附炎片质量标准研究
摘要： 目的:建立附炎片的质量标准.方法:采用薄层色谱法对处方中大青叶、连翘、大血藤进行定性鉴别;采用高效液相色谱法测定样品中绿原酸、靛玉红的含量.结果:薄层色谱鉴别方法专属性强,阴性对照无干扰;含量测定结果表明,绿原酸、靛玉红分别在16.6～133 μg/mL、0.695 ～ 5.56 μg/mL范围内与峰面积响应值呈良好线性关系(r =0.9999),绿原酸、靛玉红平均加样回收率分别99.92％、97.91％(RSD分别为2.29％、2.59％;n=5).结论:该方法准确、简便,专属性、重现性好,可用于附炎片的质量控制.
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枸杞多糖增强骨髓间充质干细胞体外抗逆境能力
目的:探讨枸杞多糖对人类骨髓间充质干细胞在体外抗逆境能力的影响.方法:将干细胞分为对照组、枸杞多糖对照组、脂多糖/双氧水或CC14处理组及枸杞多糖保护组,通过细胞活性检测、凋亡检测和Caspase活性检测等考察细胞损伤的变化.结果:枸杞多糖能有效缓解脂多糖/双氧水或CCl4诱导的细胞损伤,包括恢复细胞活力,减少细胞凋亡比例及降低Caspase-3/7/8的活性(P＜0.05～P＜0.001).结论:枸杞多糖可通过恢复细胞活力和减少凋亡有效保护骨髓间充质干细胞对抗逆境压力.
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自噬在乌头碱诱导H9C2心肌细胞凋亡中的作用及机制研究
目的:观察自噬在乌头碱诱导H9C2心肌细胞凋亡中的作用,并对其作用机制进行初步探讨.方法:以0.05％、0.1％、0.2％、0.4％浓度的乌头碱分别对H9C2心肌细胞作用30、60、90、180 min,采用MTT法测定乌头碱对H9C2心肌细胞的增殖抑制作用;0.05％乌头碱作用H9C2心肌细胞不同时间后,应用MDC荧光染色观察自噬的发生,Hoechst 33342/PI荧光双染观察凋亡的发生;并通过Western blot法检测自噬相关蛋白LC3B、Beclin-1和凋亡相关蛋白Caspase-3、Bcl-2、Bax表达的变化.结果:乌头碱对H9C2心肌细胞增殖有显著的抑制作用,且该作用呈时间及浓度依赖性;MDC荧光染色和Hoechst 33342/PI双染检测结果显示乌头碱给药后可诱导H9C2心肌细胞发生自噬和凋亡;Western blot检测结果显示,自噬特异性蛋白LC3B和Beclin-1被激活,凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax表达升高.用3-MA抑制自噬后,可下调LC3B、Beclin-1、Bcl-2蛋白表达,上调Bax蛋白表达.结论:乌头碱能抑制H9C2心肌细胞的生长,并诱导其发生自噬和凋亡,此过程中自噬和凋亡可能为拮抗作用,3-MA特异性抑制自噬后可增加乌头碱诱导的H9C2心肌细胞凋亡.
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助阳开郁方对抑郁症大鼠行为及海马神经可塑性的影响
目的:研究助阳开郁方对慢性应激抑郁大鼠抑郁行为和海马神经可塑性的影响.方法:将72只雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组、模型组、氟西汀(3.33 mg/kg)阳性对照组及助阳开郁方高(46.8 g/kg)、中(23.4g/kg)、低(11.7 g/kg)剂量组,每组12只.除正常对照组外其余各组在灌胃同时接受慢性不可预知温和刺激并孤养28 d.采用强迫游泳实验、悬尾实验、旷场实验对各组大鼠进行行为学评价;各组大鼠脑组织HE染色,光镜下观察海马组织CA3区和齿状回区神经元形态变化,免疫印迹法检测大鼠海马组织突触素(SYP)和脑源性神经营养因子(BDNF)蛋白的表达.结果:与模型组比较,助阳开郁方中、高剂量组大鼠游泳实验和悬尾实验的不动时间显著缩短,助阳开郁方高剂量组大鼠在旷场实验中穿格次数显著增多(P＜0.01),助阳开郁方中、高剂量组大鼠海马组织形态学明显改善,海马组织突触素和脑源性神经营养因子的表达均显著上调(P＜0.05或P＜0.01).结论:助阳开郁方能改善慢性应激抑郁大鼠的抑郁症状,保护海马神经元,改善海马神经可塑性从而发挥抗抑郁效应.
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复方贞术调脂方对老龄小鼠肠道组织内源性代谢物的干预作用研究
目的:运用代谢组学方法探讨复方贞术调脂方对自然衰老C57BL/6小鼠肠道组织中内源性代谢物的影响.方法:C57BL/6雌性小鼠分为3组,包括青年组(2月龄)、老龄组(24月龄)和复方贞术调脂方给药组.采用超高效液相色谱-飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF/MS)联用技术对3组小鼠肠道内源性代谢物进行检测.结果:3组小鼠的肠道组织中共鉴定出16个与衰老相关的差异代谢物.给药后,13个差异代谢物发现有显著性向青年组调节的趋势,经过对差异代谢物的分析,发现属于肠道组织化学成分的脂质和属于肠道分泌物的胆汁酸的代谢产物发生了变化.结论:老龄小鼠肠道组织的脂质和胆汁酸代谢明显异常,复方贞术调脂方可能通过调节脂质和胆汁酸代谢,从而发挥延缓肠道衰老的作用.
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毛翠雀提取物对博莱霉素致大鼠肺纤维化的保护作用
目的:研究毛翠雀提取物对博莱霉素(BLM)所致实验性大鼠肺纤维化的干预作用,并初步探讨其作用机制.方法:SD大鼠60只,随机分为6组:正常对照组、模型组、醋酸泼尼松(3.5 mg/kg)阳性对照组及毛翠雀水提物高(4 g/kg)、中(2 g/kg)、低(1g/kg)剂量组.除正常对照组外,其余各组大鼠采用气管内一次性注射盐酸博莱霉素复制肺纤维化模型,正常对照组滴注等体积生理盐水.造模后第2天开始灌胃给药,1次/d,连续14 d.正常对照组和模型组给予等体积生理盐水.给药14d后处死大鼠,分别检测大鼠肺系数及血清羟脯氨酸(HYP)、总抗氧化能力(T-AOC)、还原性谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、肿瘤坏死因子(TNF-α)、生长转化因子(TGF-β1)、白介素1β(IL-1β)、白介素4(IL-4)、白介素10(IL-10)等指标.同时取固定部位肺组织分别行HE、Masson染色,进行组织病理学观察.结果:与模型组比较,毛翠雀提取物能显著降低肺纤维化大鼠的肺系数及血清HYP、MDA、IL-1β、TNF-α水平,升高血清GSH、T-AOC、SOD、IL-4、IL-10、TGF-β1水平(P＜0.05或P＜0.01),明显改善肺泡炎症和肺纤维化程度.结论:毛翠雀对博莱霉素所致实验性肺纤维化大鼠有一定的保护作用,其机制可能与抗氧化损伤和抑制炎症细胞的浸润活化有关.
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紫茎泽兰抗肝癌活性研究
目的:为充分利用紫茎泽兰,缓解其外来物种入侵问题,本实验对紫茎泽兰进行抗肝癌活性评价,并对活性部位的毒性与抗肝癌机制进行研究.方法:运用M TT法、流式细胞术与免疫印迹法等分析紫茎泽兰各提取部位抗肝癌活性及活性部位抗肝癌机制.结果:紫茎泽兰乙酸乙酯部位具有良好的抗肝癌活性,能引起凋亡相关蛋白Caspase-3与PARP的活化,从而诱导肝癌细胞凋亡,但对正常肝细胞影响较小.结论:紫茎泽兰乙酸乙酯部位能通过激活线粒体凋亡通路发挥抗肝癌活性,具有极大的开发应用潜力.
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圣草酚-7-O-β-D-葡萄糖苷改善血管内皮细胞损伤作用机制研究
目的:探讨河南道地药材怀菊花中圣草酚-7-O-β-D-葡萄糖苷对血管内皮细胞损伤的干预作用及作用机制.方法:血管内皮细胞饥饿处理12 h后,以2.5μg/mL LPS诱导24 h,建立血管内皮细胞损伤模型.采用ELISA法检测细胞培养上清液中TNF-α、IL-6、IL-1β、VCAM-1、ET-1水平,TBA法检测MDA水平,羟胺法检测SOD水平,一步法检测NO水平,Western blot法检测细胞内MAPK信号通路p-MEK1/2、MEK1/2、p-ERK1/2、ERK1/2、p-JNK、JNK、p-P38、P38蛋白表达.结果:怀菊花中圣草酚-7-O-β-D-葡萄糖苷对该模型有明显的干预作用,可显著升高SOD、NO水平,降低TNF-oα、IL-6、IL-1β、VCAM-1、ET-1、MDA水平,并显著下调p-MEK1/2、p-ERK1/2的表达.结论:圣草酚-7-O-β-D-葡萄糖苷可能通过调节ERK/MAPK信号通路,降低炎症因子、细胞因子及氧化应激水平,从而抵抗LPS诱导的血管内皮细胞损伤.
关键词： 怀菊花 急性肺损伤 圣草酚-7-O-β-D-葡萄糖苷 -
加味苓桂术甘汤联合限食对脾虚痰湿型糖尿病脑病大鼠海马组织PI3K/Akt/mTOR通路的影响
目的:研究加味苓桂术甘汤联合限食对脾虚痰湿型糖尿病脑病(DE)大鼠海马组织PI3 K/Akt/mTOR通路的影响.方法:建立脾虚痰湿型糖尿病脑病大鼠模型,将大鼠随机分为正常对照组、DE组、脾虚痰湿DE组、限食组、加味苓桂术甘汤组、加味苓桂术甘汤联合限食组和二甲双胍组,药物干预4w.给药后测量体质量、空腹血糖、血脂;Morrs水迷宫检测大鼠学习记忆能力;Western blot检测各组海马组织PI3K、Akt、mTOR蛋白表达.结果:加味苓桂术甘汤联合限食可显著降低脾虚痰湿型糖尿病脑病大鼠体质量、空腹血糖、血清总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇水平(P＜0.05或P＜0.01);改善Morris水迷宫实验成绩(P＜0.05);升高海马组织PI3K、Akt蛋白表达(P＜0.01),降低mTOR蛋白表达(P＜0.01).结论:加味苓桂术甘汤联合限食能改善脾虚痰湿型糖尿病脑病大鼠糖脂代谢,增强学习记忆能力,其机制可能与调节PI3K/Akt/mTOR通路有关.
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拟黑多刺蚁活性组分治疗小鼠皮肤瘙痒的实验研究
目的:研究拟黑多刺蚁活性组分的止痒作用及其可能机制.方法:建立右旋糖酐诱导的小鼠瘙痒模型,观察拟黑多刺蚁活性组分对瘙痒小鼠瘙痒次数、瘙痒持续总时间及血清SOD、MDA水平的影响;建立组胺诱导的小鼠皮肤血管渗透性升高模型观察拟黑多刺蚁活性组分对血管通透性的影响,并以抗炎、镇痛实验观察拟黑多刺蚁活性组分的止痒作用及其可能机制.结果:拟黑多刺蚁活性组分可显著缩短瘙痒小鼠瘙痒总时间,增强瘙痒小鼠血清SOD活性;显著减少炎症部位渗出液的光密度;显著抑制二甲苯引起小鼠耳廓肿胀;显著提高小鼠热板痛阈值;显著减少醋酸引起小鼠扭体反应次数.结论:拟黑多刺蚁活性组分对右旋糖酐致痒及磷酸组胺的血管通透性增高具有显著的缓解作用,并具有抗炎、镇痛作用,其机理可能与升高机体的SOD活性有关.
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茵达日-4汤中“度格模农”不同基原药材对腹泻大鼠血清电解质及cAMP、ATP-ase的影响
目的:比较蒙药“度格模农”3种基原药材组成的茵达日-4汤的止泻作用.方法:80只大鼠随机分为正常对照组、模型组及止泻木子茵达日-4汤、连翘茵达日-4汤、地梢瓜茵达日-4汤、无君药茵达日-4汤的高、低剂量组,共10组.灌胃番泻叶水煎剂造模,比较各组大鼠体质量和腹泻指数,通过比浊法和微板法检测血清K+、Na+、Cl-、Ca2+浓度,酶联免疫法检测血浆环磷酸腺苷(cAMP)和三磷酸腺苷酶(ATP-ase)含量.结果:给药后,与模型组比较,各给药组大鼠一般状态与腹泻指数显著改善(P＜0.05或P＜0.01),有君药复方作用优于无君药复方,各有君药复方作用相当.地梢瓜茵达日-4汤改善血清电解质及ATP-ase、cAMP、Ca2+水平的作用较强(P＜0.05或P＜0.01).结论:4种复方均有一定止泻作用,但有君药茵达日-4汤优于无君药茵达日-4汤,而地梢瓜茵达日-4汤对腹泻导致的电解质紊乱有较好的抑制作用.该方的作用机理还有待进一步研究.
