究中,c-erbB-2、c-raf-1dsRNA联合干扰具有显著沉默c-erbB-2、c-raf-1基因表达.
关键词： 舌鳞癌 RNA干扰 转录后沉默(PTGS) 联合转染 -
舌鳞癌干细胞相关差异表达序列标签的生物信息学分析
目的:对利用抑制消减杂交技术获得的舌鳞癌干细胞相关表达序列标签(Expressed squence tag,EST)进行电子克隆及序列分析.方法:利用互联网上的公共数据库及生物信息学分析软件对获得的舌鳞癌干细胞相关差异表达序列标签进行核酸序列和蛋白质序列分析,探索克隆差异表达基因的研究方法和策略.结果:通过电子延伸得到1个1 705 bp的cDNA序列；核酸序列分析显示,该cDNA定位在1号染色体,含有1个编码146个氨基酸的完整开放阅读框；对氨基酸序列进行结构域预测显示其存在1个与Translin超家族同源的区域；BLAST比对显示该氨基酸序列与Translin相关蛋白X(Translin associated protein X,TRAX)具有较高的同源性.结论:利用生物信息学技术获得了舌鳞癌相关表达序列标签的基本信息,为深入研究该表达序列标签的功能奠定基础.
-
血管抑素下调人舌鳞癌细胞血管内皮生长因子的表达
目的 探讨血管抑素(angiostatin,AS)对人舌鳞癌细胞血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)表达的影响.方法 将Tca8113人舌鳞癌细胞移植到18只裸鼠皮下,用随机数字表法将裸鼠分成3组(每组6只).PBS组:注射PBS;AS(250 ng)组:注射250 ng纯化AS;AS(30 μg)组:注射30μg纯化As,腹腔注射,2次/d,同时测量肿瘤的大小,2次/周.21 d后处死小鼠,将取出的每个肿瘤2等分,一半用免疫组织化学检测VEGF及其两个受体(VEGFRl、VEGFR2)和CD34,用TUNEL法可估价检测肿瘤细胞的凋亡;另一半用半定量RT-PCR检测VEGF、VEGFR1和VEG-FR2的mRNA表达.结果 AS(250 ng)组和As(30μg)组中,细胞凋亡指数(AI)明显增加(P<0.05);而肿瘤体积、微血管密度(MVD,用CD34抗体标记并用来评价肿瘤血管生成)及VEGF、VEGFR1和VEGFR2在蛋白质和mRNA的水平表达,都有明显降低(P<0.05),且As(30μg)组更为显著.结论 As下凋人舌鳞癌细胞VEGF的表达且呈剂量依赖性.
-
舌鳞癌干细胞相关差异表达cDNA文库的鉴定与分析
目的 对构建的舌鳞癌干细胞相关差异表达cDNA文库进行初步鉴定及分析.方法 将差异表达cDNA文库中的cDNA片段转化大肠杆菌进行文库扩增和蓝白斑筛选,正反向文库各随机挑取120个白色克隆进行PCR鉴定并测序.将测序所得序列提交GenBank进行Blast同源性分析.利用PubMed数据库检索已报道的与干细胞相关的差异基因并进行生物信息学分析.结果 PCR鉴定显示挑取的克隆均为阳性克隆,测序获得224个EST片段.经同源性分析得到62个已知基因,其中9个已有相关文献报道与干细胞生物特性相关,可归类于细胞分化调节、低氧应答、细胞凋亡调节等.结论 对前期构建的干细胞相关差异表达cDNA文库进行克隆分析得到一些干细胞相关基因.
-
FasL及FasLASODN在舌鳞癌细胞免疫逃逸中的作用
目的：研究Fas配体（FasL）及FasL反义寡脱氧核苷酸（ASODN）在舌鳞癌细胞免疫逃逸中的作用。方法对人舌鳞癌细胞中FasL表达及功能进行检测，设计合成特异FasLASODN，转染舌鳞癌细胞，封闭舌鳞癌细胞的FasL表达。通过流式细胞术、逆转录聚合酶链反应（RT‐PCR）和四唑盐（MTT）等方法，观察基因‐蛋白‐细胞效应。结果通过RT‐PCR检测提示在脂质体的量一定的情况下，在一定范围内，ASO的浓度越高，转染效率越高。MTT／FCM结果显示ASO对SCC‐9细胞的增殖有明显的抑制作用（P＜0．05）。FCM对细胞凋亡的检测结果显示反义链组与正义链组、空白对照组及脂质体组相比，总凋亡率有明显差异（P＜0．05）。结论Fas／FasL途径是口腔鳞癌细胞免疫逃逸的重要机制之一，可作为免疫治疗的新靶点。
-
微小核糖核酸-21反义寡核苷酸对人舌鳞癌细胞生长抑制的体内研究
目的 研究微小核糖核酸-21 (miR-21)反义寡核苷酸(AS-miR-21)对人舌鳞癌生长的抑制作用.方法 采用稳定转染pGL6荧光素酶报告基因质粒的舌鳞癌细胞Tca8113-luc接种裸鼠,建立移植瘤动物模型,瘤体内注射AS-miR-21,应用活体成像和TUNEL等实验技术进行AS-miR-21对人舌鳞癌细胞系生长抑制的体内研究.结果 通过转染pGL6荧光素酶报告基因质粒构建了稳定表达荧光素酶活性的Tca8113-luc细胞株.裸鼠皮下荷瘤模型成瘤率高,肿瘤生长稳定.在瘤体内注射AS-miR-21后肿瘤生长减慢,活体成像中光子数偏低,肿瘤标本中坏死灶少见,细胞核变小,染色变浅,异型性减低,新生血管数减少.肿瘤组织中miR-21表达明显下降,凋亡指数升高.结论 肿瘤内注射AS-miR-21可以降低舌鳞癌细胞中miR-21的表达,促进舌鳞癌肿瘤细胞凋亡,抑制肿瘤的生长.
关键词： 舌鳞癌 微小核糖核酸-21 微小核糖核酸-21反义寡核苷酸 基因治疗 活体成像 -
脂质体介导hES基因转染人舌鳞癌Tca8113细胞及其蛋白表达
目的建立转人内皮抑素(hES)基因舌鳞癌Tca8113细胞,检测体外培养的转基因细胞基因蛋白表达.方法为了建立携带hES基因的舌鳞癌Tca8113细胞克隆,选用阳离子脂质体Lipofectamin为载体,将含hES基因的质粒--p+{BLAST}-hES转染Tca8113细胞,以Blasticidin S抗生素筛选阳性克隆.免疫组织化学S-P方法检测体外培养的转基因Tca8113细胞克隆中ES的表达.结果经Blasticidin S抗生素筛选,转染hES基因的Tca8113细胞由于具有bsr抗性基因,可以在含有50 μg/ml Blasticidin S的培养基中生长和传代,从而得到携带hES基因的Tca8113细胞克隆.该细胞在体外培养传代96 h后,经免疫组织化学检测,hES表达的强阳性(+ + +)率为100%.结论以脂质体介导hES基因转染Tca8113细胞效率高,转基因细胞具有高效表达活性目的基因产物的能力.
