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自体颅骨修补颅骨缺损的临床应用
目的 探讨自体颅骨低温保存修复颅骨缺损的临床价值.方法 对48例颅骨缺损患者采用低温保存自体颅骨修补进行治疗,并对治疗效果进行评价.结果 本组48例患者均手术修补成功,平均手术时间为90 min,切口一期愈合,骨瓣固定牢固,外形美观,无感染、出血和皮瓣坏死等并发症发生,未发现有颅骨瓣吸收及排异现象.结论 采用低温保存自体颅骨修补治疗颅骨缺损操作简单,费用低廉,特别适合于脑外伤患者,能够减轻患者经济和心理负担,尤其适合基层医院开展.
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低温保存肝脏肝功能与肝细胞糖原关系的研究
目的:探讨低温保存肝脏肝功能与肝细胞糖原含量之间的关系.方法:以兔为实验对象,术前24 h禁食、普食及普食加静脉注射葡萄糖等方法制备4组糖原含量不同的供肝模型.于供肝恢复血流2 h时,获取受体动物血液标本,以测定各组动物的肝功能状况.结果:4组供肝切取前组织内糖原含量,A组(15.42±2.60)mg/g,B组(51.83±6.61)mg/g,C组(63.22±5.84)mg/g,D组(78.58±8.46)mg/g,D组高于C组(P＜0.05),各组彼此间均有显著差异(P＜0.05).供肝再灌注2 h时,4组受体兔血液中AST、ALT及AKP含量变化均表现为A组＞B组＞C组＞D组,且各组彼此间均有显著差异(P＜0.05).结论:在供肝切取前增加供肝肝细胞内的糖原含量,有望减轻供肝冷缺血损伤程度,提高肝移植的成功率.
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冰冻机采血小板临床应用157例结果分析
目的:对机采血小板输入前后血小板数量的比较.方法:选取血小板计数＞150×109体检合格献血者,用瓦特CS-3000Piues血细胞分离仪采集全血处理,血小板预采集值3.2×1011,采集后置Forma scientisic血小板振荡仪约30min,在超净工作台使其终浓度为5.0%,摇匀置冰箱冷冻保存备用.结果:机采血小板冻融前后血小板数分别为(3.18±1.76)×1011及(2.52±1.72)×1011.经给患者输入前后1、24、48h及72h血小板数进行对比观察,输注冰冻机采血小板后1～24h内血小板数显著增高(P＜0.01或P＜0.05),48h后无显著差异.结论:机采冰冻血小板在各种创(战)伤、急救、特殊血型自身输血均可适用,尤其战备储血中有着重要意义.
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卵子玻璃化冷冻保存生育力的研究进展
随着人类辅助生殖技术的发展,卵子冷冻技术已经成为人们关注的课题,在拓宽目前辅助生殖技术服务的范围和保存女性生育能力方面有重要的价值.近年来玻璃化冷冻被认为是深低温保藏卵母细胞很有前途的选择.玻璃化冷冻卵母细胞冻融后存活率、受精率、卵裂率及移植妊娠活婴率较前有所提高,但迄今为止,人们仍缺少标准的玻璃化冷冻方案,对保护剂和载体的选择及冷冻程序等仍未达成共识.该文就玻璃化冷冻人类卵母细胞意义、卵子玻璃化冷冻的应用现状及冷冻保护剂、低温冷冻复苏对卵子的潜在危害及应用前景等研究作以综述.
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卵巢玻璃化冷冻研究进展
玻璃化冷冻技术近年来在卵巢功能低温保存中已取得了可喜成绩,尤其是在卵细胞的冷冻保存中显示出其优越性.玻璃化技术可明显减少细胞内冰晶的形成,大限度的降低细胞的损伤,但该技术尚不完善,卵细胞与卵巢组织的冷冻仍未达到令人满意的效果,很多问题还有待进一步的深入研究,如冷冻保护剂种类、浓度、程序、载体等.
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血清标本保存条件对甲状腺抗体测定的影响
目的 探讨低温长时间保存对血清甲状腺抗体(包括抗甲状腺球蛋白抗体,anti-TgAb和抗甲状腺过氧化酶抗体anti-TPOAb)测定的影响.方法 留取北京协和医院内分泌实验室2013年6月的30份剩余血清,制备甲状腺抗体低、中、高三个浓度的混合血清.低、中、高三个浓度血清分别分装在54支eppendorf管中,盖上盖子,取6支测定甲状腺抗体水平,剩余48支密封于20℃或者80℃保存3个月,观察甲状腺抗体检测结果是否有变化.使用罗氏E170电化学发光分析仪检测原始标本和保存3个月标本甲状腺抗体水平,对20℃或80℃保存前后结果进行对比分析.结果 原始的低、中、高三个浓度的anti-TgAb水平(U/ml)分别为493.6±5.6,1 010.0±I0.4和2 746±54, 20℃保存3个月后,分别为450.6±6.1,931.9±6.9和2 268±74;-80℃保存3个月后,分别为462.9±11.3,988.7±12.7和2 205±69,均与保存前测定结果差异无统计学显著性意义(P＞0.05).原始的低、中、高三个浓度的anti-TPOAb水平(U/ml)分别为170.2±8.5,289.4±5.3和432.0±8.4, 20℃保存3个月后,分别为142.6±4.2,276.1±4.9和413.2±7.5;-80℃保存3个月后,分别为155.2±1.4,278.6±9.6和384.1±8.4,均与保存前测定结果差异无统计学显著性意义(P＞0.05).结论 血清低温(20℃或80℃)保存对甲状腺抗体检测无影响.
关键词： 血清 低温保存 甲状腺球蛋白抗体 抗甲状腺过氧化酶抗体 化学发光免疫法 -
全血低温保存对血细胞参数的影响及分析
目的 探讨血样品低温(2～8 ℃)保存1 w对血细胞8个参数测定结果 的影响.方法 采集31例健康人静脉血在7d内每日测定一次血细胞的参数.结果 白细胞计数(WBC)、红细胞计数(RBC)、血红蛋白(Hb)、红细胞比积(HCT)、平均红细胞体积(MCV)、平均红细胞血红蛋白含量(MCH)、平均红细胞血红蛋白浓度(MCHC)、血小板计数(PLT)在1 w内结果 无显著性改变(P＞0.05).结论 全血样品低温放置1 w仍然可为临床提供有参考价值的血细胞参数.
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Olympus全自动生化分析仪冷凝水稀释试剂问题如何预防
Olympus AU640全自动生化分析仪的光学系统采用集束式光源技术,数码信号直接转换技术和后分光技术,使用超长寿命全息光栅,比色杯小,反应体积只有150μl,测试精度极高.样品系统采取轨道式连续加样方式,并设有专门的急诊样品盘,采用独创的多头回旋式双清洗搅拌系统"瀑布"式冲洗系统,试剂于试剂仓内低温保存,测定速度快,结果准确,操作简单、方便.
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不同方法低温保存的组织工程骨异位成骨的实验研究
目的:探讨不同方法低温保存的组织工程骨异位成骨的差异.方法:以骨髓基质干细胞(marrow stromal cells,MSCs)复合部分脱蛋白骨培养制备组织工程骨,组织工程骨分别用添加或不添加冻存保护剂的保存液于-196℃的液氮中冻存3个月,3个月后复温冻存的组织工程骨.选择40只新西兰白兔,将材料植入动物脊柱旁的肌肉内,实验根据植入材料的不同分为A、B、C和D组,A组:植入添加冻存剂保存的组织工程骨;B组:植入未添加冻存剂保存的组织工程骨;C组:植入未行低温保存的组织工程骨;D组:植入部分脱蛋白骨.术后第4、8周分别取材,行组织学观察和计算机图像分析.结果:术后第4、8周,各组异位成骨组织学评估,A组与C组比较无显著性差异(P＞0.05),A组或C组分别与B组比较,异位成骨能力为:A或C＞B(P＜0.001,P＜0.05),D组材料无异位成骨.结论:选择适宜的冻存保护剂对组织工程骨的生物活性有一定的保护作用.
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离断肢体保存的研究进展
肢体离断后因缺血缺氧,正常的代谢过程受到干扰而产生一系列的病理生理变化,导致细胞变性和组织坏死.因此对断肢进行科学保存以减少组织缺血性损伤,延缓组织变性坏死,为临床赢得再植时间,显得尤为重要.本文通过检索分析相关文献,对保存断肢的几类常见方法做一综述,涉及低温保存法、器官保存液保存法、灌注保存法、高压氧保存法和暂时异位寄养再回植等.
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不同冻存时间对脂肪组织生物学活性的影响
目的:探讨在-80℃低温条件下冻存不同时间的脂肪组织颗粒的结构及生物学活性变化.方法:将吸脂后的脂肪经过洗涤、离心后低温保存,1周、4周、8周、12周、16周、20周、24周后,对复温后的脂肪组织颗粒进行大体观察、组织学观察、活性检测、SVF细胞培养等.结果:随冻存时间的延长,脂肪组织的结构及生物学活性逐步下降,冻存1周的脂肪组织活细胞面积(35.35±4.05)％较新鲜脂肪(79.25±7.44)％显著减少,差异有统计学意义(P<0.01),冻存1周的脂肪细胞较新鲜脂肪细胞线粒体活性显著下降(P<0.01),SVF细胞培养,冻存脂肪来源的贴壁细胞数量较新鲜脂肪显著减少(P<0.01),且细胞生长缓慢、状态较差.结论:大多数脂肪细胞在一次冷冻保存过程中便失活,而冻存时间的延长与脂肪细胞活性降低的相关性并不明显,不推荐临床使用不添加保护剂直接冻存的脂肪进行移植.
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冻存后人脐血DC介导的食管癌细胞瘤苗实验研究
目的:探讨杂交瘤技术制备脐血树突状细胞(DC)和食管癌细胞的融合瘤苗在低温冻存后的生物学特性及特异性CTL活性.方法:分离脐血CD34+干细胞诱导扩增为成熟DC,与EC109细胞经聚乙二醇(PEG)法融合;免疫磁珠法筛选EC109-DC;鉴定瘤苗表型;-80℃低温冰箱冻存融合细胞EC109-DC,3周后融冻;观察融冻瘤苗表型及致瘤性;MTT法测定瘤苗诱导淋巴细胞增殖能力及体外特异性免疫应答能力.结果:融冻后疫苗体外半悬浮生长;同时高表达FR和CD80;融冻后瘤苗接种小鼠体内未见肿瘤形成;未冻存和冻存后融合疫苗EC109-DC活化的T淋巴细胞,可产生针对EC109细胞的特异性杀伤作用.结论:冻存未破坏融合疫苗的完整性;融冻后瘤苗无体内致瘤性,安全可靠;-80℃低温冰箱短期冻存对EC109-DC融合疫苗生物学特性及特异的CTL活性无明显影响,可望为DC疫苗提供简单可行的保存方法.
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二甲基亚砜和乙醇对深低温冷冻保存兔角膜的保护作用的比较
目的验证二甲基亚砜(DMSO)是否是目前好的角膜冷冻保护剂;乙醇可否替代DMSO用于角膜的深低温冷冻保存.方法将16只新鲜兔角膜随机分为DMSO组和乙醇组两组.将角膜于4℃分别浸入浓度递增的两组保护液中,冷平衡1Omin后,将标本瓶置于自制的控速降温器中,按1.5～2°C/min的速度降温至-30℃后,再以5℃/min的速度降温至-80℃,然后,将标本瓶投入液氮中冷冻保存角膜5d,取出后置于50℃流动的热水中复温.然后将角膜片取出,浸入5mL的250g/L白蛋白溶液中脱去保护剂.每组各取6只角膜,用5mL林格氏液漂洗3次.将角膜内皮朝上置于凹形角膜台上,滴入2.5g/L锥兰染色,再用林格氏液漂洗后,用2g/L茜素红(pH=5.5)染色,再漂洗3次.将角膜置于载玻片上,用光学显微镜计数并计算每只角膜平均内皮细胞存活率(ESR).每组余下的2只角膜,用林格氏液漂洗后,置于25g/L戊二醛溶液中,分别用扫描电镜和透射电镜观察内皮细胞超微结构.结果DMSO组和乙醇组平均ESR分别为96.2%±2.5%和92.6%±6.2%,两组有显著性差别(P＜0.05).扫描电镜下,DMSO组角膜内皮细胞呈六角形,细胞完整似新鲜角膜,细胞间隙稍宽.乙醇组角膜内皮亦呈六角形,但细胞间隙明显增宽,局部区域可见胞膜破裂及细胞缺损.透射电镜结果显示两组角膜内皮细胞均有线粒体肿胀,内质网扩张及胞质内空泡形成,但乙醇组改变更明显.结论本实验研究提示乙醇的冷冻保护作用不如DMSO.
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玻璃化冷冻与慢速程序冷冻法保存人MⅠ期卵母细胞的效果比较
目的:探讨玻璃化冷冻与慢速程序冷冻法对人未成熟卵母细胞的存活及胚胎发育潜能的影响.方法:体外受精-胚胎移植中获得的251个MⅠ期卵母细胞随机分3组,第1组94个先玻璃化冷冻保存,第2组63个先慢速程序冷冻保存,两组冻融后的未成熟卵母细胞再进行ⅣM,用ICSI技术对成熟卵母细胞完成授精,并进行体外胚胎培养.第3组94个MⅠ期卵母细胞先进行ⅣM,再进行玻璃化冷冻保存,与第1组先玻璃化冷冻保存再ⅣM的顺序不同,冻融后同样用ICSI技术对获得的成熟卵母细胞完成授精,并进行体外胚胎培养.结果:玻璃化冻融组复苏存活率、体外成熟率、受精率、及卵裂率均高于慢速程序冻融组(P均＜0.05);先玻璃化冷冻再ⅣM与先ⅣM再玻璃化冷冻的复苏存活率、体外成熟率、可用卵比率、受精率及卵裂率无统计学意义(P均＞0.05).结论:玻璃化冻融人未成熟卵母细胞能获得更好的冷冻保存效果;玻璃化冷冻与ⅣM的顺序不影响未成熟卵母细胞的利用.
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异物吸入堵塞呼吸道死亡法医鉴定1例
1临床资料
1.1简要案情某男，24岁，于某年12月16日，晚饭后突发全身抽搐，呼吸困难，随后被人送至医院救治，在抢救过程中死亡。
1.2尸体检验死后低温保存1 w。男性，尸长177.0 cm，发育正常，体态偏瘦。尸斑呈紫红色，位于尸体背侧未受压部位，双侧瞳孔不可透视。尸表检见头面部、躯干部及四肢突出部位散在皮肤挫伤，口周及口腔粘膜等未见损伤。 -
组织低温保存的国内外研究进展
自上世纪50年代英国学者Polge等人发现了甘油在低温状态下对组织的保护作用以来,特别是液氮(-196℃)的发现和使用,使人们在组织低温保存技术方面取得了较快的发展,且逐步应用于科研及临床的各个领域,本文就组织低温保存的原理与方法、在相关临床领域的应用进展作一综述.
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新疆地区Rh阴性冷冻血库的建立及意义
近年来低温保存红细胞在临床的应用已取得了一定的成绩,特别是稀有血型红细胞的低温保存,能及时为患者提供相合的血液进行急救起到了重要作用.就红细胞血型系统而言,Rh血型系统的临床意义仅次于ABO血型系统.白种人中Rh阴性血型占15%,黑种人中Rh阴性血型占4%,我国汉族人群Rh阴性者只占2‰～5‰,维吾尔族、哈萨克族人中Rh阴性者占2%～5%,鉴于新疆地区血型分布的特点,解决RhD阴性患者的临床用血,乌鲁木齐市血液中心于1999年11月开始对所采集的血液进行RhD血型普查,建立RhD阴性血型者档案,开展了红细胞冷冻保存,建立了RhD阴性血液冷冻血库,现将冷冻血库开展工作的情况报告如下.
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低温保存对晨尿微量白蛋白和与肌酐比值检测结果的影响
目的:了解不同时间及低温对晨尿微量白蛋白和微量白蛋白/肌酐检测结果的影响,为长时间低温下保存尿标本检测其微量白蛋白提供实验依据.方法:主要选择住院患者21名,将每位患者留取的晨尿尿标本分成5份,其中一份尿标本在室温条件下及时送检(1组),其余四份尿标本分别在-20℃冰箱内放置2周(2组)、-20℃冰箱内放置1月(3组)、-80℃液氮下放置2周(4组)、-80℃液氮下放置1月(5组)四种不同条件下.五种不同温度和存放时间的晨尿尿标本,应用免疫透射比浊法检测尿微量白蛋白,用酶法检测尿肌酐,并计算尿微量白蛋白/肌酐值.对上述所测的数据,我们采用重复测量资料的方差分析方法进行统计学分析.统计学处理采用spss13.0软件处理.结果:对重复测量资料,需满足方差分析条件进行Mauchly检验(P值为0.000),用Greenhouse-Geisser法对自由度进行校正后,采用LSD多重比较结果,各组尿微量白蛋白尿和尿微量白蛋白/肌酐值之间差异没有统计学意义.结论:在农村地区和不具备当天检测尿白蛋白的地区可采用尿标本集中低温存放和统一检测的方式做尿白蛋白的检测.
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住院部药房退药分析及改进措施
对住院部药房来说,退药一直是一个比较敏感的问题,根据卫生部在《医疗机构药事管理暂行规定》第二十七条规定[1],为保证患者用药安全,药品一经发出,不得退换.但是考虑到住院患者的特殊性,住院部药房工作的特殊性,退药情况几乎每天都在发生.退药情况不断增加,不但增加了药房工作人员的工作难度,对护理人员也加大了工作量.退回的药品只能对药品名称、数量、批号,生产日期、有效期、及性状进行核对,对于是否避光、是否低温保存很难保证,存在药品质量安全隐患.因此,笔者对我院2011年9月～2012年2月的退药申请单进行收集分析,总结如下.
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胎儿附属物来源细胞的培养冻存
目的 研究从胎儿附属物中分离培养及冻存细胞的较佳方法,以期为组织工程、细胞治疗和基因治疗提供种子细胞.方法 取足月产胎儿脐带和胎盘,用酶消化法获得细胞,用相应培养液进行培养传代.将胎盘、脐带组织块冻存,检测加入不同浓度抗冻剂二甲亚砜的组织复苏后的活细胞率,透射电镜下观察其超微结构,并与新鲜组织进行比较;冻存培养所得人脐带血管周细胞和胎膜贴壁细胞的原代细胞,用免疫化学法检测冻存前后各自免疫表型的表达.结果 新鲜脐带组织活细胞率为67.0%,抗冻剂体积分数为5%、10%、15%、20%时,冻存复苏脐带组织的活细胞率分别为23.4%、55.5%、48.8%、31.8%.抗冻剂体积分数为10%时,冻存复苏组织与新鲜组织活细胞率接近(P＞0.05),体积分数为5%和20%时与新鲜组织该指标比较,差异均有统计学意义(P＜0.01);透射电镜观察结果与之吻合.胎盘组织与脐带组织的情况类同.细胞冻存后免疫表型无明显变化.结论 本方法可以从胎儿附属物中分离培养出大量种子细胞,冻存复苏后细胞免疫表型未发生改变,抗冻剂体积分数为10%时效果好.
